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《32份西瓜种质资源和品种对枯萎病抗性鉴定及综合评价》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
分类号：遂社学校代码：１０７１２ＵＤＣ；６３５．６研巧生学号：２０１４０５（＾９７密级：公开？）＆把衣卷奇捉大学２０１６届专业学位硕壬研究生学位（毕业）论文３２份西瓜种质资源和品种对枯萎病抗性鉴定及综合评价？■■■类型农业推广硕±领域、方向园艺．．－研究生赵银平ｊ——％指导教师张显教授：■ｒ．．＇完成时间２０１６年５月古；—■＇’．Ｖ，＇Ｊｆ＊？．．■－，ｒ－．＂．—？一一＿．？＊＂？＇－，－．．■．．．，－１ｒ’？？中国陕西杨凌－，．．．．．＇．一．－？Ｉ－＇．．兵‘，ｒ〇二．＊－ｖ Classificationcode:S651Universitycode:10712UDC:635.6Postgraduatenumber:2014050397Confidentialitylevel:OpenThesisforFull–timeProfessionalMaster’sDegreeNorthwestA＆FUniversityin2016IDENTIFICATIONANDCOMPREHENSIVEEVALUATIONOF32WATERMELGERMPLASMRESOURCESANDVARIETIESRESISTANCETOFUSARIUMWILTMajor:AgriculturalExtensionResearchfield:HorticultureNameofPostgraduate:ZhaoYinpingAdviser:ProfessorZhangXianDateofsubmission:May2016YanglingShaanxiChina 研究生学位论文的独创性声明本人声明：所呈交的专业学位硕壬论文是我个人在导师指导下独立进行的研《工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暫巧规定如果违反此规定一切后果与法律责任均由本人》，，承担。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究结果也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它，教育机构的学位或证书而使用过的材料一同工作的同事对本研究所做的任何贡献。与我均已在论文的致谢中巧了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间；乃年Ｉ月引曰导师指导研究生学位论文的承诺本人承诺：我的专业学位硕去研究生杏著秦所呈交的硕去学位论文是在我指导下独立开展研究工作及取得的研究结果，属于我ｋ岗职务工作的结果，并严格按巧学校。如《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我愿接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。Ａ时间曰导师签名：：年月＾綠娶 关于巧究生学位论文使用授权的说巧Ｉ西北农林科技片属西北农林科技。大保本学位论文的知识产权大学本人意存或同学送交论文的纸质化和化查和借北家关部口或机构电子允许论文被间阅；同意西向国有，将本位论文的全或分容授权汇编入优硕壬位论文全农林科技大学学部部内录《中国秀学文据库进行出化受相关权益。数》，并享本人保证在业开（或者工调离）西北农林科技大后发表或者使巧本，毕离作学，学工Ｗ西北农林科一位论文及关时技其相的作成果将大学为第署名单位否则愿意按，，，人和著法关规定接受。《华民共国作权》等有处理并承担法律责任中任何收和保管本论文各种化本的其他位和个人括研究生本人经本论文存单包未作（）论文进改、、改的的意不得对行复制、修、发出租编等侵犯著权者导师同，有本行作行为则按违背《华人民共和国权法》关规定处理追究法任。否，中著作等有并律责，的位论文在保限（保学密不得议任何方式发表、借闲、复印、缩或担描密期内，印汇编论文）制手段保存、复如＇４／八主生名：：曰研究签时间年月：：备日师签若时间年月导Ｊ 32份西瓜种质资源和品种对枯萎病抗性鉴定及综合评价摘要西瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌西瓜专化型引起的一种世界性土传真菌病害。近年来由于西瓜重茬种植面积的不断扩增，导致西瓜连作障碍普遍发生，特别是枯萎病的发生，目前已经成为限制西瓜生产的主要因素之一。选用抗性品种是防治西瓜连作障碍的基本方法。本研究目的是明确32份西瓜材料对枯萎病的抗性表现情况，综合品质指标选出抗病性强、品质佳的优良西瓜种质资源或品种，以期为今后西瓜枯萎病的防治工作提供相关依据。本研究对所选32份西瓜种质和品种材料采用浸根接种法进行苗期人工接种，观察统计发病株数及各病级株数，计算发病率和病情指数，并进行抗性分级，对其枯萎病抗病性进行鉴定和评价；同时，选用连作五年的重茬地种植进行大田成株期抗病性鉴定，进一步评价其抗病性。在上述研究的基础上，测定了这32份西瓜材料的根际土壤pH、叶片MDA、SOD、PAL等，对其抗性机理进行了探讨和分析。取得如下主要研究结果:1、苗期枯萎病发病率的调查结果显示：高抗（HR，0%～20%）材料有11份；中抗（MR，21%～50%）材料共有11份；轻抗（SR，51%～80%）材料共有7份；感病（S，81%～100%）材料共有3份；重茬地成株期枯萎病自然发病率调查结果显示：高抗（HR，0%～20%）材料有12份；中抗（MR，21%～50%）材料共有11份；轻抗（SR，51%～80%）材料共有7份；感病（S，81%～100%）材料共2份。苗期鉴定与重茬地鉴定结果基本一致，个别品种略有偏差。2、结合品质指标测定，筛选出10种抗性强、品质佳的材料，分别为：西农8号、农科大6号、红冠龙、玲珑王、京欣三号，Y-1（母）、F09、中10海抗、京5父、M08。3、根际土壤pH与供试西瓜材料枯萎病发病率呈负相关性；MDA含量与供试西瓜材料枯萎病发病率呈正相关性；PAL活性与供试西瓜材料枯萎病发病率呈负相关性；叶片SOD活性与供试西瓜材料枯萎病发病率呈负相关。研究还表明供试西瓜材料枯萎病的抗性强弱与品质的优劣并无显著相关性。关键词：西瓜；枯萎病；苗期；重茬地 IDENTIFICATIONANDCOMPREHENSIVEEVALUATIONOF32WATERMELGERMPLASMRESOURCESANDVARIETIESRESISTANCETOFUSARIUMWILTABSTRACTFusariumwiltisaworldwidefungusesdiseaseofwatermeloncausedbyspecialFusariumoxysporum.f.sp.niveum.Duetoconstantlyexpansionofwatermeloncroppinginrecentyears,continuouscroppingobstaclesofwatermelonhappenednormally,especiallyFusariumwilt,whichhadbecomeoneofthemainfactorsthatlimitthewatermelonproduction.Screeningresistantvarietiesisthebasicmethodtopreventandcontrolwatermeloncontinuouscroppingobstacles.Sothepurposeofthisstudywastoexploretheresistanceof32watermelonmaterialsagainstfusariumwilt;Combinedwithqualityindex,toselecthigh-resistanceandgood-qualitywatermelongermplasmresourcesandvarieties.Soastoprovideevidenceoffusariumwiltpreventionandcontrolinthefuture.Theresearchwastoidentifythe32germplasmresourcesandvarietiesresistancetofusariumwiltwithinoculatingartificiallyatseedingstagebyrootsoakmethod.Observedandcountedthenumberofincidenceanddiseasedplantsatalllevels,calculatedincidence,diseaseindexanddividedthelevelofresistance;Identifiedandevaluatedtheirresistancetofusariumwilt.Atthesametime,identifiedthethefusariumwiltresistanceat5-yearcontinuouscroppinglandtofurtherevaluatetheirresistancetofusariumwilt.MeasuredtherhizospheresoilpH、leafMDA,SOD,PALof32kindsofwatermelonmaterialsonthefoundationofthestudiesabove.Themainresultsobtainedasfollows:1.Theresultsofincidenceoffusariumwiltdiseaseshowedthat11kindsofmaterialswerehighresistance(HR,0%~20%)tofusariumwilt;11kindsofmaterialsweremediumresistance(MR,21%~21%),7kindsofmaterialswerelightresistance(SR,51%~80%);3kindsofmaterialswere(S,81%~100%).Theresultsaboutincidenceoffusariumwiltinfive-yearcontinuouscroppingareashowedthat12kindsofmaterialswerehighresistance(HR,0%~20%)againstfusariumwilt;11kindsofmaterialsweremediumresistance(MR,21%~21%);7kindsoflightresistance(SR,51%~80%);2kindsofmaterialsweresusceptible(S,81%~100%).Theevaluationresultsduringseedingstageandinsuccessivecroppingareawerebasicallysame,exceptparticulardifference.2.Combinedwithqualityindexandselected10kindsofhigh-resistanceandgood-qualitymaterials,XinongNo.8,NongKeDaNo.6,HongGuanlong,LingLongwang, JingxinNo.3,Zhong10Haikang,Y-1(female),F09,Jingfu-5,M08.3.TherhizospheresoilpHandtheresistanceoffusariumwiltinwatermelonwerenegativelycorrelated;thecontentofleafMDAandtheresistanceoffusariumwiltinwatermelonwerenegativelycorrelated;leafPALactivityandleafSODactivitywerepositivelycorrelatedwithwatermelonfusariumwiltdiseaseresistance.Therewasnosignificantcorrelationbetweentheresistanceandqualityofwatermelonfusariumwilt.KEYWORDS：Citrulluslanatus；Fusariumwilt；Seedingstage；Continuouscroppingland 目录第一章文献综述.......................................................................................................................11.1连作障碍及其发生的原因..............................................................................................11.1.1土壤盐分积累.......................................................................................................11.1.2土壤养分缺失.......................................................................................................11.1.3土壤酸碱度异常...................................................................................................21.1.4物理方面...............................................................................................................21.1.5生物方面...............................................................................................................21.2西瓜枯萎病的研究与防治现状......................................................................................21.2.1西瓜抗枯萎病机理...............................................................................................21.2.2发病症状................................................................................................................21.2.2西瓜枯萎病抗性品种选育方面的研究进展.......................................................31.2.3西瓜枯萎病抗性遗传规律方面的研究进展.......................................................31.2.4嫁接防治西瓜枯萎病目前的研究进展...............................................................41.2.5农业防治方面的研究进展...................................................................................51.2.6药剂防治方面的研究进展...................................................................................51.3西瓜枯萎病抗性品种筛选方面的研究..........................................................................51.4本研究的目的和意义......................................................................................................7第二章材料与方法...................................................................................................................82.1试验材料.........................................................................................................................82.1.1供试菌种................................................................................................................82.1.2供试西瓜材料........................................................................................................82.1.3主要仪器................................................................................................................92.1.4主要试剂................................................................................................................92.2试验设计.........................................................................................................................92.3测定项目与方法..............................................................................................................92.3.1植株发病率............................................................................................................92.3.2形态指标..............................................................................................................102.3.3生理生化指标......................................................................................................102.3.4西瓜果实品质指标..............................................................................................102.4数据统计与分析...........................................................................................................11第三章结果与分析.................................................................................................................123.1枯萎病发病率调查结果................................................................................................12 