化学发光免疫检测技术在临床检验中的应用ppt课件

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1、内容提要免疫检测技术概述化学发光免疫诊断技术简述化学发光诊断技术在临床中的应用第一部分免疫检测技术概述定义免疫学检测主要是利用抗原和抗体的特异性反应进行检测的一种手段。它可以利用同位素（荧光素）酶、化学发光物质等对检测信号进行放大和显示。夹心法竞争法间接法免疫检测常用方法放射免疫诊断技术（RIA）酶联免疫诊断技术（ELISA）化学发光免疫诊断技术（CLIA）20世纪60年代70年代80年代90年代2000年2020年时间临床免疫诊断技术的发展基本历经了以下三个阶段：化学发光（CLIA）酶免（EIA）放免（RIA）灵敏度（M/L）10-17-10-1910-1510

2、-15-10-16标记物酶蛋白或发光物质酶蛋白放射性元素灵敏度高低高线性范围宽窄宽放射污染无无有试剂稳定性12个月6-12个月1-3个月操作易易繁琐1.兴起于20世纪80年代，现已被临床普遍使用，成为临床免疫诊断的支柱方法；2.产品处于成熟期。1.导入于20世纪90年代，现较大医院开展个别项目；2.产品处于导入期或成长期。化学发光1.兴起于20世纪70年代，现仍在临床应用；2.产品处于衰退期。1.兴起于20世纪80年代，现普遍使用，为我国临床免疫诊断的基本方法；2.产品处于成熟期。酶联免疫1.兴起于20世纪60年代，现已基本退出临床应用；2.产品生命周期已终结；3

3、.厂商试剂和仪器共同开发。1.兴起于20世纪70年代，现仍普遍使用于县级以上医院；2.产品处于衰退期；3.厂商试剂与仪器共同开发。放射免疫欧美中国免疫诊断现状当前进展国际：国际上排名前六位的诊断巨头企业均投入了大量的资金和人力进行化学发光技术的研发和产业化国内：只有一两家科研机构及企业在进行相关问题的比较深入研究，但发展较快中国免疫诊断现状中国临床免疫定量诊断现状亟待改善化学发光免疫诊断技术已成为免疫定量诊断的主流昂贵的成本价格严重阻碍化学发光免疫诊断技术造福中国人民临床呼唤符合国情的解决方案中国即将迎来免疫定量诊断技术普及的新高潮第二部分化学发光免疫检测技术化学

4、发光技术概述化学发光免疫分析技术，是将化学发光体系与免疫反应相结合，用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。其特点在于灵敏度高、测定范围宽、快速、简便，并且在测试中不使用有害的试剂，无污染。类型化学发光免疫分析化学发光酶免疫分析电化学发光分析时间分辨免疫荧光分析四种检测方法比较技术类型标记、反应体系主要优点主要不足化学发光吖啶酯过氧化氢灵敏度较高试剂成本高，发光时间短，测量方式复杂（积分法），需原位进样（InSituInjector）仪器成本及维护费用较高化学发光酶免疫分析辣根酶鲁米诺碱性磷酸酶AMPPD测量方式简单、成本较低、灵敏度较高不同次试验中，曲

5、线有漂移时间分辨荧光铕（Eu）、镝（Dy）、钐（Sm）、铽（Tb）等络合物脉冲光源激发灵敏度较高、试剂较稳定试剂成本较高测量方式复杂（脉冲激发、流动池）仪器成本及维护费用高环境及样品中同类元素可导致本底干扰电化学发光钌（Ru）的络合物灵敏度较高、试剂较稳定化学发光酶免疫分析用参与某一发光反应的酶来标记抗原或抗体，免疫反应后，加入发光试剂，测定发光体系的发光强度来确定抗原或抗体的含量。两大体系辣根过氧化物酶（HRP）体系碱性磷酸酶(AP)体系碱磷酶发光信号示意图TimeSignal辣根酶发光信号示意图两大体系的比较碱磷酶体系：水解反应，起光较慢，发光强度较

6、弱，灵敏度较高。辣根酶体系：氧化还原反应，起光较快，发光强度较大。第三部分化学发光诊断技术在临床中的应用化学发光在临床检测中的主要应用肿瘤标志物检测甲状腺功能检测生殖内分泌激素系列糖尿病检测传染病检测系列肝纤维化系列一、肿瘤标志物的检测1、肿瘤标志物（tumormarker，TM）是指由肿瘤组织产生的存在于肿瘤组织本身，或分泌至血液或其他体液，或是因肿瘤组织刺激，由宿主细胞产生的反映肿瘤的存在和生长，含量明显高于正常参考值的一类物质。通过对这类物质的分析，能帮助人们从正常组织中区别肿瘤或测定肿瘤细胞核、细胞质以及对细胞膜上的特性进行分析，以此作为辨认肿瘤细胞的标

7、志。2、肿瘤标志物的分类（1）、肿瘤胚胎性抗原标志物该类蛋白质即前文所提到的因返祖现象的出现，而产生的肿瘤标志物。虽然该类标志物与肿瘤组织不一定具有特定的相关性，但与肿瘤的发生存在着内在的联系。例：甲胎蛋白（alpha-fetoprotein,AFP）癌胚抗原（carcinoembryonicantigen,CEA）（2）、糖类抗原标志物该类物质是肿瘤细胞表面的抗原物质，或肿瘤细胞所分泌的物质。这类标志物的出现为临床肿瘤的诊断带来方便，但其命名无规律可言。有些是肿瘤细胞株编号，有些是抗体物质的编号。该类标志物又可分为两类①糖类高分子粘蛋白抗原例：癌抗原CA125癌

8、抗原CA1