毛细管色谱柱的进样方法

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1、ü毛细管色谱柱的进样方法在定量分析中的许多问题都与进样方式有关。对于各种各样的样品和各种规格的毛细管色谱柱，在气相色谱分析中可能接触到的进样方式不是简单唯一的。作为一个气相色谱分析者，可以通过对下述的阅读，对各种需要的进样方式进行概念性的了解。选择进样方式时必须遵守的原则：1、在样品进入色谱柱的过程中，必须保持其原有的组成，样品不能发生任何程度的降解或者致使分离效率下降的活化反应。2、在样品进入色谱柱的初始过程中，要能够使样品聚焦在尽可能窄的色谱带中，以获得尖锐的色谱峰。合理的进样方式，能够提高对样品的分析灵敏度和获得更好的样品分离度。常用的进样方式：A、气化分流进

2、样B、不分流进样C、冷柱头进样D、直接进样E、程序升温汽化进样A、气化分流进样气化分流进样在毛细管气相色谱中使最常见的进样方式。样品进入气化室瞬间气化，并完成与载气的混合；在气化室后的分流点，大部分的气体被分流放空，仅有极小部分的气体及样品进入色谱柱（被分流放空的气流与进入色谱柱的气流比称作‘分流比’。气化后的样品被高速四载气吹扫进色谱柱中，分离后得到了稳定尖锐的色谱峰。然后，样品中含有低挥发的组分时，组分还未完全气化就可能被分流出了系统，所以对于沸程宽的样品，这种快速进样进样口气化温度气化温度既要使样品中的所有组分快速完全气化，又不能是样品发生高温分解，这就需要在

3、实验中不断的总结经验。在不少的样品分析中，气化温度的定义还要考虑如何减少‘反闪’和低挥发组分的‘排异’和非线形流失。根据实验经验，气化温度的设定和调整可以从250℃开始排异进样后，样品中的低挥发的组分不能瞬间气化，在样品蒸气中，低沸点组分的浓度要高于在未气化前的原始样品的浓度。这种部分组分被浓缩的现象称做‘排异’（样品中高沸点的组分被从样品中剔除）。延长进样后样品的气化和时间可以明显的抑制‘排异’作用，但是谱图中的组分峰同步地被拉宽。反闪‘反闪’是指这样的现象；样品气化后体积迅速膨胀，当样品蒸气体积溢出衬管，与隔垫.进样口.载气进口等低温区接触，高沸点的组分在其上冷

4、凝。冷凝的组分会在下一次的进样中，与新的样品一起气化并被带入色谱柱中，在谱图中表现出鬼峰。溢出衬管的样品蒸气与系统中金属表面的‘催化中心’接触，活性组分被破坏。消除‘反闪’可以采用：吹扫进样口.降低进样体积.更换大体积衬管.优化进样气化温度等有效措施。吹扫向进样口中通入载气，吹扫隔垫上沉积的污染物，并且将污染物冲出清洗排口。过流速的吹扫气体同样会将部分低沸点组分的蒸气冲出系统。常用的吹扫气体流速是0.5-5ml/min.样品量和浓度气化分流进样方法非常使用于高浓度的样品分析，典型的样品浓度从0.1um/uL到10ug/uL进样体积可以达到5uL，正常使用的进样体积多

5、为1uL至2uL。B、不分流进样气化分流进样一般不适合痕量分析，所以提出了全部样品进入色谱柱的不分流进样方法。不分流技术是建立在“样品浓集（样品聚焦）”的基础上，进样时间长，从19－90秒钟不等。如果样品溶剂.进样口温度和初始柱温使用不当，发生样品弥散，就会拉宽组分峰，是灵敏度.分离度降低。样品浓集（溶剂效应.低温冷阱富集）为了避免长时间的进样过程对出峰峰宽的影响，希望样品在分离前被浓集在一条很窄的谱带中。色谱柱的初始温度比样品溶剂沸点低10℃或者更多时，样品蒸气在与“低温”的色谱柱头相遇时，其中的溶剂或低沸点组分首先沿气流方向在柱头形成临时液膜，迫使溶质或高沸点的

6、组分在这层液膜上移动，因为其在液膜后部的扩散速度快于在前部的扩散速度，所以高沸点的组分在液膜中被挤压成很窄的谱带。上述这个现象称做“溶剂效应”。选择低沸点的溶剂能够加强进样过程中的“溶剂效应”。但是选择的溶剂在进入色谱柱后，如果不能充分地润滑固定相（例如非极性色谱柱分析甲醇溶解的样品），就会在柱内形成几米长.厚度不均匀的溶剂区，样品因而不可能在进入色谱柱时形成很窄速谱带。表现出更宽的.扭曲的组分峰。这种情况下，应当在色谱柱前连接一段未涂覆固定液的去活毛细管。当样品组分的沸点高于150℃时，样品会自行在柱头浓焦成窄的谱带而不需要“溶剂效应”，这种现象称做“冷阱富集”。

7、进样量注射样品体积限制在2uL的范围内，以避免样品对衬管和色谱柱的过载。C、冷柱头进样冷柱头进样消除了宽沸点样品的失真和活性组分的吸附和分解，柱效和分离精度都很高。像不分流进样一样，如果样品溶剂不能充分润湿色谱柱的固定相，就需要在柱前连续一段未涂覆固定液的去活毛细管。样品被“冷”注射到色谱柱头（此事色谱柱的温度低于溶剂的沸点），溶剂充分润湿固定相，同时样品在色谱柱的柱头形成样品带，样品中的高沸点组分被分配到固定相中；在载气的作用下，溶剂挥发，样品带前端的低沸点组分也被浓集。很明显，样品中的各组分在样品中的浓度分布不再是平均的，谱图表现为谱峰加宽。但是在一般的应用