DB15∕T 2542—2022 鸡腿菇菌种制作技术规程(内蒙古自治区)

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ICS65.020.01CCSB05□B15内蒙古自治区地方标准DB15/T2542—2022鸡腿菇菌种制作技术规程Regulationofstrainmanufactureforcoprinuscomatus

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2DB15/T2542—2022前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古自治区果蔬标准化技术委员会（SAM/TC25）归口。本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院。本文件主要起草人：李亚娇、孙国琴、王海燕、庞杰、慕宗杰、王永、薛国萍、康立茹、于传宗、付崇毅、田文龙、郭志英。I

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4DB15/T2542—2022鸡腿菇菌种制作技术规程1范围本文件规定了鸡腿菇各级菌种生产技术要求。本文件适用于鸡腿菇母种、原种和栽培种菌种生产技术。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4806.7食品安全国家标准食品接触用塑料材料及制品NY/T528食用菌菌种生产技术规程3术语和定义3.13.23.33.4

5DB15/T2542—20223.5栽培种spawn由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。栽培种只能用于扩大到栽培出菇袋或直接出菇，不可以再次扩大繁殖菌种，也称为三级种。3.6固体菌种solidspawn以富含木质素、纤维素和半纤维的谷物籽粒等天然有机物为主要原料，添加适量的有机氮源和无机盐类，具一定水分含量的培养基培养的纯菌丝体。3.7液体菌种liquidspawn在液体培养基中，通过摇瓶震荡培养或深层发酵技术快速获得的大量的纯双核菌丝体。4菌种生产要求4.1人员生产所需要的技术人员和检验人员经过专业培训、掌握基础知识及菌种生产技术规程要求的相应4.24.34.44.5

6DB15/T2542—2022×（22～28）cm的聚丙烯塑料袋。聚丙烯塑料袋符合GB4806.7要求。栽培袋采用（17～22）cm×（35～55）cm的聚乙烯塑料袋。5母种生产5.1培养基新鲜无病去皮切片马铃薯200g，加水1200ml煮沸20min，滤液定容至1000ml，加硫酸镁0.5g、磷酸氢二钾1g、蛋白胨1g、酵母粉1g、蔗糖10g、葡萄糖10g、琼脂粉8g～10g，pH自然；新鲜无病去皮切片马铃薯200g，加水1200ml煮沸20min，滤液定容至1000ml，加入蔗糖20g、琼脂粉8g～10g，pH自然。5.2分装和灭菌5.2.1斜面培平板培养基分装和灭菌分装培养基至试管1/4处，用棉塞或硅胶塞封闭试管口，每5支试管为1把，牛皮纸包棉塞，橡皮筋扎紧，棉塞向上放置。棉塞应采用梳棉，不能使用脱脂棉。121℃～122℃（0.11MPa～0.12MPa）恒温灭菌25min。降温至（65±5）℃时取出试管，在空气清洁的室内摆斜面，斜面长度不超过试管长度的2/3，自然降温凝固后成斜面。5.2.2平板培养基分装和灭菌5.35.45.55.6

7DB15/T2542—2022表1鸡腿菇母种感官要求项目要求容器完整、无损、洁净棉塞或无棉盖体干燥、整洁、松紧适度、能满足透气和过滤要求培养基灌入量为试管总容积的1/4，培养皿高度的1/3～1/2菌丝生长量长满斜面或平板菌菌丝体特征乌白、浓密、旺健种菌丝体表面均匀、舒展、平整外菌丝体分泌物无观菌落边缘整齐杂菌菌落无斜面背面外观培养基不干缩，颜色均匀，无暗斑、无色素6原种、栽培种生产6.1固体菌种6.1.1培养基粮食培养基：谷粒或麦粒或玉米粒90%、柠条粉或棉籽壳或木屑或玉米芯粉或豆秸粉9%，石膏

8DB15/T2542—2022原种、栽培种在超净工作台或接种箱内接种，接种前打开紫外灯照射30min后吹风，接种时用75%酒精对超净工作台或接种箱进行表面擦拭消毒。每个原种接入2cm～3cm大小母种1～2块；每个栽培种接入原种量不少于15g。菌种都应从容器口处接种，不应打孔多点接种。每批接种应为单一品种，如中途换品种时采用75%酒精对超净工作台或接种箱及工具进行表面擦拭消毒。6.1.5培养通风避光、22℃～26℃下培养。6.1.6检验接种后每隔2d～3d检验一次，挑出菌种未活、污染和生长不良的不合格培培养物。原种感官要求见表2，栽培种感官要求见表3。表2鸡腿菇原种感官要求项目要求容器完整、无破损、洁净棉塞或无棉盖体干燥、整洁、松紧适度、能满足透气和滤菌要求培养基上表面距瓶（袋）（50±5）mm口的距离菌丝生长量长满容器菌丝体特征洁白浓密，生长旺健菌培养物表面菌丝体生长均匀、无高温抑制线种培养基及菌丝体紧贴瓶壁、无干缩外菌丝分泌物无、允许少量无色至棕黄色水珠观杂菌菌落无子实体原基无表3鸡腿栽培种感官要求项目要求容器完整、无破损棉塞或无棉盖体干燥、整洁、松紧适度、能满足透气和滤菌要求培养基上表面距瓶（袋）（50±5）mm口的距离菌丝生长量长满容器菌菌丝体特征生长均匀、色泽一致、无角变、无高温抑制线种培养基及菌丝体紧贴瓶壁、无干缩外菌丝分泌物无观杂菌菌落无子实体原基允许少量、出现原基种类小于等于5%6.1.7贮存5

9DB15/T2542—2022原种和栽培种在0℃～4℃下贮存，贮存期不超过50d。6.2液体菌种6.2.1培养基新鲜无病去皮切片马铃薯200g，加水1200ml煮沸20min，滤液定容至1000ml，加硫酸镁0.5g、磷酸氢二钾1g、蛋白胨1g、酵母粉1g、蔗糖10g、葡萄糖10g，pH值自然；新鲜无病去皮切片马铃薯200g，加水1200ml煮沸20min，滤液定容至1000ml，加入蔗糖20g，pH值自然。6.2.2瓶装液体菌种生产6.2.2.1装瓶采用150ml～500ml三角瓶，培养基添加至刻度的2/3处，用带滤膜的封口膜封口后灭菌。6.2.2.2灭菌121℃～122℃（0.11MPa～0.12MPa）湿热保持25min。6.2.2.3接种和培养取3mm～5mm大小母种10～15块接入30℃以下的液体培养基中，培养温度在22℃～26℃，140r/min～160r/min下振荡培养6d～10d。

10DB15/T2542—2022表4鸡腿菇液体菌种种感官要求项目要求容器完整、无破损、无裂纹菌丝生长量培养基1/2～1/3菌丝体特征白色至透明块状、生长旺健培养基清澈、无杂色杂菌无7入库检验完成后及时入菌种库，详细记录各生产环节，菌种库温度0℃～4℃，避光，适当通风，定期对空间进行杀菌处理。7