番茄抗坏血酸相关渐渗亚系的构建及qtl初步定位

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1、2015(1):19-23中国蔬菜CHINAVEGETABLES研究论文番茄抗坏血酸相关渐渗亚系的构建及QTL初步定位*张 敏 李汉霞 叶志彪 张余洋(华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室,湖北武汉430070)摘 要:部分潘那利番茄渐渗系具有抗坏血酸(AsA,又名VC)高积累特性,但渐渗片段区间偏大。本试验拟得到与AsA相关的渐渗亚系,解析AsA积累相关的QTL位点。构建了IL8-1与M82杂交的F2及F2:3家系遗传群体,根据生物信息学软件分析筛选分子标记用于群体的检测,最终得到4个纯合的重组单株,分别命名为48-1(5

2、cM)、281-2(13cM)、559-1(20cM)、281-7(3cM),覆盖IL8-1(22cM)渐渗区间。对亲本及得到的重组单株进行AsA含量的测定,结果显示IL8-1总AsA含量显著高于M82。渐渗亚系48-1、281-2、559-1的总AsA含量均显著高于M82。而亚系281-7的总AsA和还原态AsA含量都显著低于M82。结合分子标记检测和AsA含量测定可以得出,IL8-1中与总AsA相关的主效基因在标记U221657和At5g46630之间的基因组区域(5cM),与还原态AsA相关的主效基因在At5g27390

3、和At5g46630之间的基因组区域(13cM)。而在Indel-3和CT-92之间(3cM)可能存在AsA的负向调控位点。关键词:抗坏血酸;QTL;渐渗亚系;番茄抗坏血酸(AsA),又名VC,是一种极强的抗出,主要有半乳糖醛酸途径(Agiusetal.,2003)、氧化物质,在人体的健康保护方面起着非常重要的古洛糖途径(Wolucka&vanMontagu,2003)和肌作用。由于人类自身已经丧失了合成AsA的能力醇途径(Lorenceetal.,2004)。其中D-甘露糖/L-(Nishikirnietal.

4、,1994),只能通过饮食来补充,半乳糖途径涉及GDP-D-甘露糖、GDP-L-半乳糖、新鲜的水果和蔬菜是人类获得AsA最主要的来源。L-半乳糖和L-半乳糖-1,4-内酯等中间产物,AsA在植物中也是一个多功能的代谢物,AsA参与是植物AsA生物合成的主要途径(Lorenceetal.,植物细胞生长和分裂,影响植物激素生物合成,2004)。调控开花时间和衰老、胁迫防御的启动。同时AsA在植物AsA生物合成途径提出的基础上,番在抗氧化和清除自由基、光合作用和光保护、辅酶茄AsA生物代谢途径中关键酶及基因相继被分离、及信号分子等诸

5、多方面有着非常重要的生理功能。鉴定,包括GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶(GMP)、虽然动物AsA的合成途径早在1960年就已经GDP-D-甘露糖3′,5′-表型异构酶(GME)、L-半揭示清楚,但直到1998年Wheeler等(1998)才提乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶(GLDH)、半乳糖醛酸出了植物中AsA合成的第一条途径,即D-甘露糖/还原酶(GalUR)、抗坏血酸氧化酶(AO)、抗坏L-半乳糖途径。随后其他的合成途径也陆续被提血酸过氧化物酶(APX)和脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)等。在番茄中超量表达GME基因的两张敏,女,硕士研究生

6、,专业方向:蔬菜分子生物学与遗传育种,E-mail:个家族成员GME1、GME2使番茄叶片和红熟果实zhang117min@163.com中AsA含量显著上升,且提高了番茄对氧化逆境、*通讯作者(Correspondingauthor):张余洋,男,博士,教授,专业方向:冷害、盐害的抗性(Zhangetal.,2011)。低温胁迫番茄分子生物学与分子育种,E-mail:yyzhang@mail.hzau.edu.cn下番茄果实中单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)收稿日期:2014-05-09;接受日期:2014-08-15活性

7、与AsA含量之间存在密切联系,暗示逆境条基金项目:国家自然科学基金项目(31171974),国家“973”计划项目(2011CB100600)件下MDHAR对调控番茄果实AsA的含量发挥着十—19—《中国蔬菜》学术论文下载www.cnveg.org研究论文中国蔬菜CHINAVEGETABLES分重要的作用(Stevensetal.,2008)。etal.,1994)。2012年春季在华中农业大学蔬菜基植物AsA含量是一个数量性状,而且AsA积地以IL8-1为父本,以M82为母本进行人工授粉杂累受生物自身生长发育和环境因子

8、调控。番茄AsA交,获得F1。2013年春季自交得到F2群体,群体合成中的调控机制尚不明确。正向遗传学分析有望包含669株。2013年秋季自交得到F2:3家系。对发掘与AsA相关的新的位点。渐

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