附“移液器操作”操作考核步骤与操作规范

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1、“移液器使用和养护”操作考核说明移液器的考核旨在规范移液器的使用，利用葡萄糖试剂盒（Glucosekit）检测血清标准品的吸光值，主要考察移液器的操作规范和加样的准确性。1考核标准：21.1检测结果（CV值、R值）参考标准：：1.1.1CV值：CV≤3.0为及格，CV值越小，表示每次加样越均一、误差越小；2221.1.2R值：R≥0.9960为及格，R值越接近1，3点稀释越接近同一条直线，表示稀释越精准。1.2、成绩计算1.2.1．考生考核成绩由酶标仪测定成绩和考生操作成绩两部分组成；酶标仪测定成绩（即结果成绩）占60%，；考生操作成绩占40%；1.2.2.考生最终成绩以百

2、分制计算（结果成绩满分为60分，操作成绩满分为40分），结果成绩折算方法：结果成绩＝108/CV值（即CV值小于1.8者，结果成绩为满分）；1.2.3第一次通过，最终成绩不作减分处理；第二次才通过，最终成绩＝60+（第二次成绩－60）x80%。2材料和试剂的准备：2.1100μL、20μL、10ul、2.5μL四种规格的移液器各1把。2.2200μL、10μL两种规格的吸头各一盒。2.3工作液、标准品、灭菌超纯水（ddH2O）。3操作步骤：3.1、吸取适量工作液（不少于2400μL）。3.2、准备好①标准品原液②稀释液A(1/2原液浓度)③稀释液B（1/4原液浓度）。稀释液

3、A和稀释液B的配制方法如下：稀释液A：28μL＝14μL标准品原液＋14μL超纯水稀释液B：18μL＝9μL稀释液A＋9μL超纯水3.3、将工作液加入酶标板孔中，每孔加100μL，共8（孔）×3（排）=24个孔；13.4、向装有工作液的3行8孔酶标板中分别加入①标准品原液（第一行）②稀释液A（第二行）③稀释液B（第三行）各一行，每孔加入2.0μL（注意：每孔须换枪头）；3.5、加样完成，将酶标板轻轻摇匀后,放入PE手套内，并做好标记（姓名）,然后放入37℃恒温箱内温浴15min。此间考生可以在考核室外等待。待温浴时间到，取出酶标板至酶标仪检测。3.6、检测结束，监考人员登记

4、考试结果后，考生离开考场。附：1考试时间安排1.1考试时间：考生需按照安排时间提前10min至考核室签到，如有事无法进行考核，应安排替换人，并尽量于前一天邮件通知培训部负责教务的同事，或至少提前30min电话通知，如开考尚未签到，视为缺考。1.2考试时间为30min（其中操作时间为20min），从考生进入考场开始计时，考生必须在规定时间内完成所有实验操作，考试时间结束，考生应立即停止操作，将装入手套的酶标板放入烘箱，收拾好台面，离开考场。若超出时间在5min以内，每分钟扣除1分，若考生超出5min以上，则此次考试作不通过处理。2考场纪律2.1考生应按时进入考场，考核期间保持

5、安静。考试完毕的考生应尽快离开考场，等温浴时间到时再返回考场取出酶标板进行测试，测试完毕后应迅速离开考场，不得在考场围观。违反者取消当天考试资格。2移液器考核操作规范考点说明考生考核前，须仔细阅读本考核规范，进入考场时，监考老师不再对考核原理及流程进行说明。1实验准备：1.1在进入实验室前，自觉穿上实验服，实验前带好手套，必要时戴上口罩，用酒精擦拭桌面。1.2物品摆放规范：准备所需的物品，以“规范操作，防止污染”为原则——通常为“左净右脏”，合理摆放。1.2.1操作人正前方为操作区，试剂放于操作区左方，将枪头盒放在操作区的右方，将垃圾桶放于操作区的右方较远处，并尽量远离操作

6、区和枪头盒。1.2.2附图：实验物品摆放图移液架试剂枪头盒垃圾桶操作区2加样2.1握枪姿势规范2.1.1考生在吸排液体时，握移液枪姿势正确，垂直吸排液。若操作需要，无法0保持垂直，移液器倾斜度不允许超过45；2.1.2手不能接触枪套筒下端作为支撑，防止污染，若手抖难以控制，只可扶住移液器套筒的上端部分支撑；2.2装配枪头：将移液器吸嘴垂直插入吸头，向下轻压，顺时钟微微旋动，上紧即可；不允许采用上下反复撞击的方式上枪头；2.3吸液：2.3.1吸头进入液面深度控制好；参考深度：10ul吸头——1～2mm3200ul吸头——2～3mm1000ul吸头——3～5mm2.3.2慢吸慢

7、打，不允许出现液体倒吸至移液器内部；2.3.3吸液完成，吸头需在液面下停顿1s左右，再离开液面。2.4排液：2.4.1匀速按下控制按钮排液，第一档打完，停顿1s左右后，再打第二档；2.4.2吸头离开液面后，才可放开控制按钮；2.5按弹射键将吸头丢弃。3实验素质操作规范：以“保护试剂，防止污染”为原则3.1在实验操作过程中，酶标板底不可直接接触桌面，中间铺上塑料手套；3.2移液枪放置：加样期间不用移液器时需放置枪架上，不可水平放置在桌面；更不允许在移液器吸头内有液体时将其横放；3.3EP管的使用：3.3.1考生从盒子