3.1.1苗期鉴定结果......................................................................................................123.1.2田间重茬地鉴定结果..........................................................................................133.1.3小结......................................................................................................................133.232种西瓜试材外观和品质指标测定结果...................................................................143.2.132种西瓜试材外观指标测定结果.....................................................................143.2.232种西瓜试材品质指标测定结果.....................................................................163.2.3小结......................................................................................................................163.3不同抗性级别西瓜试材对叶片MDA、PAL、SOD、根际土壤pH的影响...........183.3.1不同抗性级别西瓜试材对根际土壤pH的影响...............................................193.3.2不同抗性级别西瓜试材对叶片MDA含量的影响..........................................203.3.3不同抗性级别西瓜试材对叶片PAL活性的影响.............................................203.3.4不同抗性级别西瓜试材对叶片SOD活性的影响............................................213.3.5小结......................................................................................................................213.4不同抗性级别西瓜试材与品质之间的相关性分析....................................................22第四章讨论与结论.................................................................................................................234.1讨论.............................................................................................................................234.1.1接种方法切实可行..............................................................................................234.1.2人工接种与重茬地成株期自然发病鉴定结果基本一致..................................234.1.3试验接种所用生理小种有待拓展......................................................................234.1.4西瓜枯萎病发病率与相关生理指标间的关系讨论..........................................244.1.5西瓜对枯萎病的抗性强弱与品质无关..............................................................244.2结论.............................................................................................................................23参考文献...................................................................................................................................26致谢.......................................................................................................................................30作者简介...................................................................................................................................31 第一章文献综述西瓜（Citrulluslanatus），是葫芦科（Cucurbitaceae）西瓜属（CitrullusSchrad），一年生蔓生藤本植物，原产非洲南部的卡拉哈里沙漠地区。西瓜是世界农业中重要的水果，其播种面积和产量在十大水果中分别居第4位。中国西瓜面积占世界总面积的60％以上，产量占70％以上（马跃等2011）。中国西、甜瓜播种面积约占蔬菜面积的l1.5％．种植业播种总面积的1.5％，但其产值约为种植业总产值的6％，在部分主产区约为20％（马跃等2011）。1996年以来，西北产区的西瓜生产发展较快，成为我国第三大西瓜主产区（邵宇2006）。西瓜是一种最要的解暑果品，它是城市郊区种植业结构调整中发展较快的经济作物（唐粉玲2008），在部分地区已变成农民增产增收的主要园艺作物，但西瓜是一种严忌重茬的作物，极易发生连作障碍，容易引起枯萎病的严重爆发和泛滥，严重的还会导致西瓜的甜度降低，长势衰弱、果个瘦小，质量劣质，产量太低等一系列问题，影响农民的经济收入（田云鹤等2015）。西瓜枯萎病是制约优质高效西瓜连作生产的主要障碍因子之一。重茬地一般发病率在30%以上，严重地块达80%以上，甚至造成绝产，给农户造成巨大的经济损失。在我国这样的人口大国，必须严格控制预防西瓜枯萎病的发生。西瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌西瓜专化型引起的一种真菌性土传病害（范鸿雁等2012），病菌从根毛或者是根部伤口侵入，在维管束导管中生活，堵塞植物的导管，阻碍水的畅通流动，引起西瓜苗萎蔫，特别是在整个植株的生育阶段都能发生，尤其在结瓜前至膨大中期，此时温度高、湿度大。发病的时候白天萎蔫，早晚初期还可以恢复，后期严重时就不能再恢复正常，整个植株可能会全部枯死。它是多年种瓜种植户危害西瓜的主要病害之一（2015，李冬芹）。因此，该病已严重的妨碍到西瓜的正常生产。目前生产上主要有以下几种防治方法:培育抗病品种、筛选抗病品种、农业防治，例如嫁接等，以及生物学防治等等。文章中就目前这几种防治方法的研究现状进行简要的综述。1.1连作障碍及其发生的原因连作障碍是指在正常的栽培管理条件下，同一块地连年种植同种作物而造成所种作物病虫害发生严重、产量下降、品质变劣、生长势变差等现象。大棚西瓜连作障碍主要表现在植株生育迟缓，茎干细弱，龙头不展，叶片瘦小，不结果或果实变小，品质劣变，植株大面积死亡，严重者，瓜果无收。目前生产上，蔬菜连作障碍已经严重影响了设施蔬菜规模化生产，尤其是设施农业的可持续性发展。1.1.1土壤盐分积累塑料大棚内一般喷药量比较大，塑料薄膜常年对棚内作物进行覆盖，通常放风次数过少，导致棚内作物水分供给不平衡，塑料大棚又容易营造高温的环境，导致蒸腾作用1 显著，长此以往，土壤表层以下的肥料或是盐分都会随着土壤水分的蒸腾作用而析出地表。这就导致土壤盐渍化现象的产生。1.1.2土壤养分缺失同一块土地连续多年种植作物，土壤肥力严重下降，同一种作物对土壤里面各个矿物质元素或者营养物质的需求也是不同的，所以，种植多年后势必导致土壤中各个矿质元素或者营养物质严重失衡或缺失，导致同块土地若是接连种植作物，则使得作物不能正常生长，严重影响作物产量和品质。1.1.3土壤酸碱度异常多年在同块土地上种植相同作物会导致土壤中正负离子发生变化，而且根系分泌出来的物质也会影响土壤中的理化性质，再加上雨水过多，特别是二氧化硫污染严重的地区或者多方面因素的影响，导致雨水偏酸性，更加会使得土壤酸化，直接影响作物的生长。1.1.4物理方面若农户长期对土田进行不合理施肥，特别是如果大面积施用氮肥，土壤原来具有的有机质含量结构就会遭到破坏，土壤中的孔隙度以及土壤原本完好的团粒结构都会遭到破坏，更重要的是还有可能使原本松软的土壤发生板结。不利于作物的良好生长。