条纹锯精子超微结构及其入卵过程的电镜观察

《条纹锯精子超微结构及其入卵过程的电镜观察》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第35卷第5期渔业科学进展Vol.35,No.52014年10月PROGRESSINFISHERYSCIENCESOct.,2014DOI:10.11758/yykxjz.20140514http://www.yykxjz.cn/*条纹锯精子超微结构及其入卵过程的电镜观察1①1,211,2143陈超贾瑞锦李炎璐吴雷明宋振鑫赵从明吴坚(1.农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛266071；2.上海海洋大学水产与生命学院上海201306；3.浙江海生源生物科技有限公司台州31

2、8000；4.天津立达海水资源开发有限公司天津300050)摘要采用扫描和透射电镜技术对自然成熟的条纹锯精子、卵子及精子入卵过程进行观察。观察结果显示，其精子由头部、中段和尾部三部分组成：头部主要由细胞核构成，无顶体结构；中段由线粒体、中心粒复合体(近端中心粒和基体)、袖套组成；尾部主要由轴丝组成，外部包裹质膜，轴丝为典型的“9+2”结构。卵子表面分布纵横交错的网纹，均匀分布着大小不一的微小孔，在卵壳的动物极精孔区的中央有一个受精孔。在授精后10s即可见到精子通过受精孔进入卵子，刺激卵子发生形态变化封闭受

3、精孔，阻止其他精子入卵，60s可见受精孔完全封闭。关键词条纹锯；精子；卵子；精子入卵；电镜中图分类号S962文献标识码A文章编号1000-7075(2014)05-0097-07条纹锯(Centropristisstriata)属于科(Serran-精、卵超微结构的研究中发现，不同鱼类的精、卵结idae)，石斑鱼亚科(Serraninae)，锯属(Centropristis)，构和形态具有差异，受精时间也各不相同。因此研究常用名美洲黑石斑鱼。属于广温、广盐性鱼类(雷霁各种类的受精生物学对判断精、卵质量以提

4、高受精率霖等,2007)，自2002年从美国引进鱼苗和受精卵进具有理论和实践意义。本文对条纹锯的精、卵及其行育苗和养殖试验至今(王波等,2003)，因其规模化精子入卵过程开展研究，旨在丰富石斑鱼受精生物学养殖已经在天津、山东、浙江、福建、广东等地兴起，内容，为提高其人工繁殖的受精率提供参考数据。取得了一定的经济效益，逐渐成为重要的人工养殖海1材料与方法水鱼种之一。国内外的研究主要集中在生态因子(Berlinskyetal,2004;Youngetal,2006;Ableetal,1.1试验材料1997)、

5、早期发育(贾瑞锦等,2012)等方面。鱼类的精、卵质量和其受精过程中的形态变化都条纹锯亲鱼于2012年10月11日取自浙江省是受精生物学的重要内容，也是鱼类人工繁育的基海生源生物科技有限公司，在繁殖季节选取健康2龄础。从细胞水平上看，受精过程包括卵子激活、精子亲鱼(雄鱼10尾、雌鱼5尾)用MS222进行麻醉，用入卵及其两性原核融合3个主要阶段。目前，在对鲑吸水纸擦干雌鱼生殖孔及其周围的水分，由腹部向生Oncorhynchusketa(Kobayashietal,1987)、七带石斑殖孔方向轻轻挤压鱼腹部将

6、卵挤出，观察流出的卵为鱼Epinephelusseptemfasciatus(廖光勇等,2011)、斜带明亮的成熟卵时，将卵盛放于干净的烧杯中备用。用石斑鱼Epinepheluscoioides(赵会宏等,2003)半滑舌同样的方法处理雄鱼：待挤出精液为纯净的乳白色鳎Cynoglossussemilaevis(穆淑梅等,2011)、褐牙鲆时，用干燥洁净的吸管吸取少量，镜检精子活力正常Paralichthysolivaceus(章龙珍等,2009)等硬骨鱼类的后，将精液倒入采集到的成熟卵的烧杯中，同时用干*

7、科技部国际合作项目(2012DFA30360)和天津市农委/三院三校项目(201004070)项目共同资助①通讯作者:陈超，研究员，E-mail:ysfrichenchao@126.com收稿日期:2013-07-06,收修改稿日期:2013-09-1198渔业科学进展第35卷净的砂滤海水激活精子，然后搅动、混合精卵使之受质膜包被，细胞核膜与质膜构成透明空腔的核周腔，精，同时记录时间，分别在激活后0、5、10、20、内部由基质填充。头部后部由线粒体、中心粒复合体30、45、60、90、120、150s时间

8、点取受精卵用2.5%构成，外部由袖套膜包被。细胞核正面观呈圆形，侧戊二醛固定，每次固定不少于30粒，4℃冰箱保存备面观呈半圆形，后端有一个较深的植入窝，植入窝从用。在未受精前取精、卵用同样的方法固定保存。细胞核后端向内凹陷。2.1.2中段包含有中心粒复合体，植入窝外部与1.2扫描电镜样品的制备轴丝相连接。细胞核后轴丝基部由4个线粒体及部分将采集固定的样品带回青岛，于2013年1月425囊泡环绕(图版Ⅰ-6)，外部由袖套膜包被