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时间:2018-04-16
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1、学位论文独创性声明本人郑重声明:1、坚持以“求实、创新’’的科学精神从事研究工作。2、本论文是我个人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成果。3、本论文中除引文外,所有实验、数据和有关材料均是真实的。4、本论文中除引文和致谢的内容外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。5、其他同志对本研究所做的贡献均已在论文中作了声明并表示了谢意。研究生签名:叁壁丝日期:丝包』21学位论文使用授权声明本人完全了解南京师范大学有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送
2、交论文的电子版和纸质版;有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅;有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索;有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。研究生签名:生堕壑日期:塑!!:查:型摘要摘要
3、
4、IIIIlllIlllllllIY1726424真核微型浮游生物是地球上最多的真核生物。它们主要由微型藻类和原生动物组成,是微食物网的主要成员,并在营养级动态、生物地球化学循环等生态过程中起重要的作用。因为它们通常缺乏充足的形态学分类特征,而且很多原
5、生生物离开自然水体后容易变形,所以通过传统的显微镜镜检方法很难鉴定这类生物体。在过去的几年里,运用分子生物学手段研究真核微型浮游生物群落结构的越来越多,主要方法有聚合酶链式反应.变性梯度凝胶电泳(polymerasechainreaction—denaturinggradientgeleletrophoresis,PCR.DGGE)、末端限制性片段长度多态性(terminalrestrictionfragmentlengthpolymorphism,T-RFLP)和构建18SrRNA克隆文库及序列分析(
6、Cloning/Sequencing)等,这些方法揭示了水体中真核微型浮游生物具有较高的生物/基因多样性。蓝藻水华是富营养化湖泊的重要特征之一,以往关于真核微型浮游生物群落结构的研究都没有涉及到蓝藻水华对其的影响,本论文通过聚合酶链式反应.变性梯度凝胶电泳、末端限制性片段长度多态性和构建18SrRNA克隆文库及序列分析的方法,研究了蓝藻水华对真核微型浮游生物群落结构的影响,主要内容包括:太湖蓝藻水华对真核微型浮游生物群落结构水平分布的季节变化影响;通过原位受控实验,分析了不同浓度微囊藻对枝角类和真核微型
7、浮游生物群落结构关系的影响及对细菌群落产生的串联效应;暴发蓝藻水华的湖泊(滇池、星云湖、太湖和巢湖)中真核超微型和微型浮游生物群落结构的空间差异。2008年2、5、8和11月在太湖梅梁湾进行断面采样,通过PCR.DGGE、T-RFLP和构建18SrRNA克隆文库的方法,研究真核微型浮游生物(0.8"-'20rtm)在微囊藻的影响下其群落结构的水平分布。结果显示2月份敞水带与沿岸带的相似度最低,而5月份相似度最高。总计分析了339个阳性克隆子,最后得到了69个OTUs(opermionaltaxonomi
8、cunit)。根据测序和比对结果发现主要种类属于囊泡虫(alveolata)、异鞭毛虫(gramenopiles)、绿藻(chlorophyta)。另有19个OTUs(69个克隆子)与已知的真核生物序列不同。不同季度真核微型浮游生物的群落结构差异明显,敞水带和沿岸带的群落结构也有差异:2月份多样性最低,5月份的多样性较高。典型对应分析(canonicalcorrespondenceanalysis,CCA)和冗余分析(redundancyanalysis.RDA)结果表明,敞水带和沿岸带的真核微型浮游生
9、物群落结构的差异和季节变化与营养水平、底泥再悬浮和后生浮游动物的捕食有关。2009年5月通过添加不同浓度的微囊藻和不同种类的枝角类(短钝潘摘要Daphniaobtusa和象鼻潘Bosminaspp.),分析微囊藻对枝角类控制微食物网结构的影响。结果表明,不同浓度的微囊藻和不同种类的枝角类对纤毛虫的影响差异显著。真核微型浮游生物(O.8"'20pm)的DGGE指纹图表明,第7天和第15天分别检测到72和82条不同的条带。双因素方差分析表明,第7天,微囊藻浓度对Shannon.Weaver指数、Simpso
10、n指数和Pielou指数都有显著影响,枝角类种类对Pielou指数有显著影响,两者共同作用对Shannon.Weaver指数有显著影响。配对,检验表明,第7天与第15天的三个多样性指数均无显著差异。聚类分析表明,第7天短钝潘处理和象鼻潘处理大致形成了两个明显的分枝;而第15天按微囊藻的浓度分化成三个分枝。细菌的DGGE指纹图谱表明,第7天和第15天都检测出66条不同的条带。双因素方差分析表明,第7天表征细菌群落特征的Shannon.Weav
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