1.1.5生物方面连作会导致西瓜根系分泌一些物质，如酚酸类，等大量累积，导致自毒作用对西瓜的正常生长会产生严重危害，对土壤中微生物群落产生一定的影响，打破生物群落间的互相平衡，导致枯萎病发生更为严重。1.2西瓜枯萎病的研究与防治现状1.2.1西瓜抗枯萎病机理西瓜枯萎病是目前西瓜生产上遍及世界的一种病害，是由尖孢镰刀菌西瓜专化型Fusariumoxysporumf.sp.niveum（FON）引起的（EgelandMartyn2013）。为好氧性微生物（王拱辰等1996）。尖孢镰刀菌西瓜专化型存在小种分化现象，目前公认的有4个生理小种，分别为生理小种0、生理小种1、生理小种2和生理小种3（徐伟慧2014）。Lin等（2010）应用Fon-1/Fon-2引物结合PCR分析，可以快速地鉴定尖孢镰刀菌西瓜专化型。生理小种0可以使一些感病品种发病；生理小种1比生理小种0更具毒性，它能使抗生理小种0的一些西瓜品种感病；生理小种2几乎可以侵染所有的西瓜品种，但野生种质PI296431-FR除外；生理小种3能够引起PI296431-FR枯萎，维管束褐变（Zhouetal.2010）。西瓜尖孢镰刀菌的生理小种不断分化，但目前对于西瓜枯萎病菌生理小种的划分尚无统一的标2 准（宋凤芝2014）。1.2.2发病症状西瓜枯萎病在西瓜生长的全生育期均能发病，以伸蔓期至开花坐果期发病最为严重。苗期发病后幼苗茎基部变褐缢缩，子叶萎蔫下垂，随后幼苗全萎蔫并出现倒伏现象，严重时，发病1d后即可死亡；成株期发病后西瓜植株的生长受到抑制，下部叶片发黄并逐渐向上蔓延，开始时只表现为白天午后萎蔫，早晨晚上可恢复，几天后全株开始萎蔫，甚至整株枯死；病蔓基部常有褐色条斑或出现表皮纵裂等现象，并伴有树脂状胶质粘液流出，茎基部维管束变褐；遇潮湿天气，茎基部呈水浸状腐烂，植株茎基部表面出现白色至粉红色霉状物（吕湘江等2015）。1.2.3西瓜枯萎病抗性品种选育方面的研究进展美国是第一个进行枯萎病抗病性育种研究工作的发达国家，1911育成了第1个具有抗病性的抗病品种Conqueror。但因为其农艺性状较差，所以在后来的几年并未得到大面积的推广（Orten1911）。自从我国有人开始着手抗病育种遗传工作以来，通过对国内已经鉴定出来的西瓜材料还加上引进国外的一些抗性品种或资源来扩充我国的抗性资源库，为进一步的抗性研究鉴定基础。经过各种育种方法以及组织培养等，我国已育成抗病苏红宝、丰乐5号、西农八号、郑抗2号、郑抗1号、京抗三号、京抗二号、抗病苏蜜等一系列各种抗性级别的材料，但截至目前仍未选育出抗病好且品质极佳的表现突出的材料，可供农户生产上放心使用以及大面积的推广（肖光辉2001）。马建祥、张显等人于2010年选育出农科大五号新品种，其抗枯萎病效果也较为理想（马建祥等2010）。郑果所推出的郑抗3号、郑抗2号、郑抗1号，曾有人研究证实，庆发八号、西农八号在同一块土田上连种3年都不会有枯萎病的发生，抗病效果较为显著。非洲南部的干旱地区是栽培西瓜的抗病遗传资源的重要来源，有助于对枯萎病和炭疽病抗性品种的发展（李丹2015）。1.2.4西瓜枯萎病抗性遗传规律方面的研究进展Netzer（以色列植物病理学家）在进行西瓜对枯萎病抗性遗传研究时将高抗病的品种“卡红”与容易感病的品种Mallali杂交后发现，F1表现出较高的抗病性，F2与感病亲本“卡红”回交的BC群体的抗病与感病分离比例符合3：1和1：1的分离规律。因此得出结论，西瓜对枯萎病的抗性是单基因显性遗传（NetzerD．1980）。周凤珍用西瓜高抗品种“卡红”与感病品种杂交所得到的试验结果与Netzer用“卡红”与感病品种Mallali进行杂交所得到的抗性遗传规律的结果基本相同，结果都认为西瓜对枯萎病的抗性遗传是受单基因控制的显性遗传（周凤珍等1996）。湖南省园艺研究所选育出的对枯萎病抗性较高的材料D3-1和D3-2是通过将瓠瓜的DNA导入西瓜中得到的，再接着用取得的抗性较高的材料与抗病较差的材料蜜宝杂交，研究他们的对西瓜萎蔫病的抗病性传承规则，发现与周所取得结果相同，即对枯萎病抗性高的材料与枯萎病抗性低的品种杂交而3 得到的F1代对枯萎病的抗性较高，而F2代及与枯萎病抗性低的亲本（蜜宝）回交的BC1代，抗病与感病的分离比例符合3:1和1:1的基因分离定律，这说明将瓠瓜DNA导入西瓜得到抗枯萎病的抗性遗传也是受单基因或单DNA片段控制的显性遗传（肖光辉等2000）。目前关于枯萎病抗性遗传规律的研究结果都表明，西瓜对枯萎病的抗性受单DNA片段或单基因控制的显性遗传，抗枯萎病的材料进行抗病育种可以获得对枯萎病抗性表现突出的西瓜材料或品种。崔广海和张国良选育出的抗枯萎病的材料有88-44和88-57，并发现88-57的抗病性遗传特性是单基因控制的显性遗传（崔广海等1999），而88-44属于多基因控制的数量性状遗传。（于天祥等2004)认为，西瓜萎蔫病病菌1号生理小种是被单个主要效用的基因控制的显性遗传，而抗生理小种2号符合加性-显性模型，是由隐性多基因控制的，加性效应是最为主要的，感病基因是显性的。Guo,SG（Guo,Shaogui）等人于2010西瓜上的全基因组测序工作已经全面启动。Lin,YH（Lin,Ying-Hong）;Chen,KS（Chen,Kan-Shu）等人通过研究开发PCR扩增技术，利用分子标记的方法可以很容易区分抗敏感西瓜杂交群体。这将对以后西瓜枯萎病抗性研究方面做出巨大的贡献。1.2.5嫁接防治西瓜枯萎病目前的研究进展生产上，我们经常通过嫁接培育抗病品种以达到防治西瓜枯萎病的目的。近几年，我国关于西瓜的嫁接栽培模式较多，发展快，效果显著。运用抗西瓜枯萎病的品种或者对枯萎病有免疫作用的瓜类做砧木，与西瓜进行嫁接，不仅能达到抗枯萎病的目的，而且还可以增加产量、克服连年种植西瓜的土壤障碍。与自根西瓜相比，嫁接西瓜的砧木根系发达，吸收水肥的能力强，从而增加了地上部分的生长量、提高同化效率，因而会不同程度的增加产量。嫁接的方法多样，而我们经常使用的只有三种：切接、靠接、顶插接。葫芦、南瓜等是抗病力较强的非枯萎病菌寄主的瓜类，用它们作砧木，能达到较好的防治枯萎病的目的。所用砧木的类型对西瓜的品质也有影响。一般认为葫芦砧对西瓜的食用品质没有太大影响；南瓜砧木则会使果实果皮厚度增加，瓜瓤较硬；而冬瓜砧对品质的影响结论尚不统一。意大利研究者GiuseppeCollaa等人认为南瓜砧木在嫁接后砧木对环境的抗逆性能力明显优于笋瓜砧木和瓠瓜砧木（GiuseppeCollaa2014）。超丰1号葫芦，野生西瓜“勇士”等均是较优良的嫁接砧木品种，常用的优良砧木还有日本的一些南瓜和葫芦型的砧木。雷鸣曾研究了嫁接西瓜抗枯萎病的能力（雷鸣2001）,嫁接后，显著提高了西瓜苗对西瓜枯萎病的抗性,其中对西瓜枯萎病的抗性最好的是用丰乐葫芦嫁接的西瓜苗,5种砧木对西瓜接穗的亲和性都很强,嫁接后有90%以上的西瓜苗成活,与西瓜结合能力最强、并能有效控制枯萎病。因为嫁接的西瓜苗有根系发达,叶片较大,茎蔓较长、粗壮的特性，所以嫁接西瓜苗的生长势强，产量较高。4 2013年孙兴祥等人做了通过施用生物农药和生物有机肥，以达到防治西瓜枯萎病目的的研究。生物防治对西瓜连年种植、枯萎病发生严重的地块的防效不明显，BIO生物肥或采用嫁接对西瓜种植时间短、发病轻的西瓜地块防止枯萎病效果十分明显（孙兴祥等2013）。埃及苏伊士运河大学,园艺学院研究发现舌接法（TAG），插接法（HIG）和侧接法（SIG）对西瓜的生长和果实产量的的影响（F.H.Mohamed2014），阿斯旺F1被嫁接到砧木（“nun6001F1”，“strongtosaF1”和“tetsukabutoF1”）、这三种砧木是南瓜和笋瓜的杂交种。研究结果表明：所检测的三种嫁接方法中，TAG是一种最好的西瓜嫁接的方法。然而嫁接的方法和使用的砧木之间还存在着一定的相互关系。新的研究表明，根系分泌物在减少西瓜枯萎病方面扮演者重要的角色（Lingetal.2013）。嫁接方法不但会解决土壤里病害的传播问题，还能够提高作物的产量、改良商品品质特性等。但也尚有一些问题亟待解决。（许如意等2007）首先,要解决砧木和接穗亲和的问题,若是亲和性不好则生育后期可能会出现由于营养无法供应而造成的生理性急性凋零萎蔫,并且应该避免嫁接后会对品质外观、口感等造成的不良影响。其次，筛选出的砧木要适应性强，最好能够适合于不同的气候条件、季节、地域、栽培条件以及西瓜品种等。再次,明确不同的砧木接穗组合，应该使用的最佳嫁接方法和适宜的生长环境。此外,虽然西瓜嫁接栽培防治枯萎病的效果很好,但它也会带来较严重的副作用—根结线虫病,因此，要种植嫁接西瓜最好先做好防治根结线虫病的工作。种种研究表明防治西瓜枯萎病的有效方法还是嫁接，但是目前嫁接会改变果实的风味品质，对果实的品质造成一定的影响，所以，在嫁接方面仍需进一步研究和改善。1.2.6农业防治方面的研究进展轮作是西瓜生产管理中最早所用的防治方法，早期的一些报道显示西瓜尖孢镰刀感菌可在土壤中连续存活16年（Martyn2014）。实行换种乱茬，及时除掉发病植株，强化管理是从根本上解决此困难的有力办法。此外，以色列等国家在闲暇时节覆膜，利用太阳能加热土壤，杀死病菌。用铵态氮肥蒸和熏可提高阳光暴晒的效果。酸性土质一般都有助于枯萎病的发生，而且土质过酸会导致土壤中钙含量降低，钙含量的降低则会导致枯萎病发病率增高，可运用氧化钙调节土壤pH，减少枯萎病的出现。研究还发现，增加CO2施肥量可以较为明显的降低西瓜幼苗的发病率和病情指数（单国雷2007）。许多作物的根系分泌出来的物质都有一定的抑制土传病原菌的作用（Dixon2001；陈红兵等2003；Haoetal.2010），蒜和洋葱精炼出来的物质对西瓜枯萎病中菌丝的生产，孢子的形成以及数量都能起到阻碍作用（宋莉等2007；杜黎黎等2011）。1.2.7药剂防治方面的研究进展目前，使用化学药剂是园艺作物生产上控制西瓜萎蔫病的重要途径。用溴甲烷、氯化苦等进行土壤熏蒸，能破坏土壤中的病菌，虽然造成大气污染，但同时也能杀灭土壤中的许多其他有益微生物，造成土壤贫瘠。在播种前的二十五天用薄膜遮住土地，再运5 用光能，配合0.1%多菌灵，能显著降低西瓜枯萎病的出先和产生。25%的咪鲜胺乳油、70%的恶霉灵可湿性粉剂可有效防治西瓜枯萎病的发生（王汉荣等2011）。用药剂溴氰菊酯、等杀菌的药对西瓜进行喷洒和浸根对西瓜凋萎病也有一定抑制作用。