原始记录02-犬粪棘球绦虫抗原检测

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1、犬粪棘球绦虫抗原检测原始记录受控号:NIPD-10-TR-2013-02检测编号联系地址瑞金二路207号样品性质检验依据□犬粪棘球绦虫抗原检测细则□其他试剂生产单位批号有效期实验用仪器设备酶标仪、恒温培养箱检测方法与结果方法:1洗涤液配制:用去离子水水将浓缩洗涤液(2号液)按1:10稀释,充分混匀即为工作洗涤液。2样品处理:犬粪样品需要预先低温(-70℃以下)冷冻7天以上,以灭活虫卵。称取1g犬粪,加入1mL已用等体积去离子水稀释的样本稀释液,充分搅拌混匀,静置10分钟,再经3000rpm离心10分钟,取上清液检测。3加样反应:每次

2、试验设阴性对照2孔、阳性及空白对照各1孔(分别加入阴性、阳性对照及样本稀释液100μL)。样品检测孔每孔分别取犬粪上清液100μL加入。37℃避光反应30分钟。甩去孔内液体,用已稀释的洗涤液洗涤6次,每次停留1分钟,最后一次甩净,拍干。4加酶反应:除空白对照孔外,其余每孔加酶结合物(1号液)100μL,37℃避光反应30分钟。甩去孔内液体,如上洗涤,拍干。5显色反应:加底物(3号液)和显色剂(4号液)各50μL,混匀,37℃下避光显色10分钟。6终止反应:加终止液(6号液)50μL,以空白对照调零,用酶标仪于450nm波长(630n

3、m作为参考波长)读取OD值。结果:阴性对照1:阴性对照2:阳性对照:空白:实验□有效□无效Cut-off值(COV)=检测人审核人检测日期审核日期

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