elisa两步法对献血者hbsag阳性淘汰率影响的分析

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1、ELISA两步法对献血者HBsAg阳性淘汰率影响的分析文远蓉1李轶2何毅1万里科1李书平1刘胡敏1张杰1谢石全1（1成都市血液中心四川成都610041）（2成都医学院四川成都610083）目的：探讨EUSA两步法全面实施后献血者HBsAg阳性淘汰率升高的原因。方法：对成都市血液中心2005年至2011年献血者血液标木进行HBsAg检测，比较阳性淘汰率变化趋势，分析新投入使用的两步法HBsAg试剂的灵敏度和特异性。结果：EUSA两步法全面实施后HBsAg阳性淘汰率上升约0.7%，新投入使用的两步法试剂检测室

2、内质控品的S/CO值均比一步法试剂结果高。结论：两步法ELISAHBsAg试剂提高了检测灵敏度，但对其特异性也应达到较高的水平。【关键词】两步法献血者HBsAgR446.llA2095-1752（2012）12-0107-02乙型肝炎是通过与血液接触有关的危险行为进行传播的［1］，乙型肝炎感染献血者对血液安全构成直接的威胁。中国一直都是一个乙肝大国，因此对献血者HBsAg的检测显得尤为重要。EUSA法是目前HBsAg检测的主要方法，而ELISA两步法相对于一步法而言，由于消除了钩状效应，在一定程度上降低了

3、HBsAg检测的漏检率，HBsAg淘汰率肯定有一定的上升，但检测方法改进所引起的阳性率升高应该在一个合理的范围。而EUSA两步法全面实施后献血者HBsAg检测阳性淘汰率如果出现异常升高，就应该分析所使用试剂的特异性是否符合工作要求。为此对产生这种现象的原因进行分析。1对象与方法1.1对象2005年01月至2011年12月期间，对成都地区献血者的血液样品进行检验，选择HBsAg检测结果为阳性的献血者作为研究对象。1.2方法1.2.1试剂及设备HBsAg检测设备：KUBOTA8410和8420型离心机（日本K

4、UBOTA公司）；AT+2全自动加样器、STAR全自动加样器和FAME全自动酶免分析仪（瑞士HAMILTON公司）。试剂：乙型肝炎病毒表面诊断试剂盒（1:国产试剂盒A、国产试剂盒B、国产试剂盒C，2:进口试剂盒（MurexBiotechLimited）。质控品：0.2IU/ml和0.5IU/ml（卫生部临检中心）1.2.2检验方法进口试剂MurexHBsAgVersion3—直采用两步法检测HBsAg。国产乙型肝炎表面抗原诊断试剂盒2011年7月以前采用一步法，2011年7月后采用两步法，试剂均为A厂家。

5、1.2.3判定标准国产与进口试剂同吋进行检测，如任•一试剂出现阳性，则双孔复査，复査后两孔阴性结果判断为阴性，否则判为阳性。1.2.4不同方法对低值质控品检测结果的比较用一步法对0.5IU/ml、两步法对0.2IU/ml的质控品分别进行检测，并对其S/CO结果进行比较。1.2.5国产两步法试剂结果比对抽取MurexHBsAgVersion3检测结果为阴性而使用国产两步法A试剂检测结果为阳性的血液标本，用两步法A试剂、B试剂以及C试剂同吋检测。对三种国产试剂的检测结果进行比较。2结果2.12005-2010

6、年间因HBsAg检测阳性而淘汰的血液产品比例基本保持平稳，2011年淘汰率突然明显升高，见表1。表12005-2011年HBsAg检测阳性结果2.22011年7月因使用国产A两步法试剂，HBsAg检测阳性淘汰率比例突然明显持续的升高，见表2。表22011年1-12月HBsAg检测阳性结果2.32011年1-6月采用一步法和2011年7-12月采用两步法后质控品S/CO结果比较,來用两步法后试剂的灵敏度明显提高。见表3。表3国产A试剂一步法和两步法检测质控品S/CO结果比较2.4选取HBsAg（进口Mure

7、xVersion3）试剂检测结果为阴性，A试剂检测结果为阳性的血液标本，再用A、B以及C三种国产试剂检测，A试剂特异性最低，见表4。表4A试剂、B试剂及C试剂检测18份血液标本的结果比较3讨论乙型肝炎的流行率在我国处于下降趋势，其感染率己从10%降低到7.18%［2］。乙型肝炎流行率与献血者HBsAg阳性率有一定的关系，因此，在没冇发生大的公共卫生事件且我们的招募对象也没有发生明显变化的情况下，献血者乙肝阳性率变化应该不会太大。但是本次调查结果表明2005-2010年期间献血者HBsAg阳性率一•直处于平

8、稳的状态（1.1%左谷），然而2011年7月以后阳性检出率突然上升到1.7%。为此笔者对产生这种现象的原因进行了分析。ELISA一步法与两步法均是0前检验科常用的免疫学检测方法，苏基本步骤包括包被抗体（抗原），加待测抗体（抗原），再加相应酶标记抗体（抗原｝，生成抗原（抗体）一待测抗体（抗原）一酶标记抗体的复合物，加入底物，底物被酶催化后生成有色产物，根据其颜色反应的深浅进行定性或定量分析［3】。一步法与两步法主要区别在于一步法