镰刀菌孢子的产生和菌丝的发生及伸长会受到生物杀害菌类药剂的一定抑制作用，能够升高抗西瓜幼苗受到毒害的能力。西瓜的病原菌与AM真菌有着一种共同竞争去侵害其他作物的关系，AM真菌对提高植株的抗病性有很大的帮助推动作用，所以要使得植物长得健壮旺盛，可以适当的增加细菌和放线菌的数量，再加上改变结构，包括土壤微生物群落等（李敏等2004）。运用具备拮抗作用的细菌、放线菌（周永强等2008）、芽孢杆菌（朱育菁等2007）可抗御西瓜枯萎病。个别生物防菌植株能够在植物根部快速地繁衍后代并产生生物透过性膜。将生物防菌和微量的杀死杂菌剂共同作用，可更加快捷的提高防范成果。三唑酮用量的合理分配可以让木霉菌丝在西瓜根的附近繁衍，可有效防治和阻碍枯萎菌的包子在瓜类作物根附近产生和形成，若将三唑酮和木霉菌共同运用可更加深层次的提高瓜类作物根附近的群落结构，产生明显的防治效果，当然也能阻碍枯萎病菌的发生。另外，据了解，沼气池中的沼液，以及有机肥对抑制枯萎病产生有强烈阻碍功能（凌宁等2009）。截至目前，西瓜枯萎病的深入探索方法有特别多种，但能快速投入生产的极少，所以，在这方面仍然有待进一步探索。这就要求我们要在今后的研究过程中更加深入、切合实际的去研究一些切实可行，操作简单，省时省工的方法，应用于今后的实践生产中。为防止西瓜枯萎病，生产出丰产、健康、优质的西瓜品种做出良好的基础研究贡献。1.3西瓜枯萎病抗性品种筛选方面的研究张显曾于1988年采用浸根法对西瓜品种进行苗期枯萎病抗性鉴定，发现中抗及高抗型的材料多以美国、欧洲生态型为主，俄罗斯生态型和东亚生态型,其果实的产出质量极佳,但多数在抗病性方面有所欠佳,而新大和及旭大和的“易位系”例外,这是由于诱发了染色体易位后其抗病性也发生了变异所致（张显等1988）。王振跃等数人于2001年对西瓜品种共16份品种进行了苗期枯萎病的抗性鉴定，发现其中六份品种抗病性较强，病情指数分别为20.0、21.5、22.3．23.2、23.9.25和28．2；还有四份材料病指都在50以上（王振跃等2001）。段会军，李喜焕等人曾在2004年也进行过枯萎病抗性品种筛的研究，用四十八份供试材料筛选出了不同级别的西瓜枯萎病抗性品种，其中感病性的西瓜品种和高抗性的西瓜品种占了比较大的部分，轻抗和中抗材料所占数量较少（段会军等2004）。安徽省农业科学院培育出一批抗枯萎病西瓜品种，经西瓜苗期抗病性鉴定，秀丽、秀雅、9823、春宝为高抗品种．新京欣、早春红玉、W-98×W-02为中抗品种，皖杂1号为低抗品种（丁建成等2005）。从整体上获得的研究结果来看,从美国引进的的抗病品种和材料大部分都能达到高抗类型,而我国和日本等国引进的材料大多抗性不佳，抗性较强的材料仍然比较欠缺。6 中国的西瓜枯萎病高抗性材料仍然比较欠缺，所以育种家应该根据目前所研究的现状，结合一些高抗性材料培育出抗性较强的品种材料，供生产所用。1.4本研究的目的和意义西瓜枯萎病又称蔓割病、萎凋病、萎蔫病等，是一个世界性的毁灭性的土传真菌病害，目前在我国各地均有发生。枯萎病可造成西瓜产量下降20%～30%，有些地块减产50%以上，甚至绝产（肖光辉等1997）。由于近年来西瓜栽培面积迅速扩大，尤其是设施栽培的高度集约化，使重茬西瓜面积不断增多，西瓜枯萎病的发生越来越普遍和严重。因此，解决这一问题已成为目前西瓜生产中的当务之急。目前解决方法主要有以下几种：选用抗性品种、轮作、嫁接防治、化学药剂防治、生物技术防治等。轮作一般要求至少6年以上的，但是由于我国耕地面积和现行的土地使用制度的限制，西瓜生产无法实行严格的轮作制度，轮作年限越来越短，而保护地西瓜生产则不可避免地连作重茬。嫁接栽培虽然能够克服镰刀菌的危害，但由于嫁接增加了生产投入，砧木选择不当常常改变西瓜的品质，从而使嫁接在生产上的推广应用受到限制。化学药剂防治方法在防治作物病害中起着重要的作用。然而，枯萎病是土传病害，化学防治效果甚微。另外，植物病原菌的多样性和变异性给植物病害的化学防治带来困难（隋丽2008）。同时，化学杀菌剂的使用造成瓜果农药残留量增加，直接影响消费者身体健康，大量残留在土壤中的农药，污染环境，影响了农业可持续发展，破坏生态平衡。生物防治因其具有对环境、生态和人类健康安全的优点，在世界各国得到了广泛的关注并发挥着越来越重要的作用，但从报道的田间试验效果来看，生防菌剂的效果与现在使用的化学药剂相比还有很大的差距，不能解决生产难题。综合以上方法，选用西瓜抗性品种是最简单易行、经济实用的有效措施。本研究针对西瓜抗枯萎病育种和生产中抗枯萎病品种选择需求，选用课题待测亲本资源及生产上主栽品种32个。选用全国分布较广的西瓜枯萎病生理小种1号苗期进行接种人工鉴定，因为1号生理小种在我国致病力最强、存在范围最广（张屹等2015）。因此，以1号生理小种为病原菌株，开展西瓜品种枯萎病抗性评价具有很强的代表性；同时在田间连作土壤种植进行成株期鉴定，分析田间成株期和人工苗期接种结果的一致性，和品质与抗病性的关系，并结合相关品质指标，筛选出抗性强且品质佳的材料或品种。一方面给生产上提供一定的科学依据和参考，另一方面，为进一步的品种选育或其他相关研究提供研究材料。7 第二章材料与方法2.1试验材料2.1.1供试菌种尖孢镰刀菌西瓜专化型生理小种1号。接种菌株为杨凌本地菌，采自于陕西省咸阳市杨凌区揉谷镇西北农林科技大学西甜瓜试验基地。取田间重茬地中发病植株病健交界处组织，流水冲洗1个小时，用75％乙醇消毒30S，再用5％Naclo消毒5min，用无菌水清洗3~5次。消毒后的组织于超净工作台上用剪刀剪至2-3厘米，再将发病部位轻轻按压贴于PDA培养基表面，25℃，恒温条件下培养2-3天，长出真菌菌落后挑取边缘菌丝再进一步纯化。若无其他杂菌，扩繁后则可制作液体培养基，将固体PDA培养基上的菌落刮至制作好的液体培养基中，将其置于摇床中220rpm，28℃，培养7d后取出，于超净工作台中用四层纱布过滤，并用血球计数法计算并配制合适的孢子浓度，于4℃冰箱中保存。2.1.2供试西瓜材料本试验所用种质资源和品种有32份。表2-1供试资源及品种名称和来源Table2-1Thenameandsourceoftestedresourcesandvarieties资源名称来源品种名称来源KY-1西农八号京父-2农科大五号京父-3农科大六号西甜瓜课题组M08红冠龙F19玲珑王F09福运来134-2C万福来Y-1(母)红双喜Y-3(父)黑牡丹西甜瓜课题组149红小玉杨凌千鼎种苗有限公司148小天使京母金福京5父秦红208中10优单京欣三号中10海抗----津抗----04-1-2----Y1F----8 2.1.3主要仪器超净工作台、高压灭菌锅、穴盘、冰箱、生化培养箱、叶绿素检测仪、土壤pH检测仪、营养钵、培养皿、电子秤、紫外分光光度计、恒温水浴锅、超低温冰箱、低温离心机、烘箱、直尺、电子天平、离心管、研钵、移液枪、试管等。2.1.4主要试剂75％酒精、0.1％升汞、无菌水、蒸馏水、考马斯亮蓝G-205溶液、5%钼酸铵溶液、草酸-EDTA溶液、5%硫酸、偏磷酸-乙酸溶液、0.1%愈创木酚、0.18%H2O2、KNO3，K2HPO4、MgSO4、FeSO4、NBT、核黄素等。2.2试验设计本试验于2015年3月至2015年6月分别在西北农林科技大学南校区塑料大棚和杨凌揉谷西甜瓜试验站塑料大棚内进行。本试验分为苗期和重茬地成株期两部分。苗期枯萎病抗性鉴定，对所选32份西瓜资源和品种，设置一个对照（CK）30株，一个处理（菌液浓度为1×106个/ml），处理设置三个重复，每个重复各选取30株移栽于121℃高压湿热灭菌2h灭菌基质中。2015年3月21日开始育苗，待幼苗长至三一心时，4月28日按同一标准筛选，采用浸根法进行人工接种。接种后，室内温度保持在23～28℃，前两天确保幼苗不萎蔫，必要时进行遮阴，3d后剔除不正常的幼苗（耿丽华等2010）。植株出现萎蔫症状时开始调查记录发病情况，直至接种后21d结束调查。连作五年的重茬地成株期枯萎病自然发病情况鉴定，对32份西瓜资源和品种，所选用大棚为南北走向，采用随机区组设计，设置三个区组，区组分布由北至南分别为第一区组、第二区组、第三区组。每个区组中的小区随机排列，每个小区栽植同一品种10株。做好标记，使其自然发病。设置对照品种为Sugarbaby。于伸蔓前后开始进行发病率统计，直至收瓜后结束调查。2015年3月5日开始育苗，待幼苗长至两叶一心时，4月3日按同一标准筛选定植，缓苗一周。于伸蔓前后开始进行发病率统计。试验采用爬地栽培，整枝方式为三蔓整枝，开花期人工授粉，每株留瓜一个，主蔓坐瓜。整个生育期内按照当地正常田间管理方式进行管理。在伸蔓后期于每个小区随机选取同一品种3株采其功能叶进行各项生理指标的测定。2.3测定项目与方法2.3.1植株发病率苗期人工接种方法（浸根接种法）：将幼苗从穴盘中连根挖起,用水冲洗干净后晾去水分,用剪刀剪掉主根尖端部分1～2cm,将处理植株浸入配制的孢子悬浮液(1×106个/ml)中15min，同时将对照部分浸入无菌水中15min,浸泡之后立即将幼苗移栽于盛有消毒基质的32孔穴盘中,并贴好标签。9 本文抗性分级按Smarty和Bruton（1989）提出的标准，苗期和成株期均以病株率进行评价：高抗（HR）病株率≤20%；中抗（MR）病株率为21%～50%；轻抗（SR）病株率为51%～80%；感病（S）病株率>80%。并按统一病株分级标准调查分级：0级：植株叶片无萎蔫症状；1级：一片或两片子叶轻微变黄，生长正常；2级：1～2片子叶黄化，或者一片子叶出现死坏斑；真叶轻度萎蔫；3级：真叶明显萎蔫，子叶全部枯死，植株的生长受阻，稍矮化；4级:全株严重萎蔫，叶片枯黄；5级：整株枯死，甚至死亡。苗期和田间成株期所统计发病株数均代表病级数为3级以上（包括3级）的发病植株总和。病情调查工作一般在每天下午同期进行，减少因夜间地温发病恢复或早晚气温变化所造成的误差。发病率和病情指数具体计算公式如下:发病率=病级数为3级以上的发病植株之和（株）/调查总株数（株）×100%病情指数=Σ（各个级别病株数（株）×病级数）/（总株数（株）×最高病级）2.3.2形态指标2.3.2.1单瓜质量西瓜成熟后，每个小区随机选取成熟度较好的3个（每个处理共10个）进行采收，称重，计单瓜质量，取平均值。2.3.2.2果形指数将西瓜果实延中轴一切为二，尽量保证切面平整。