猪流行性腹泻的实验室诊断方法

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1、主题策划FEATURE猪流行性腹泻的实验室诊断方法*李思银，杨亮宇，杨玉艾（云南农业大学动物科学技术学院，云南昆明650201）摘要：猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起的猪的一种以呕吐、腹泻和食欲下降为基本特征的高度接触性肠道传染病。其流行病学和临床症状与猪传染性胃肠炎很类似，无法通过临床症状、流行病学和病理变化进行确诊，必须借助于实验室检查方法才能确诊。本文对目前常用的猪流行性腹泻病毒的实验室检查方法、病毒的分离鉴定、微量血清中和试验、免疫电镜、免疫荧光、ELISA、RT-PCR进行了阐述，旨在为该病的诊断及防控提供理论依据。关键词

2、：猪；流行性腹泻；实验室；诊断猪流行性腹泻（porcineepidemic该病的流行区域有不断扩大的趋势，育肥猪的发病率可达100％，母猪的diarrhea，PED）是由猪流行性腹泻病成为严重危害养猪业的传染病之一。发病率在15％～90％，哺乳仔猪尤为毒（porcine epidemicdiarrheavirus，1病原学严重，病死率平均为50％，成年母猪PEDV）引起的一种猪的高度接触性PEDV为冠状病毒科冠状病毒属发病率10%～90％。病猪和带毒猪是肠道传染病，病猪以严重腹泻、呕的成员，有囊膜，囊膜上有花瓣状纤主要传染源，被含有病毒

3、的粪便污染吐和脱水为主要临床特征[1]，俗称冬突，长12～24 nm，由核心向四周的运输车辆、饲养员的鞋子或其他带季拉稀病。本病于1977年由比利时放射，其间距较大且排列规则，呈毒的动物，均可成为本病的传播媒介，的Pensaert首先发现，并从病料中分皇冠状。该病毒平均直径为130 nm主要通过消化道传播，也有经呼吸道离出一株不同于猪传染性胃肠炎病毒（95～190 nm），在外界条件下呈球传播的报道。PEDV可在猪群中持续（transmissiblegastroenteritisvirus形，而在粪便中常呈现多种形态。目存在，并能在猪体

4、内产生一定的免疫ofswine，TGEV）的病毒，将其命名前发现，该病毒只有一个血清型，不记忆。各种年龄的猪对该病均易感，为类冠状病毒（CVL）CV777株。随能凝集人、兔、猪、鼠、犬、马、 羊、本病多发生于冬季，12月份至翌年2后英国、匈牙利、西德、加拿大、日牛的红细胞。该病毒对外界抵抗力弱，月份为本病的高发期，夏季也可发生。本等国相继报道有该病的发生。1982对乙醚、氯仿敏感，一般消毒药可将PEDV可单一感染，也可与TGEV混年国际病毒分类委员会将该病毒归类其杀灭，60 ℃ 30 min，可使其失去合感染，但以混合感染较为常见。近为

5、冠状病毒属。我国于1980年首次分感染力，但在4 ℃，pH 5.0～9.0、年来，临床上出现了PEDV与猪圆环离得到PEDV，以后许多地区均报道有37 ℃，pH 6.5～7.5或50 ℃条件下病毒（porcine circovirus，PCV）混该病的发生。据有关部门对我国26个相对稳定。合感染的报道，但发病原因尚不明确。省、市、自治区1987-1989年疫病普2流行病学3临床症状查的不完全统计，在36种猪病总死亡该病仅发生于猪，各种年龄的猪PED常以暴发性腹泻的形式发生率中该病的死亡率占1.74％。近年来，均可感染发病，哺乳仔猪、架子

6、猪和在非免疫断奶仔猪或各种年龄的猪，主要临诊症状与TGE相似，多表现为资助项目：云南省科技厅项目（2008CD129）水样腹泻，粪稀如水，呈灰黄色或灰作者简介：李思银（1987～），女，湖南人，硕士研究生，临床兽医学专业。色，或于进食或吮乳后伴发呕吐，但通讯作者：杨玉艾（1978～），女，陕西人，博士，硕士生导师，临床兽医学专业。程度较轻，传播稍慢。病猪具体临床54猪业科学  SWINE INDUSTRY SCIENCE  2010年 第12期主题策划FEATURE表现因年龄不同而有差异，年龄越小，现明显的CPE，第5代毒价临诊症状越重

7、。1周龄内新生仔猪常于可达10-7.0/0.1mL，并通过腹泻后2～4 d内因脱水而死亡，病死乳猪回归试验和特异性中和率可达50％。断奶猪和肥育猪以及母试验证实所增殖的病毒为猪猪常呈现沉郁和厌食等临诊症状，持流行性腹泻病毒[3]。这些病续腹泻4～7 d，逐渐恢复正常。成年毒分离鉴定的方法对PED猪仅表现沉郁、厌食、呕吐等临诊症血清学、病原学、免疫学等状，如果没有继发其他疾病并护理得方面的研究提供了一个良好当，猪只很少发生死亡。少数病猪出的技术平台，但由于病毒的现体温升高1～2 ℃，精神沉郁，食分离鉴定需要有一套成熟的欲减退或废绝，尤其是

8、繁殖种猪。细胞培养体系，而且PEDV4病理剖检需要在细胞系中连续传代才能出现明min离心后，通过电镜观察到了典型该病的病理剖检变化主要在小肠，显的CPE，目前尚无法推广应用。的病毒粒子形成的免疫复合物，并建