鲟鱼种质鉴定技术的发展及应用

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1、技术交流│责任编辑于喆│北京市鲟鱼、鲑鳟鱼创新团队专栏鲟鱼种质鉴定技术的发展及应用◎文董颖胡红霞北京市水产科学研究所，渔业生物技术北京市重点实验室鲟鱼是一类有重要经济价值的大型亚冷水性鱼类，是目前地球上最古老和最原始的鱼类之一，距今已有两亿多年的历史，被称为“水中活化石”。全世界现存鲟鱼共27种，全部隶属于硬骨鱼纲、辐鳍亚纲、软骨硬鳞鱼总目的鲟形目。其中鲟科（Acipenseridae）有鳇属（Huso）2种、鲟属（Acipenser）18种、铲鲟属（Scaphirhynchus）2种、拟铲鲟属（Pseudoscaphirhynchus）3种；白鲟

2、科（Polyodontidae）有白鲟属（Psephurus）和匙吻鲟属（Polyodon）各1种。由于环境污染、过度捕捞、沿江河水利工程对其生殖洄游通道的阻断等人为因素，以及鲟鱼本身存在的性成盾的唯一方法。鲟鱼可适应多种养殖方式，如工厂化、池塘、网箱、流熟晚、幼体成活率低、种群恢复慢等特水养殖模式等。我国从上世纪90年代起开展鲟鱼人工养殖，目前年产鲟点，致使世界范围内的野生鲟鱼种质资鱼商品鱼约3万吨，占世界总养殖产量的80%左右，已经成为了世界上源日渐枯竭，多数种处于濒危或极危状最重要的鲟鱼生产大国。态，目前所有的鲟鱼都已被列为《濒危一、技术需求

3、野生动植物种国际贸易公约》附录Ⅱ或附录Ⅰ物种。鲟形目鱼类具有高染色体数和多倍性的特点，因此鲟鱼中产生可活在野生鲟鱼资源日益枯竭的同时，的种间或属间杂交的可能性要远远高于其他鱼类。有研究发现一些生活由于其重要的经济价值，市场对鲟鱼产在同一水域的不同种鲟鱼能够自然杂交并产生少量杂交后代，因此可能品的需求却逐年增加。因此人工养殖就对鲟鱼野生种质资源造成一定的污染。另外，随着鲟鱼人工养殖规模的成为解决鲟鱼资源保护与市场需求间矛逐年扩大，越来越多人工繁育的杂交品种被推出，也进一步加剧了鲟鱼702014年第10期│责任编辑于喆│技术交流种质资源的混杂。多态性（

4、RestrictionFragmentLengthPolymorphism,RFLP）、单链构象多我国目前还没有比较严格的鱼类引态性分析（Single-StrandConformationPolymorphism,SSCP）、扩增片断种及保种规范，各鲟鱼繁育场有的根据长度多态性（AmplifiedFragmentLengthPolymorphism,AFLP）、微卫星市场需求进行繁育和杂交育种，有的只DNA（MicrosatelliteDNA）分子标记和物种特异性PCR技术等，并在鲟要能够催产成功的亲鱼就随意杂交，因鱼鱼子酱鉴定方面取得了成功。此出现

5、了大量的杂交鲟品种，甚至是杂RFLP（RestrictionFragmentLengthPolymorphism，限制性内切酶片交种再次杂交获得的三杂交品种。全部段长度多态性）属于第一代DNA分子标记技术，是基因型之间限制性酶鲟鱼都被列为国际濒危动植物种保护公切位点上碱基的插入、缺失、重排或点突变所引起的变化，经酶切和电约（CITES）附录2中的保护动物，相泳分离出不同的限制性片段，并通过片段的长度变化反映其基因型的变关鲟鱼产品都需要标识品种、产地等信化。经过发展，该技术还可以与PCR（聚合酶链式反应）技术相结合称息；而且不同种鲟鱼的生长速度、适应

6、为PCR-RFLP技术，以扩增替代酶切，使得DNA多态性检测更加直接、条件、抗逆性、售价等各不相同，特别快速。在鲟鱼种质鉴定中，PCR-RFLP技术主要被用来进行鱼子酱品种是其鱼子酱售价的巨大差别（如欧洲鳇的鉴定。Wolf等利用不同限制性内切酶对俄罗斯鲟、施氏鲟、小体鲟、鱼子酱的价格超过5000美元/公斤，俄罗西伯利亚鲟等十种鲟鱼的线粒体细胞色素b序列进行酶切，结果可以用斯鲟的鱼子酱约为4000美元/公斤，西伯于区分这些鲟鱼的鱼子酱制品。Ludwing等利用七种限制性内切酶成功利亚鲟的鱼子酱约为3000美元/公斤，而鉴别出22种鲟鱼中的17种。小体

7、鲟的鱼子酱基本没有市场），使得SSCP分析技术是根据碱基改变会影响单链DNA空间构象的原理，不同种鲟鱼苗种和商品鱼的市场需求和使得空间构象有差异的单链DNA分子在聚丙烯酰胺凝胶中由于受到不同售价也不尽相同；因此种质混杂现象给阻力而导致电泳速度不同，经染色后可在凝胶上显现结果的一种技术。我国鲟鱼产业发展带来隐患。Rehbein等利用线粒体细胞色素b区域扩增出的两段序列进行PCR-SSCP由于不同品种鲟鱼的外部形态都分析，可以对俄罗斯鲟、小体鲟、欧洲鳇、闪光鲟和裸腹鲟的鱼子酱进较为相似，特别是杂交鲟的外形特征行区分，这两段扩增序列（小于150bp）既保

8、证了单个碱基替换对单链可能偏向亲本之一，也可能介于父母本DNA空间结构的影响，同时也可以降低过长片段对种内鉴定的误差。之间