用于黄瓜白粉病抗性鉴定的indel 标记

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1、研究论文中国蔬菜CHINAVEGETABLES2015（9）：26-30用于黄瓜白粉病抗性鉴定的InDel标记1231131*聂京涛　李晓丹　姚永康　潘俊松　何欢乐　刘士辉　蔡　润12（上海交通大学农业与生物学院，上海200240；上海市崇明县堡镇农业综合技术推广服务中心，上海3202157；上海孙桥现代农业联合发展有限公司，上海201203）摘　要：根据黄瓜白粉病抗性主效基因/QTL的插入/缺失突变，将其设计成共显性的InDel分子标记。通过群体连锁分析，发现InDel-MLO1标记与黄瓜白粉病抗性主效基因共分离。应用该标记对24份来自世界各地且白粉病抗性已知的黄瓜

2、材料进行抗性验证，21份材料的抗性表型与标记的带型一致，说明在黄瓜进化和驯化过程中，造成抗病表型的该插入/缺失突变发生普遍。因此，该InDel标记适合于大多数黄瓜材料的白粉病抗性鉴定和分子标记辅助育种，从而加快黄瓜白粉病抗病育种的进程。关键词：黄瓜；白粉病；InDel标记；分子标记辅助育种；基因Mlo黄瓜白粉病是由专性寄生菌Podosphaera还可将多个抗病基因整合到一个品种，显著提高育xanthii引起的世界性真菌病害，可在黄瓜整个生种效率，缩短育种时间，而且大幅度提高了抗病的育期发病，造成严重的经济损失（刘秀波等，力度和持久性。2005）。培育抗病的黄瓜品种是解决

3、白粉病危害的上海交通大学农业与生物学院园艺植物分子最佳方法（顾兴芳等，2005）。田间施药易造成农育种实验室通过图位克隆，已经对黄瓜白粉病抗药残留，影响果实品质，危及食品安全，并且会污性主效基因/QTL（quantitativetraitloci）进行了精染环境。长期施药还会促进白粉病菌生理小种产生细定位并获得了白粉病抗性候选基因（Nieetal.，抗性，从而增加防治难度。由于常规的抗性育种费2015）。通过对亲本间候选基因Mlo测序发现，1时费力，需要经历多代回交和杂交的过程，黄瓜白个1449bp片段的插入/缺失造成了蛋白功能的缺粉病抗性一般为隐性基因控制，回交

4、选育过程中需失，从而形成了白粉病抗性表型。利用此插入/缺要每代自交以确认隐性抗性的渗入，且黄瓜白粉病失，本实验室成功开发了与白粉病抗性主效基因/的田间鉴定受环境因素及病原特性的影响较大，这QTL共分离的共显性InDel（insertion-deletion）标些都增加了黄瓜抗性育种的难度，使得常规抗病育记。此标记可以方便地应用于分子标记辅助育种，种效率低下。提高育种效率，加快黄瓜白粉病抗病育种进程。分子标记技术的问世，为标记辅助育种开辟1　材料与方法了一条新途径（张桂华等，2004；张海英等，2008）。利用与抗病基因紧密连锁的分子标记，开1.1　试验材料展分子标记辅助选择

5、，可实现对目标片段的跟踪，黄瓜白粉病抗病亲本S1003为华北类型，感病亲本S05为欧洲温室类型。根据之前对黄瓜白粉聂京涛，男，博士研究生，专业方向：作物遗传育种，E-mail：病抗性QTL的定位结果（Fukinoetal.，2013；Henjt12345@126.cometal.，2013；Nieetal.，2015），以S1003为受体亲*通讯作者（Correspondingauthor）：蔡润，男，教授，博士生导师，专本，S05为供体亲本，结合MAS通过多代回交后自业方向：植物分子遗传，E-mail：cairun@sjtu.edu.cn交，构建了主效QT

6、Lpm5.1的染色体片段代换系和收稿日期：2015-05-25；接受日期：2015-08-06基金项目：国家自然科学基金项目（31471892），上海市科委项目此主效QTL区域分离的回交群体BC3F1、BC2F2。（14391900600），上海市浦东新区科技发展基金项目（PKQ2012-N03）用于标记验证的24份有代表性的黄瓜材料为—26—《中国蔬菜》学术论文下载www.cnveg.org中国蔬菜CHINAVEGETABLES研究论文本实验室收集的来自世界各地不同抗性类型的材其孢子粉接种于黄瓜无菌试管苗上，置于光照培养料（表1）。箱培养。取单菌落进行单斑分离，经过

7、5次分离纯1.2　试验方法化后在感病材料上扩繁，用于黄瓜抗病性接种鉴定1.2.1　白粉病抗性的鉴定　从上海交通大学温室内（Nieetal.，2015）。采集黄瓜叶片上的白粉菌Podosphaeraxanthii，将2013年9月将亲本及其回交分离群体播种于表1InDel标记验证所用的黄瓜材料及其田间白粉病抗性编号材料名称类型抗性编号材料名称类型抗性编号材料名称类型抗性1S1001华北类型S9TrueLemon美洲类型S17119华南类型S2S52华南类型S10H34欧洲温室类型R1