用直尺测量西瓜果实的纵径和横径，计算果形指数：果形指数=纵径（cm）／横径（cm）。2.3.2.3果皮厚度将西瓜果实延中轴一切为二，尽量保证切面平整。用直尺测定西瓜的果皮厚度。2.3.2.4果实皮色、形状采用肉眼观察。2.3.3生理生化指标SOD采用NBT染色法（Mishra等1972）测定，PAL采用硼酸缓冲液法（《植物生理实验指导》高俊凤2000）。丙二醛（MDA）含量采用硫代巴比妥酸法测定（《植物生理实验指导》高俊凤2000）。2.3.4西瓜果实品质指标2.3.4.1可溶性固形物含量用手持糖度仪分别测定西瓜果实中心略偏阳面部位和近瓜瓤1cm处的可溶性固形物含量。2.3.4.2可溶性蛋白含量采用考马斯亮兰G-205染色法测定西瓜果实的可溶性蛋白含量。10 2.3.4.3维生素C含量采用钼蓝比色法法测定西瓜果实的维生素含量。2.3.4.4瓤质和口感请3位同学进行品质品尝，评价划分等级。2.3.4.5瓤色通过肉眼观察统计划分。2.4数据统计与分析采用DPS数据处理系统及SPSSStatistics22软件对试验数据进行分析处理，采用MicrosoftExcel2010软件作图，采用Duncanmethod（邓肯新复极差法）进行差异显著性检验，图表数据均为三次重复的平均值。11 第三章结果与分析3.1枯萎病发病率调查结果3.1.1苗期鉴定结果如表3-1所示，为准确鉴定32份西瓜试材对枯萎病的抗性强弱，在统计苗期发病率的基础上对各试材进行了各级病株数的统计。结果发现，二者抗性鉴定分级结果保持一致。按照发病率抗性标准分级，调查结果显示，有高抗（HR，0%～20%）材料11份，分别为，西农8号、农科大6号、玲珑王、KY-1、M08、F19、148、中10优单、中10海抗、Y1F、红冠龙。占总数的34.4%；中抗（MR，21%～50%）材料11份，分别为，京欣三号、红双喜、F09、京父-2、京父-3、万福来、149、京5父、津抗、04-1-2、红小玉。占总数的34.4%；轻抗（SR，51%～80%）材料7份，分别为，农科大5号、福运来、Y-1（母）、京母、黑牡丹、金福、秦红208。占总数的21.9%；感病（S，81%～100%）材料3份，分别为，134-2C，Y-3（父）、小天使。占总数的9.4%。就总体而言，中抗以上的材料占总数的68.8%，共有22份种质资源，品种和材料基本各占一半。表3-1苗期枯萎病发病情况调查结果Table3-1Theresultsofwiltdiseaseaboutwatermelonatseedingstage不同级别病株数发病株总株数发病率Thenumberofthediseaseincidenceabout病情指数抗性类型试材数DiseasedifferentlevelincidenceMaterialsTotalDiseaseDiseaseTypesof%0级1级2级3级4级5级numbernumberindexresistance西农8号50918.0334434218.8HR京欣三号311548.41501131146.5MR农科大5号503468.01501632562.8SR农科大6号3239.4202730019.8HR玲珑王32412.5241311215.6HRKY-15247.743413109.1HR福运来533973.6905343273.6SR万福来411741.5200426940.5MR京父-2582746.62704322246.6MR京父-3561933.93214251233.9MRM08521019.2363352318.1HRF1952917.3411112616.9HRF09321443.81602211143.1MR134-2C574680.700114113181.8SY-1(母)321134.4301826350.6SRY-3(父)323196.9001132795.0S红双喜641828.14303421226.9MR12 不同级别病株数发病株总株数发病率Thenumberofthediseaseincidenceabout病情指数抗性类型试材数DiseasedifferentlevelincidenceMaterialsTotalDiseaseDiseaseTypesof%0级1级2级3级4级5级numbernumberindexresistance149481020.8311742320.8MR14851713.7403111514.5HR京母563155.417261171362.5SR京5父411536.6223941250.0MR黑牡丹603965.01705253265.3SR中10优单56712.5435131312.5HR中10海抗5647.1397621112.1HR津抗421535.71539112234.3MR04-1-2361130.6170736231.7MR红小玉501428.0441141925.6MR小天使474289.44011142783.4SY1F5259.6393541011.2HR金福432558.11512331956.3SR红冠龙6158.2475403211.5HR秦红208462656.51019591256.5SR注：表中HR：表示高抗；MR：表示中抗；SR：表示轻抗；S：表示感病。表3-2同。Note:Inthetable,HRshowshighresistance;MRshowsmediumresistace;SRshowslightresistance;Sshowseasilyinfected.Thesamebelowinthetableof3-2.3.1.2田间重茬地鉴定结果如表3-2所示，对32份材料进行重茬地成株期的发病率调查结果显示，按照发病率抗性标准分级，有高抗（HR，0%～20%）材料12份，分别为，西农8号、农科大6号、玲珑王、KY-1、M08、F19、Y-1（母）、Y-3（父）、中10优单、中10海抗、红小玉、红冠龙。占总数的37.5%。中抗（MR，21%～50%）材料11份，分别为，京欣三号、万福来、F09、红双喜、149、148、京5父、津抗、04-1-2、Y1F、秦红208。占总数的34.4%。轻抗（SR，51%～80%）材料7份，分别为，农科大5号、福运来、京父-2、134-2C、京母、黑牡丹、金福。占总数的21.9%。感病（S，81%～100%）材料2份，分别为，小天使、京父-3。占总数的6.25%。3.1.3小结田间重茬地成株期抗性调查结果与苗期人工接种结果基本一致，有个别品种出现偏差，苗期表现较差，但田间表现较为突出，例如Y-3（父），苗期结果显示感病，但田间重茬地结果显示高抗，相差3个级别；同时也有部分品种苗期表现较好，但田间重茬地表现较差，例如京父-3，苗期结果显示是中抗，但田间结果显示感病，相差两个级别。13 表3-2田间重茬地自然发病枯萎病发病率调查结果Table3-2Theresultsaboutthenaturalwiltincidenceoncontinuouscroppingfield发病率抗性级别发病率抗性级别试材试材DiseaseResistanceDiseaseResistanceMaterialsMaterialsincidence(%)levelincidence(%)level西农8号13.3HR红双喜40.0MR京欣三号30.0MR14930.0MR农科大5号53.3SR14836.7MR农科大6号16.7HR京母60.0SR玲珑王13.3HR京5父26.7MRKY-10.0HR黑牡丹80.0SR福运来60.0SR中10优单10.0HR万福来50.0MR中10海抗3.3HR京父-273.3SR津抗33.3MR京父-386.7S04-1-246.7MRM080.0HR红小玉16.7HRF190.0HR小天使83.3SF0923.3MRY1F30.0MR134-2C56.7SR金福76.7SRY-1(母)0.0HR秦红20836.7MRY-3(父)13.3HR红冠龙6.7HR3.232份西瓜试材外观和品质指标测定结果3.2.132份西瓜试材外观指标测定结果如表3-3所示，就生长势而言，表现中强以上的材料共有18份，分别为，西农8号、京欣三号、农科大6号、玲珑王、KY-1，M08、F19、F09、Y-1（母）、Y-3（父）、149、148、京5父、中10优单、中10海抗、津抗、秦红208、红冠龙；就坐果难易程度而言，表现为易的材料共有18份，分别为，西农8号、京欣三号、农科大5号、农科大6号、玲珑王、万福来、M08、F19、F09、Y-1（母）、Y-3（父）、红双喜、京5父、中10优单、中10海抗、红小玉、小天使、秦红208、红冠龙；就贮运性而言，表现好的材料共有15份，分别为，西农8号、农科大6号、KY-1、M08、F19、149、148、黑牡丹、中10优单、中10海抗、津抗、秦红208、红冠龙、Y-1（母）、京5父；综合32份试材各个外观性状，表现突出的共11份，分别为，西农8号、京欣三号、农科大6号、中10优单、中10海抗、秦红208、红冠龙、M08、F19、F09、Y-1（母）。