微生物处理机油污染废水研究

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1、微生物处理机油污染废水研究　　　　近年来，国内外对石油及兵产品的微生物降解研究常见报道，却鲜见机油废水微生物降解方面的研究。本试验目的是通过常规微生物驯化方法，以市售机油为唯一碳源，从油污土壤中分离筛选出机油高效降解菌株，并对其生长条件及降解特性进行研究，以期进一步应用于含油污水的治理。1材料与方法1．1土壤样品　　某石油库贮油罐附近的石油污染土壤，取样3份，按含油量由多至少编为1＃，2＃，3＃。1．2培养基　　本试验选取两种无机基础培养基，（用蒸馏水配制并高压蒸气灭菌），编号分别为1＃，2＃，组成如下：

2、　　1＃基础培养基：p（KH2PO4）＝0.5g／L，ρ（K2HPO4）＝0.5g／L，P（MgSO4·7H2O）=0.2g／L，ρ（NaCl）=0.2g／L，p（CaCl2）＝0.1g／L，ρ（NH4NO3）＝1.0g／L，MnSO4痕量，FeCl3痕量。　　2＃基础培养基：p（NaNO3）=2.0g／L，ρ（KH2O4）＝0．2g／L，ρ（MgSO4.7H2O）＝0.2g／L，ρ（酵母浸膏）＝1.0g／L．　　含油培养基是向上述无机基础培养基中加入适量机油。固体培养基中加入质量分数为0．2％的琼脂。1

3、．3优势菌筛分试验1．3．1选择富集培养　　称取土样各10g，加入到500mL1＃含油培养基（含机油4mL）中，调pH值7.0，通气恒温30℃培养48h后，分别移取上述培养液5mL于45mL1＃，2＃含油培养基（含机油2mL）中，恒温30℃振荡培养。1.3.2平板分离　　制作1＃，2＃固体含油培养基平板苦干，用接种环蘸取振荡培养较好的菌液在相应平板划线，恒温30℃培养48h后平板划线分离，重复数次。选择生长状况良好的菌株进行平板扩大培养。1．4生长条件正交试验　　在保证供氧和氮、磷营养前提下，选择温度。油

4、的质量浓度（以mg／L计）和pH值作为本次实验的三个因素进行三水平实验，方案见表1、表2。将平板培养48h的菌体刮下，5000r／min离心5min，分离得到湿菌体。向方案中每个样品加入0.5g湿菌体，培养60h后测定样品中油的质量浓度。表1 ZL1菌株正交试验方案及试验结果分组号因素测定结果ρ（油）/（mg.L-1)降解测量ρ（油）/（mg.L-1)温度/ρ（油）/（mg.L-1)pH值1254245.01922322256807.04162643258249.06301944304247.022020

5、45306809.05071736308245.06541707354249.02971278356805.05691119358247.075569K1690563513　　K2547548537　　K3307433494　　K1230188171　　K2182183179　　K3102144165　　R1284414　　表2 ZL2菌株正交试验方案及试验结果分组号因素测定结果ρ（油）/（mg.L-1)降解测量ρ（油）/（mg.L-1)温度/ρ（油）/（mg.L-1)pH值1253684.0692992

6、255746.02673073257678.04792884303686.03543145305748.02962786307674.04623057353688.01422268355744.03422329357676.0548219K1824769766　　K2897817840　　K3677812792　　K1275256255　　K2299272280　　K3226271264　　R731625　　1.5降解能力试验　　配制机油质量浓度为270mg／L的含油培养基1L，投入小型间歇反应器中，加入

7、离心分离得到的湿菌体5g，通气恒温30℃培养，间隔12h取样测定其含油量。1．6测试方法　　用紫外介光光度法测定。2结果分析2．1优势菌筛分试验　　富集培养过程中，1＃土样的培养液出现的泡沫较多，乳化现象明显，菌液也较为粘稠，分离出较多的菌株，说明土壤中的石油烃能刺激石油降解菌的生长。经过选择富集培养、平板分离出4株以机油为唯一碳源的菌株，编号为ZL1，ZL2，ZL3，ZL4，性状见表3。进一步培养后筛选出降解性能较好的ZL1（1＃培养基）和ZL2（2＃培养基）进行正交试验和连续培养试验。表3 4株机油降

8、解菌形态特征形态特征ZL1ZL2ZL3ZL4菌落颜色粉红淡黄淡黄粉红菌落形态不透明，微隆起，全缘，半透明，圆形半透明，圆形，隆起，不透明，米粒状突起，　光滑，有光泽光滑，较干燥光滑，有光泽较湿润菌体形态短杆球形杆状丝状菌体大小/μm（0.3-0.8)×(0.6-1.0）Φ0.3（0.5-0.8)×(1.3-5.0)0.2×(6-60)革兰氏染色GGGG初步鉴定黄杆菌属微球菌属假单胞菌属酵母菌属2．2生长条件正交试验　　ZL1，