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《枯草芽孢杆菌工程菌产耐酸性高温 发酵条件的优化》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、第27卷第6期天津科技大学学报Vol.27No.62012年12月JournalofTianjinUniversityofScience&TechnologyDec.2012枯草芽孢杆菌工程菌产耐酸性高温α-淀粉酶发酵条件的优化胡博，刘逸寒，徐艳静，薄嘉鑫，路福平(工业发酵微生物教育部重点实验室；天津科技大学生物工程学院，天津300457)摘要：利用基因工程手段获得的产耐酸性高温α-淀粉酶基因枯草芽孢杆菌工程菌株pWB-amyd/WB600，通过单因素筛选及正交实验进行发酵培养基优化，得到的最佳配方为(g/L)：玉米粉20，蛋白胨30，CaCl20.5，Na2
2、HPO48．同时对实验室摇瓶条件下液体发酵的主要影响因素初始pH、接种量、装液量、转速、温度等进行探讨，确定了最佳培养条件：37,℃、pH6.5、200,r/min摇床培养36,h，接种量为2%，装液量为30,mL/250,mL．在此优化条件下，耐酸性高温α-淀粉酶活力达到3,980,U/mL，是未优化条件下的2.1倍．关键词：枯草芽孢杆菌工程菌；耐酸性高温α-淀粉酶；培养基优化；正交实验；发酵条件优化中图分类号：Q814.4文献标志码：A文章编号：1672-6510(2012)06-0001-06OptimizationofFermentationCondi
3、tionsforAcid-resistantandHeat-stableα-AmylaseProductionwithEngineeredStrainBacillussubtilisHUBo，LIUYihan，XUYanjing，BOJiaxin，LUFuping(KeyLaboratoryofIndustrialFermentationMicrobiology，MinistryofEducation，CollegeofBiotechnology，TianjinUniversityofScience&Technology，Tianjin300457，China
4、)Abstract：SinglefactorexperimentsandorthogonalexperimentswereadoptedtooptimizetheliquidfermentationmediumandconditionsoftheengineeredstrainBacillussubtilispWB-amyd/WB600，whichexpressesacid-resistantandheat-stableα-amylase.Theresultsindicatedthattheconstituentsofthemedium，thefillingv
5、olumeofshakingflask，therotationspeedandthetemperaturewerethemajorfactorsthataffectedtheyieldofα-amylase.Thecompositionofthebestmediumwas20,g/Lmaizena，30,g/Lpeptone，0.5,g/LCaCl2，and8,g/LNa2HPO4.Theoptimalfermentationconditionswerethecombina-tionof37,℃temperature，6.5initialpH，shakinga
6、t200,r/minfor36,h，2%ofinoculumvolumeand30,mL/250,mLmediumvolume.Theenzymeactivityofα-amylaseis3980,U/mLintheoptimizedconditions，whichis2.1,timesoftheenzymeac-tivitylevelinunoptimizedconditions.Keywords：engineeredstrainBacillussubtilis；acid-resistantandheat-stableα-amylase；mediumopti
7、mization；orthogonalexperiment；fermentationconditionsoptimizationα-淀粉酶作为淀粉酶的一种，是目前最重要、最前，国内外市场中常用的耐高温α–淀粉酶的最适pH[4]古老、应用范围最广的工业酶制剂之一，其中耐高温范围为6～7，在酸性条件下酶活明显降低，甚至失α-淀粉酶凭借其热稳定上的优势已经占据了很大的去活性，已经不能满足酸性条件下淀粉原料深加工工[1]市场．耐高温α-淀粉酶目前被广泛地应用于味精、艺的要求，因此对耐酸性α-淀粉酶的需求日益上[2-3]啤酒、有机酸、酒精等食品发酵以及淀粉工业．目升．近
8、几年来国内开展了大量的针对产耐酸性α-