14 表3-332份西瓜试材外观指标Table3-3Theappearanceindexabout32watermelonmaterials单瓜重试材生长势坐果性果型指数果实形状果实皮色贮运性皮厚WeightDegreeIndexofThicknessofperGrowthoffruitFruitFruitTransportfruitpeelmelonMaterialsvigorfruitshapeshapecolorproperty(cm)（kg）1.43±4.20±0.78±西农8号强易椭圆花皮好0.21fgh0.39bc0.07jkl1.10±1.97±0.40.53±京欣三号中强易高圆花皮较好0.09jkl1ijklm0.05l1.08±2.96±0.87±农科大5号正常易高圆花皮较好0.23kl0.23efg0.08ghij1.48±6.5±1.10±农科大6号强易椭圆花皮好0.35efg0.50a0.02bcde1.46±2.58±0.53±玲珑王中强易椭圆花皮较差0.26fghi0.32fghi0.05l1.00±2.69±1.50±KY-1强难圆花皮好0.01l0.18fgh0.11a1.34±2.35±0.20.67±福运来弱较易椭圆花皮较差0.08ghij3ghijk0.14ijkl1.45±1.82±0.00.57±万福来弱易椭圆花皮较差0.16fgh7klmn0.04kl1.05±1.89±0.20.83±京父-2弱难高圆花皮较好0.24l1jklmn0.09ghijk1.10±1.93±0.20.94±京父-3弱难高圆花皮较好0.14ghijk0klmn0.12cdefghi1.26±4.42±1.03±M08强易短椭花皮好0.20ijkl0.35b0.13cdefg1.91±3.6±1.07±F19中强易长椭花皮好0.17cd0.23cd0.01bcdef1.94±3.06±1.47±F09中强易长椭核桃皮较好0.19cd0.20ef0.12a1.20±1.89±0.00.67±134-2C正常较易高圆核桃皮较差0.02hijkl6jklmn0.09ijkl1.13±4.10±0.97±Y-1(母)强易高圆花皮好0.08jkl0.08bc0.11cdefgh1.16±3.70±0.87±Y-3(父)中强易高圆花皮较好0.20ijkl0.32bcd0.07ij1.18±2.01±020.77±红双喜正常易高圆花皮较好0.14kl2ijklmn0.07ghijkl1.70±2.51±0.31.17±149中强较难长椭墨绿皮好0.29de7fghi0.13bcd15 单瓜重试材生长势坐果性果型指数果实形状果实皮色贮运性皮厚WeightDegreeIndexofThicknessofperGrowthoffruitFruitFruitTransportfruitpeelmelonMaterialsvigorfruitshapeshapecolorproperty(cm)（kg）1.48±2.53±1.17±148中强难椭圆黑核桃皮好0.17efg0.36fghi0.11bc1.13±2.04±0.10.90±0.07京母正常较易高圆花皮较好0.07ijkl0jklmcdefgh1.45±3.10±0.80±0.05京5父强易椭圆核桃皮好0.15ef0.24effghijkl1.00±1.66±0.83±黑牡丹弱难圆墨绿皮好0.12jkl0.23lmn0.06ghij2.26±4.10±1.30±中10优单中强易长椭核桃皮好0.27ab0.30bc0.15ab2.34±3.41±0.87±0.09中10海抗强易长椭核桃皮好0.21a0.45dedefghi1.91±3.08±0.82±0.06津抗中强难长椭墨绿皮好0.27bc0.52efghijk1.19±1.37±0.87±0.1304-1-2弱较易高圆花皮较好0.18kl0.24nodefghi1.16±0.99±0.57±红小玉正常易高圆花皮差0.11jkl0.11o0.23kl1.85±2.32±0.70±小天使弱易长椭花皮差0.17cd0.30ijkl0.01hijkl1.13±2.85±1.13±Y1F正常较易高圆花皮较差0.09jkl0.16efg0.11bcde1.00±1.59±0.60±金福正常较易圆黄皮较差0.15jkl0.14mn0.17jkl1.47±4.22±0.92±秦红208中强易椭圆花皮好017fgh0.26bc0.09efghi1.42±4.20±0.95±0.11红冠龙强易椭圆花皮好0.21efg0.21bccdefgh3.2.232份西瓜试材品质指标测定结果如表3-4所示，就果实瓤色而言，表现大红和红色的材料共有27份，分别为，西农8号、农科大5号、农科大6号、玲珑王、福运来、万福来、京父-2、京父-3、M08、F19、F09、134-2C、Y-1（母）、Y-3（父）、红双喜、149、148、京母、黑牡丹、中10海抗、津抗、04-1-2、红小玉、小天使、金福、秦红208、红冠龙；就瓤质口感而言，表现为酥脆和脆且口感较好的的材料共有24份，分别为，西农8号、京欣三号、农科大5号、农科大6号、玲珑王、万福来、京父-2、京父-3、M08、F19、F09、134-2C、16 Y-1（母）、Y-3（父）、红双喜、京母、中10海抗、津抗、红小玉、小天使、Y1F、金福、秦红208、红冠龙；就可溶性固形物而言，表现较为突出的共有22份，分别为，西农8号、京欣三号、农科大5号、农科大6号、玲珑王、福运来、万福来、京父-3、M08、F09、134-2C、Y-1（母）、Y-3（父）、京5父、黑牡丹、中10海抗、津抗、红小玉、小天使、金福、秦红208、红冠龙。综合果实品质性状各项指标选出18份表现突出材料：分别为，西农8号、京欣三号、农科大5号、农科大6号、玲珑王、万福来、M08、F09、134-2C、Y-1（母）、Y-3（父）、中10海抗、津抗、红小玉、小天使、金福、秦红208、红冠龙。表3-432份西瓜试材品质指标Table3-4Thequalityindexabout32watermelonmaterials中心可溶性边际可溶性中边差蛋白质含量维生素C含量固形物固形物DifferenceSolubleVitamin试材瓤色瓤质口感CenterEdgeofcenterproteinCMaterialsColorTextureTastesolublesolubleandedgecontentcontentcontent(%)content(%)(%)(mg·g-1·10-2)(mg·g-1·10-2)12.20±8.47±3.73±0.71±16.51±西农8号红酥脆好0.36abc0.92cdefg0.90ab0.04ab0.66c11.0±9.20±1.87±0.54±10.59±京欣三号粉红酥脆好0.98ghij1.56bcde0.96bcd0.03fghi0.42jk11.7±9.20±2.53±0.57±10.58±农科大5号红酥脆好0.10gh1.06bcde0.99abcd0.01efgh0.40jk11.5±7.67±3.86±0.57±16.34±农科大6号红脆好0.27bcdef1.40defg1.22ab0.01efgh0.22c12.5010.87±1.63±0.42±11.17±玲珑王大红酥脆好±0.45ab0.98ab0.99bcd0.02jk0.60ij4.03±3.23±0.80±0.35±8.62±KY-1浅黄硬差0.23k0.40h0.45d0.04k0.24l12.50±10.00±2.50±0.61±0.0213.85±福运来大红沙好0.45a0.00abc0.45abcdbcdefgh0.26efg12.2±11.40±0.87±0.63±0.0212.60±万福来红脆好0.14abcd0.89a0.80dabcdef0.31gh10.6±8.40±2.23±0.48±12.39±京父-2红酥脆中0.14ghij0.53cdefg1.34abcd0.01ij0.46ghi11.1±9.03±2.10±0.51±12.67±京父-3红酥脆中0.11ij0.74bcdef0.52abcd0.01ghi0.40efg11.73±7.40±4.33±0.57±14.04±M08红脆中0.41ghij0.53efg0.37a0.01efgh1.10def10.47±7.67±2.80±0.56±14.28±F19大红酥脆好0.41ghij0.58defg0.47abcd0.02efgh0.68def11.27±8.90±2.37±0.57±16.24±F09大红酥脆中0.63ghij1.54bcdef1.28abcd0.05efgh0.51a17 中心可溶性边际可溶性中边差蛋白质含量维生素C含量固形物固形物DifferenceSolubleVitamin试材瓤色瓤质口感CenterEdgeofcenterproteinCMaterialsColorTextureTastesolublesolubleandedgecontentcontentcontent(%)content(%)(%)(mg·g-1·10-2)(mg·g-1·10-2)11.2±9.00±2.27±0.55±16.71±134-2C红酥脆中0.41gh1.48bcdef1.21abcd0.05fghi1.56a11.73±9.23±2.50±0.57±14.02±Y-1(母)红酥脆好0.41abcde0.68bced1.02abcd0.02ij0.41l11.23±8.67±2.56±0.34±6.74±Y-3(父)红脆中0.23hi0.58cdefg0.54abcd0.03k0.94m10.73±7.93±2.80±0.52±13.96±红双喜大红脆好0.58fghij1.01cdefg0.93abcd0.01hi0.63def10.73±9.67±1.06±0.59±0.0914.75±149红硬差0.58ghij1.53abcd1.65ddefgh0.79d10.47±7.80±2.67±0.62±0.0211.42±148大红硬差0.58fghij1.31defg1.69abcdcdefgh0.44hij10.53±8.40±2.13±0.62±11.93±京母红酥脆中0.62defgh0.80cdefg0.28abcd0.01fghi0.42de11.07±0.107.33±3.74±0.56±15.18±京5父粉红硬脆中defghij0.58efg058ab0.06fghi0.19d11.40±9.47±1.93±0.57±9.45±黑牡丹红软好0.47hij1.29bcde0.85bcd0.01efgh0.06kl11.13±9.00±2.13±0.68±13.33±中10优单粉红硬中0.27fghij1.00bcdef0.99abcd0.02abc0.29efg10.60±8.73±1.87±0.69±15.14±中10海抗红脆中0.52j0.25cdef0.65bcd0.03a0.62a11.27±7.77±3.50±0.66±13.29±津抗大红酥脆中0.21fghij0.68cdefg0.88abc0.03abcd0.36fg10.87±7.00±3.87±0.47±11.51±04-1-2红软中0.67fghij2.00fg2.25ab0.02ij0.69hij11.07±0.998.63±2.44±0.68±8.96±红小玉大红脆好fghij1.29bcdef0.96abcd0.06abcd0.87l11.93±0.679.67±2.26±0.54±17.42±小天使大红酥脆好bcdefg0.58abc0.36abcd0.03fghi0.35bc10.03±8.17±1.86±0.66±18.34±Y1F粉红酥中0.99hij1.01cdefg1.84bcd0.04abcd0.24ab11.30±0.329.93±1.37±0.63±10.66±金福红脆好efghij0.31abc0.29cd0.13abcde0.44jk11.13±6.67±4.46±0.61±0.0218.52±秦红208红脆好0.10ij0.58g0.58aabcdefg0.50ab11.67±0.727.73±3.94±0.57±16.67±红冠龙红脆好abcd0.64defg0.74ab0.01efgh0.75c18 3.2.3小结综合32份西瓜试材的外观和品质表现共筛选出9种表现较好的试材，分别为，西农8号、京欣三号、农科大6号、中10海抗、秦红208、红冠龙、M08、F09、Y-1（母）3.3不同抗性级别西瓜试材对叶片MDA、PAL、SOD、根际土壤pH的影响3.3.1不同抗性级别西瓜试材对根际土壤pH的影响我国土壤酸碱度可分为5级：pH<5.0为强酸性，pH5.0~6.5为酸性，pH6.5~7.5为中性，pH7.5~8.5为碱性，pH>8.5为强碱性。