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时间:2018-03-17
《大班科学神奇的叶绿素教案》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、精品文档大班科学神奇的叶绿素教案I叶绿体色素的提取与分离一、实验原理叶绿体中含有绿色素和黄色素两大类。它们与类囊体膜相结合成为色素蛋白复合体。这两类色素都不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇、丙酮等有机溶剂提取。提取液可用色谱分析的原理加以分离。因吸附剂对不同物质的吸附力不同,当用适当的溶剂推动时,混合物中各种成分在两相间具有不同的分配系数,所以移动速度不同,经过一定时间层析后,可将各种色素分开。二、材料、仪器设备及试剂材料:菠菜叶片仪器设备:研钵、漏斗、100ml三角瓶、剪刀、滴管、培养皿、康维皿或平底短玻管
2、、圆形滤纸、滤纸条。试剂:5%乙醇、石英砂、碳酸钙粉、推动剂:按石油醚:丙酮:苯比例配制。三、实验步骤1、叶绿体色素的提取取新鲜菠菜叶片4-5片,洗净,擦干,去掉中脉剪碎,放入研钵中。2016全新精品资料-全新公文范文-全程指导写作–独家原创19/19精品文档研钵中加2-3ml5%乙醇,加入少许石英砂、碳酸钙粉末,研磨至糊状,再加10-15ml5%乙醇,提取35min,上清液过滤于三角瓶中,残渣用10ml5%乙醇冲洗,一同滤于三角瓶中。如无新鲜叶片,也可用事先制好的叶干粉提取。取新鲜叶片,先用105℃杀青,再在
3、80℃下烘干,研成粉末,密闭贮存。用时称叶粉2g放入小烧杯中,加95%乙醇20-30ml浸提,并随时搅动。待乙醇呈深绿色时,滤出浸提液备用。2、叶绿体色素的分离取圆形定性滤纸一张,在其中心戳一圆形小孔另取一张滤纸条,用滴管吸取乙醇叶绿体色素提取液沿纸条的长度方向涂在纸条的一边,使色素扩散的宽度限制在0.5cm以内,风干后,再重复操作数次,然后沿长度方向卷成纸捻,使浸过叶绿体色素溶液的一侧恰在纸捻的一端。将纸捻带有色素的一端插入圆形滤纸的小孔中,使与滤纸刚刚平齐。2016全新精品资料-全新公文范文-全程指导写作–
4、独家原创19/19精品文档在培养皿内放一康维皿,在康维皿中央小室中加入适量的推动剂,把带有纸捻的圆形滤纸平放在康维皿上,使纸捻下端浸入推动剂中。迅速盖好培养皿。此时,推动剂借助毛细管引力顺纸捻扩散至圆形滤纸上,并把叶绿体色素向四周推动,不久即可看到各种色素的同心圆环。如无康维皿,也可在培养皿中放入一平底短玻管或塑料药瓶盖,以盛装推动剂。所用培养皿底、盖直径应相同,且应略小于滤纸直径,以便将滤纸架在培养皿边缘上。当推动剂前沿接近滤纸边缘时,取出滤纸,风干,即可看到分离的各种色素:叶绿素a为蓝绿色,叶绿素b为黄绿色
5、,叶黄素为鲜黄色,胡萝卜素为橙黄色。用铅笔标出各种色素的位置和名称。II叶绿体色素的理化性质一、实验原理叶绿素是一种二羧酸—叶绿酸与甲醇和叶绿醇形成的复杂酯,故可与碱起皂化反应而生成醇和叶绿酸的盐,产生的盐能溶于水中,可用此法将叶绿素与类胡萝卜素分开;叶绿素与类胡萝卜素都具有光学活性,表现出一定的吸收光谱,可用分光镜检查或用分光光度计精确测定;叶绿素吸收光量子而转变成激发态,激发态的叶绿素分子很不稳定,当它变回到基态时可发射出红光量子,因而产生荧光。叶绿素的化学性质很不稳定,容易受强光的破坏,特别是当叶绿素与蛋
6、白质分离以后,破坏更快,而类胡萝卜素则较稳定。叶绿素中的镁可以被H所取代而成褐色的去镁叶绿素,后者遇铜则成为绿色的铜代叶绿素,铜代叶绿素很稳定,在光下不易破坏,故常用此法制作绿色多汁植物的浸渍标本。+2016全新精品资料-全新公文范文-全程指导写作–独家原创19/19精品文档二、仪器与用具20ml刻度试管、10ml小试管、试管架、分光镜、石棉网、药匙、烧杯、酒精灯、玻棒、铁三角架、刻度吸量管2ml、5ml各1支、火柴。三、试剂95%乙醇;苯;醋酸铜粉末;5%的稀盐酸;醋酸-醋酸铜溶液:6g醋酸酮溶于100ml0
7、%的醋酸中,再加蒸馏水4倍稀释而成;KOH-甲醇溶液:20gKOH溶于100ml甲醇中,过滤后盛于塞有橡皮塞的试剂瓶中。四、实验步骤用本实验第一项中提取的叶绿体色素乙醇溶液和水研磨匀浆,进行以下实验。1、光对叶绿素的破坏作用取4支小试管,其中两支各加入5ml用水研磨的叶片匀浆。另外两支各加入2.5ml叶绿体色素乙醇提取液,并用95%乙醇稀释1倍。取1支装有叶绿素乙醇提取液的试管和1支装有水研磨叶片均浆的试管,放在直射光下,另外两支放到暗处,40min后对比观察颜色有何变化,解释其原因。2、荧光现象的观察取1支2
8、0ml刻度试管加入5ml浓的叶绿体色素乙醇提取液,在直射光下观察溶液的透射光与反射光颜色有何不同?解释原因。2016全新精品资料-全新公文范文-全程指导写作–独家原创19/19精品文档3、皂化作用在做过荧光现象观察的叶绿体色素乙醇提取液试管中加入1.5ml0%KOH-甲醇溶液,充分摇匀。片刻后,加入5ml苯,摇匀,再沿试管壁慢慢加入1-1.5ml蒸馏水,轻轻混匀,于试管架上静置分层。若
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