db22t 2218-2014 黄菠萝播种育苗技术规程

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1、ICS65.020B05备案号：44277-2015DB22吉林省地方标准DB22/T2218—2014黄瓜灰霉病诊断及防控技术规程Technicalrulesofdiagnosisandcontrolforgreymoldincucumber2014-12-11发布2014-12-30实施吉林省质量技术监督局发布DB22/T2218—2014前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由吉林省农业委员会提出并归口。本标准起草单位：吉林农业大学。本标准的主要起草人：王晓梅、白庆荣、崔喜艳、张浩、韩玉珠、王薇、赵欣欣、王雪。IDB22/T2218—2014黄瓜灰霉病诊断及防

2、控技术规程1范围本标准规定了黄瓜灰霉病诊断方法、病原检测技术及防控技术。本标准适用于黄瓜灰霉病病害诊断、检测和综合防治。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1PDApotatodextroseagar用于分离真菌的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。2.2PCRpolymerasechainreaction聚合酶链式反应，是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法。2.3交替用药alternativeapplication轮换使用无交互抗性的两种以上药剂的使用方式。2.4混合用药mixedapplication选择两种或两种以上作用方式和机制不同、无交互抗性的药剂混合使用。3黄瓜灰霉病病害诊断与

3、检测技术3.1病症诊断3.1.1叶、茎叶片染病，病斑初为水渍状，后变为不规则形的淡褐色病斑，边缘明显，有时病斑长出少量灰褐色霉层。高湿条件下，病斑迅速扩展，形成直径15mm～20mm的大型病斑。茎蔓染病后，茎部腐烂，瓜蔓折断，引起烂秧。3.1.2花、果1DB22/T2218—2014一般从开败的雌花开始侵入，在花蒂产生水渍状病斑，逐渐长出灰褐色霉层，引起花器变软、萎缩和腐烂，并逐步向幼瓜扩展；瓜条染病，病部先发黄，后期产生白霉并逐渐变为淡灰色，导致病瓜生长停止，变软、腐烂和萎缩，最后腐烂脱落。3.2病原形态学诊断3.2.1病原菌种类确定黄瓜灰霉病病原菌为：灰葡萄孢Botrytiscine

4、reaPers.exFr.，半知菌类真菌（病原图见附录A）。3.2.2显微镜检查3.2.2.1徒手制片a)取洁净的载玻片，在载玻片中间滴一滴清水；b)用尖细的解剖针等直接挑取病部或培养基上的霉状物，置清水中；c)尽量使病原物分散；d)加盖盖玻片，在加盖盖玻片时，要使盖玻片的一侧边缘与水滴边缘接触，然后慢慢向下放盖玻片，若盖玻片下有气泡应重新放置盖玻片，待显微观察。3.2.2.2镜检在普通光学显微镜10×10倍下进行形态观察，病菌的孢子梗数根丛生，褐色，顶端具1次～2次分枝，分枝顶端密生小柄，其上生大量分生孢子。分生孢子圆形至椭圆形，单细胞，近无色，大小(5.5μm～16μm)×(5.0μ

5、m～9.25μm)(平均11.5μm×7.69μm)，孢子梗(811.8μm～1772.1μm)×(11.8μm～19.8μm)。3.3病原菌的分子检测3.3.1病原菌的单孢分离采集具有典型灰霉病病斑的黄瓜病叶，用毛刷刷取叶片上的孢子于盛有无菌水的烧杯中，采用稀释平板法，挑取单个孢子，至PDA培养基上培养，待产孢后镜检，确定为葡萄孢后进行扩繁培养。3.3.2病菌基因组DNA提取及体外扩增3.3.2.1基因组提取采用CTAB法，提取病菌基因组DNA（具体方法见附录B.1）。3.3.2.2PCR扩增以基因组DNA为模板，对病原物进行分子鉴定对菌株进行ITS区域扩增，采用通用引物ITS4/IT

6、S5（ITS4：5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’/ITS5：5’-GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3’）。PCR产物送交生物技术公司进行测序，测序结果在GenBank中进行Blast比对分析(PCR反应参数见附录B.2)。4发生规律2DB22/T2218—2014以菌核在土壤中或以菌丝及分生孢子在病残体上越冬或越夏。翌春条件适宜，菌核萌发，产生菌丝体、孢子梗、分生孢子，分生孢子成熟后随气流、雨水、露水等传播。光照不足、低温（18℃～23℃）和高湿（相对湿度94％以上）条件下易流行。该病害在吉林省多在冬春季节低温寡照的温室内发生。5黄瓜灰霉病防控技术5.1

7、防治原则病害防治应采取“预防为主，综合防治”的总原则，加强栽培管理，结合施用化学药剂进行病害综合治理。5.2防治方法5.2.1农业防治5.2.1.1清洁田园与土壤消毒定植前彻底清理前茬作物的残株烂叶以及杂草等；设施生产中，高温闷棚，对土壤高温消毒3d以上，之后充分通风。5.2.1.2轮作与非寄主作物轮作。5.2.1.3膜下灌溉采用膜下滴灌或开沟灌溉。5.2.1.4监测病情开花期和果实膨大期及时查看病害发生情况。在苗期、瓜膨大前摘除幼