DB43T 985-2015 辣椒花药培养技术规程

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1、ICS65.020.20B05DB43湖南省地方标准DB43/T985—2015辣椒花药培养技术规程Technicalrulesofanthercultureforpepper2015-01-23发布2015-03-23实施湖南省质量技术监督局发布DB43/T985—2015目次前言……………………………………………………………………………………………………Ⅱ1范围……………………………………………………………………………………………………12规范性引用文件………………………………………………………………………………………13术语与定义

2、……………………………………………………………………………………13.1花药培养…………………………………………………………………………………………13.2单核靠边期………………………………………………………………………………………13.3胚状体……………………………………………………………………………………………13.4单倍体……………………………………………………………………………………………14试剂……………………………………………………………………………………………………15仪器和设备…………………………………………………………

3、………………………………26培养基配制与灭菌……………………………………………………………………………………27炼苗基质配制与灭菌…………………………………………………………………………………28花药培养技术流程……………………………………………………………………………………28.1花蕾采集…………………………………………………………………………………………28.2花蕾处理…………………………………………………………………………………………28.3花蕾消毒………………………………………………………………………………………38.4花药接种

4、…………………………………………………………………………………………38.5花药培养………………………………………………………………………………………38.6胚状体分化成苗……………………………………………………………………………38.7组培苗炼苗与移栽……………………………………………………………………………38.8组培苗倍性鉴定……………………………………………………………………………3附录A（规范性附录）辣椒花药培养档案记载表…………………………………………………4IDB43/T985—2015前言本标准按照GB/T1.1—200

5、9给出的规则起草。本标准的某些内容可能涉及专利，本标准的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由湖南省蔬菜研究所提出。本标准由湖南省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：湖南省蔬菜研究所。本标准主要起草人：杨博智、周书栋、王利群、欧立军、邹学校、戴雄泽、马艳青、李雪峰、张竹青、陈文超，梁成亮。IIDB43/T985—2015辣椒花药培养技术规程1范围本标准规定了辣椒花药培养技术流程。本标准适用于辣椒花药培养。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用

6、文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682-2008中国国家实验室分析用超纯水标准3术语与定义下列术语与定义适用于本标准。3.1花药培养指采用植物组织培养技术，把发育到一定阶段的花药，通过无菌操作技术接种在人工培养基上，以改变花药内花粉粒的发育程序诱导其分化，并连续进行有丝分裂形成细胞团，进而形成一团无分化的薄壁组织----愈伤组织，或分化成胚状体，形成完整的植株的一种培养方式。3.2单核靠边期指四分体的胼胝质壁完全溶解后，中央大液泡开始形成，将细胞核从中心挤压到靠近细胞壁时所处的时期，此时花蕾形态特征为花瓣微露

7、出花萼或与花萼齐平。3.3胚状体指辣椒花粉粒（小孢子）经过雄核发育成为多细胞花粉后，细胞数目进一步增加，花粉外壁膨大，冲破花粉壁，形成的多细胞团。胚状体按生长阶段分为原胚、心形胚、鱼雷形胚和成熟胚。3.4单倍体体细胞中含有本物种配子的染色体数目的个体。4试剂4.1超纯水应符合GB/T6682中规定的三级超纯水。4.2试剂1DB43/T985—2015消毒试剂：酒精、次氯酸钠；无机试剂：硝酸铵、硝酸钾、氯化钙、七水硫酸镁、磷酸二氢钾、碘化钾、硼酸、四水硫酸锰、七水硫酸锌、三氧化钼、钼酸钠、硫酸铜、氯化钴、硫酸亚铁、EDTA二钠盐；有机试剂

8、：肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、甘氨酸、叶酸、生物素、核糖核酸酵母、谷氨酰胺、丝氨酸、脯氨酸；生长调节剂：a-萘乙酸、激动素；其它试剂：硝酸银、秋水仙碱、琼脂粉、活性炭和蔗糖。所有试剂等级均为分析纯。