esfatin1对脑干孤束核葡萄糖敏感神经元电活动影响

《esfatin1对脑干孤束核葡萄糖敏感神经元电活动影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、esfatin1对脑干孤束核葡萄糖敏感神经元电活动影响【摘要】目的观察nesfatin1对脑干孤束核葡萄糖敏感神经元电活动影响，探讨其抑制摄食作用的可能机制。方法采用全细胞膜片钳技术，在电流钳下，记录nesfatin1对孤束核葡萄糖敏感神经元电活动的影响。结果在孤束核中共记录到30个神经元，给予葡萄糖(5mmol/L)灌流后，有18个(60.0%)对葡萄糖有反应，其中13个放电频率升高(GEXC,t=2.509,P<0.05)，5个放电频率下降(GINH,t=12.79,P<0.01)，其余12个无反应。在13个GEXC神经元，灌

2、流nesfatin1(10nmol/L)后12个放电频率增加(t=3.346,P<0.01)，1个无反应。在5个GINH神经元，灌流nesfatin1(10nmol/L)后4个放电频率减少(t=11.877,P<0.01)，1个无反应。结论nesfatin1能够调制孤束核葡萄糖敏感神经元的兴奋性，这可能是nesfatin1作用于孤束核抑制摄食的机制之一。【关键词】nesfatin1;孤束核;神经元;葡萄糖;膜片钳术[ABSTRACT]ObjectiveToobservetheeffectsofnesfatin1onglucose

3、sensitiveneuronsinnucleustractussolitarius(NTS),andexplorethepossiblemechanismsofNTSincontrollingfoodintake.MethodsC)途径发挥抑制摄食的作用。我们以前研究了Ⅰ、Ⅱ型糖尿病病人空腹血浆nesfatin1的水平，结果显示Ⅰ型糖尿病病人空腹血浆nesfatin1水平略高于正常人，但差异无统计学意义;Ⅱ型糖尿病病人空腹血浆nesfatin1水平则均明显低于正常人和Ⅰ型糖尿病病人[2]。脑干孤束核(NTS)含有葡萄糖敏感神经元[3]，其中包括

4、葡萄糖兴奋型神经元(GEXC)和葡萄糖抑制型神经元(GINH)。许多研究证明，NTS葡萄糖敏感神经元参与摄食的调控。最近,MAEJIMA等[4]报道第三脑室注射nesfatin1诱发的cFos的表达主要位于室旁核和NTS。这种选择性的cFos表达，提示除室旁核之外，NTS也是nesfatin1抑制摄食的重要靶点之一。本实验采用全细胞膜片钳技术，通过观察nesfatin1对NTS葡萄糖敏感神经元的放电活动的影响，探讨nesfatin1在脑干NTS抑制摄食的可能机制。　　1材料和方法　　1.1实验材料　　出生14d的健康SD大鼠，体质量30～

5、40g，雌雄各半，由青岛市药检所提供。记录电极所用硬质玻璃毛坯由SUTTERINSTRUMENTCO(北京总代理)提供，氯化钠(NaCl)、氯化钾(KCl)、氯化钙(CaCl2)、硫酸镁(MgSO4)、碳酸氢钠(NaHCO3)、磷酸二氢钠(NaH2PO4)均系AMRESCO公司产品，葡萄糖(Glucose)、葡萄糖酸钾(Kgluconate)、四乙酸(EGTA)、羟乙基哌嗪磺酸(Hepes)、GTP、Na2ATP均为Sigma公司产品。　　1.2溶液的配制　　按文献[8]方法配制细胞外液和内液。细胞外液(即人工脑脊液，ACSF)的成分为：124mmo

6、l/LNaCl，3mmol/LKCl，1.3mmol/LNaH2PO4，26mmol/LNaHCO3，5mmol/LHepes，2mmol/LCaCl2，1mmol/LMgSO4，10mmol/Lglucose，用1mmol/L的NaOH调节pH值至7.35～7.45。电极内液配方:130mmol/LKgluconate，10mmol/LKCl，1mmol/LMgCl2，1mmol/LCaCl2，10mmol/LHepes，1mmol/LEGTA，4mmol/LNa2ATP，0.5mmol/LGTP，用1mmol/L的NaOH调节pH值至7.35～7.

7、45。4℃冰箱保存备用。　　1.3实验方法　　1.3.1大鼠脑干NTS脑片制作大鼠乙醚麻醉后，迅速断头，剪开头皮，去除颅骨，于含体积分数0.95O2和0.05CO2冰冷的ACSF中取下脑干组织块，放于浸有ACSF的滤纸上将脑干修块，然后同琼脂块一起用502胶水粘在切片槽的固定位置。槽中含有冰冷的ACSF(0℃左右)，并不断通入含体积分数0.95O2和0.05CO2的混合气体。使用振动切片机(S1.5[6]及SPSS统计学软件进行数据处理，结果以±s表示，数据间比较采用t检验。　　2结果　　2.1NTS葡萄糖敏感神经元的鉴定　　实验共记录到30个具有自发放

8、电的神经元，灌流含葡萄糖(5mmol/L)的ACSF后，其中13个神经元(43.