嗜热嗜酸菌_tab_的genedisc检测方法

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1、专题导航：果汁加工技术与质量管控饮料工业7月24～25日，由中国饮料工业协会主办的“2014中国果蔬汁产业峰会”在河南焦作成功召开。本刊整理了会议期间的重要技术报告，内容涵盖了果汁加工技术的研究进展、原料质量安全和最新检测技术等，旨在为读者提供果蔬汁行业的前沿技术资讯。嗜热嗜酸菌（TAB）的GeneDisc检测方法侯鹏高级销售经理颇尔过滤器（北京）有限公司分。第一部分是对几乎全部的耐热耐酸菌的检测，检测1脂环酸芽孢杆菌———简介结果不能判断检测出来的耐热耐酸菌是否对果汁造成最终的影响，它还需要对检测出来的微生物进行第二部分耐热嗜酸菌主要是脂环酸芽孢杆菌

2、在生长的过程当的界定，如果鉴定结果是阳性的话，这种果汁当中的耐中会产生芽孢，具有抗热耐酸的性能，可以在普通的巴热耐酸菌对果汁的储存肯定会造成一定的影响的。氏杀菌的条件下，完整的存活下去，对最终的产品产生存在问题：影响，但是这种微生物对人体是非致病性的。培养方法从样品处理到出结果需要5～10d；批次放在这一大类的脂环酸芽孢杆菌中有一小部分会对果行前等待时间长；劳动密集型（工作时间长）；高度依汁产生不良影响，可能产生一些不良的风味，造成果汁赖于芽孢的可培养性；依赖于使用的培养基类型：其中品质的劣变。目前这种微生物，在果汁、浓缩汁、糖有些仅被优化来用于培养特

3、定的菌株。浆、糖粉、茶、茶浓缩液当中都有发现，它主要生存在土壤中，跟土壤接触的原料会将其带入整个生产线中，3颇尔耐热嗜酸菌快速检测的方法生产线如果控制不到位，例如存在污染的水果、脏水道水、清洗和分拣不完全、蒸发器水使用不当、工场灭菌这种检测的基本原理，本身是一种实时的荧光PCR不充分、检验规划不充分、无效检测等，都有可能对产的方式，这种方式是颇尔同国际上非常知名的一家饮料品造成不良的后果。公司共同研制的，PCR是很多人比较熟悉的技术，目前应用是比较广泛的。颇尔的技术基础是找到了针对脂环酸芽孢杆菌一个共同的基因，只要在过程中检测到这个2014基因的存在，

4、就能够反向证明产品中有耐热耐酸菌。3.1耐热嗜酸菌快速检测方法的优点年大幅降低储存时间（从10d到2～3d）；通过简单方便、即时可用的方法能够减少检测成本；高特异性和高第17灵敏度，不会产生错误的结果。卷3.2颇尔耐热嗜酸菌快速检测实际检测的过程3.2.1富集流程第图1耐热嗜酸菌———可过滤样品：48h增菌时间8期将样品用水稀释10倍2传统培养方法热震用0.45μm膜过滤它是国际上通用的一种IFU12的方法，分为两个部在10mLYSG中45℃条件下富集过滤膜48h1饮料工业专题导航：果汁加工技术与质量管控———不可过滤样品：72h增菌时间将样品用YSG

5、稀释10倍热震在45℃条件下富集72h3.2.2微生物检测或定量第一步提取DNA（通用提取流程；从细胞释放DNA）3.3.1扇区：样品板共分6个扇区，每一个扇区检测一个产品，也就是说一块板同时检测六个样品，两个小时可以得出六个样品的最终结果。3.3.2微孔：每扇区由微通路与6个微孔链接；每个微孔包含特定PCR反应所需的所有必要试剂（引物和探针）。3.3.3条形码：产品可溯源；微孔板识别，及其后启动相应的检测程序、结果分析程序。3.4各个微孔的作用第二步向样品板加样（板内已预装了全部引物和第一个微孔是来判断样品中是否有PCR反应的抑探针；随取随用）制因子

6、，就是类似于空白样品的意义。第二个微孔检测所有的耐热耐酸菌的微生物。第三、四、五、六四个孔来作鉴定，鉴定出产品中是否含有造成果汁腐败的微生物。3.5检测方法特点3.5.1包容度：脂环酸芽孢杆菌方法涵盖超过200菌株。3.5.2排它性：检测显示无目的基因间交叉反应；检测显示无非脂环酸芽孢杆菌株交叉反应。4结论第三步运行实时荧光定量PCR（使用GeneDisc实时PCR仪进行检测）4.1缩短了得到结果的时间（缩短时间至48或72h）2014———加快了批次放行；4.2高灵敏度方法（增菌前浓度；减少了人工操作的误年差）———避免假阴性结果；第4.3高特异性方

7、法（超过200株脂环酸芽孢杆菌；可以17同步单独鉴定不同样品中最多的脂环酸芽孢杆菌）———卷降低了交叉污染的风险；第4.4食品安全检测：致病性大肠杆菌；沙门氏菌属；单8增李斯特菌及李斯特菌属；期4.5食品质量监控：啤酒腐败菌（厌氧菌）；嗜热嗜酸3.3样品板的介绍菌；环境监测（冷却塔及水道水监控、饮用及再生水、瓶装水质量监控）。2