由图3-1所示，其中高抗种质资源和品种（以下简称试材）根际土壤pH值最高，平均值为7.05；感病试材的根际土壤pH值最低，平均值为6.26。高抗试材与感病试材根际土壤pH值差异显著（P>0.05）。中抗试材与轻抗试材根际土壤pH值差异不显著（P>0.05）。高抗与中抗、中抗与感病根际土壤pH值差异也均不显著。就总体而言，如图3-1所示，随着抗性级别的降低，土壤根际pH整体呈下降趋势，进一步对各个抗性级别西瓜材料的发病率和根际土壤pH进行相关性分析，如表3-5，结果发现，两者相关系数为-0.765*，即土壤根际pH与枯萎病发病率呈负相关（P>0.05），即在一定范围内西瓜材料枯萎病发病率越高，土壤根际pH越低。由此推断可通过调节根际土壤pH值，增强西瓜材料对枯萎病的抗性。pH际土壤根hesoilPHintherhizosphereT图3-1不同抗性级别试材对根际土壤pH的影响Fig.3-1InfluenceofrhizospheresoilpHamongdifferentresistancelevelmaterials.注：高抗代表抗性级别为HR的12份资源和品种的根际土壤pH的平均值，中抗代表抗性级别为MR的11份资源和品种的根际土壤pH的平均值，轻抗代表抗性级别为SR的7份资源和品种的根际土壤pH的平均值，感病代表抗性级别为S的12份资源和品种的根际土壤pH的平均值。不同小写字母分别表示不同抗性级别材料根际土壤pH值差在α=0.05水平上差异显著。下同。NOTE:TheaveragevalueofpHintherhizosphereof12resourcesandcultivarsrepresentingresistancelevelsofHR,theaveragevalueofpHintherhizosphereof11resourcesandcultivarsrepresenting19 resistancelevelsofMR,theaveragevalueofpHintherhizosphereof7resourcesandcultivarsrepresentingresistancelevelsofSR,theaveragevalueofpHintherhizosphereof2resourcesandcultivarsrepresentingresistancelevelsofS.ThedifferentnormallettersindicatedsignificantdifferenceamongdifferentmaterialsonthesoilpHintherhizosphereat0.05levels,respectively.Thesamebelow.3.3.2不同抗性级别西瓜试材对叶片MDA含量的影响图3-2结果显示，四个抗性级别中，感病西瓜试材丙二醛（MDA）含量最高，平均值为：16.487（mmol·g-1·FW-1），高抗试材MDA含量最低,平均值为：12.115（mmol·g-1·FW-1），高抗试材分别与轻抗试材以及感病试材的MDA含量呈现差异显著性（P>0.05）。就总体而言，如图3-2所示，随着各西瓜材料抗性级别的逐渐降低，叶片中膜脂过氧化产物MDA的含量总体呈上升趋势。为进一步探索叶片MDA含量与枯萎病发病率之间的关系，对各个抗性级别西瓜材料的发病率和叶片MDA进行相关性分析，如表3-5，两者相关系数为0.749*，即叶片MDA含量与枯萎病发病率呈正相关（P>0.01），即西瓜材料枯萎病发病率越低，叶片MDA含量越低。)-1·FW-1MADContent含量(mmol·gDAM图3-2不同抗性级别试材对叶片MDA含量的影响Fig.3-2InfluenceofresistancelevelonthecontentofMDAaboutleavesamongdifferentmaterials.3.3.3不同抗性级别西瓜试材对叶片PAL活性的影响图3-3结果显示，四个抗性级别中，高抗试材的叶片苯丙氨酸解胺酶（PAL）活性最高，平均值为：222.111（U·g-1·h-1），感病试材的叶片PAL活性最低，平均值为：195.939（U·g-1·h-1）。高抗试材分别与中抗和轻抗试材中叶片PAL活性差异不显著，但与感病试材叶片中PAL活性呈现差异显著性。就总体而言，如图3-3所示，随着各西瓜材料抗性级别的逐渐降低，叶片中苯丙氨酸解酶PAL的含量总体呈下降趋势。为进一步探索叶片苯丙氨酸解酶与枯萎病发病率之间的关系，对各个抗性级别西瓜材料的发病率和叶片PAL活性进行相关性分析，如表3-5，两者相关系数为-0.663*，即叶片PAL活性与枯萎病发病率呈负相关（P>0.01），即西瓜材料枯萎病发病率越高，叶片PAL活性越低。20 )-1·h-1PALActivity(U·g活性ALP图3-3不同抗性级别试材对叶片PAL活性的影响Fig.3-3InfluenceofresistancelevelonthecontentofSODaboutleavesamongdifferentmaterials.3.3.4不同抗性级别西瓜试材对叶片SOD活性的影响图3-4结果显示，四个抗性级别中，高抗试材叶片超氧化物歧化酶（SOD）活性最高，平均值为：732.854（U·g-1·FW-1·h-1）。感病试材叶片SOD活性最低，平均值为：575.180（U·g-1·FW-1·h-1）。高抗试材与中抗试材叶片SOD活性差异不显著（P>0.05），但高抗试材和中抗试材分别与感病试材差异显著（P>0.05）。轻抗试材与其他三种抗性级别试材均呈现差异不显著。就总体而言，如图3-3所示，随着各西瓜材料抗性级别的逐渐降低，叶片SOD活性总体呈下降趋势。为进一步探索叶片超氧化物歧化酶与枯萎病发病率之间的关系，对各个抗性级别西瓜材料的发病率和叶片SOD活性进行相关性分析，如表3-5，两者相关系数为-0.748*，即叶片SOD活性与枯萎病发病率呈负相关（P>0.01），即西瓜材料枯萎病发病率越高，叶片SOD活性越低。)-1·h-1SODActivityFW-1活性(U·gODS图3-4不同抗性级别试材对叶片SOD活性的影响Fig.3-4InfluenceofresistancelevelontheactivitiesofSODaboutleavesamongdifferentmaterials.21 表3-5不同抗性级别西瓜试材发病率与根际土壤Ph、MDA、PAL、SOD相关性Table3-5CorrelationsofrhizospheresoilpH、MDA、PAL、SODandthediseaseincidenceaboutdifferentresistancelevelwatermelonmaterials不同抗性级别土壤根际pHMDAPALSOD发病率-0.765*0.749*-0.663*-0.748*注：*表示在α=0.05水平上差异显著。Note:*showhighlysignificantdifferenceat0.05levels.3.3.5小结根际土壤pH与供试西瓜材料枯萎病发病率呈负相关性；MDA含量与供试西瓜材料枯萎病发病率呈正相关性；PAL活性与供试西瓜材料枯萎病发病率呈负相关性；叶片SOD活性与供试西瓜材料枯萎病发病率呈负相关。3.4不同抗性级别西瓜试材与品质之间的相关性分析如表3-6所示，不同抗性级别西瓜材料与西瓜果实蛋白质含量，维生素C含量,以及中心可溶性固形物含量均无显著相关性。表明西瓜对枯萎病的抗性强弱与西瓜本身的品质并无直接关系。表3-6不同抗性级别西瓜试材发病率与蛋白质、维生素C、中心可溶性固形物含量相关性Table3-5CorrelationsofVC、Pro、centersolublecontentandthediseaseincidenceaboutdifferentresistancelevelwatermelonmaterials中心可溶性不同抗性级别蛋白含量维生素C含量固形物含量发病率0.1960.0350.02022 第四章讨论与结论本研究分别进行了苗期和田间重茬地成株期枯萎病抗性品种筛选鉴定工作，并对其植株形态指标、枯萎病发病率及果实产量、品质进行测定，从而选出抗性强、品质佳的优质、抗性品种供生产推广参考。但由于田间环境复杂，大棚中各种环境因素不能完全平衡，可能导致结果中数据有部分偏离。苗期鉴定结果和大田成株期鉴定结果有部分品种抗性级别不吻合。4.1讨论4.1.1接种方法切实可行西瓜枯萎病是制约西瓜生产的主要病害，有关西瓜品种或种质对枯萎病抗性的鉴定显得尤为重要。本文在前人研究基础上，进一步完善了西瓜苗期枯萎病抗性的鉴定方法。早在1988年，王鸣、张显曾研究表明浸根接种方法是一种快速、准确的鉴定西瓜枯萎病抗性的方法。耿丽华等（2010）建立了一套完整的西瓜枯萎病菌生理小种鉴定技术体系，并进行验证。该鉴定体系中所用接种方法为浸根接种法。这些与本试验所用浸根接种方法相同。张显也曾于1988年进一步研究表明浸根接种法的孢子浓度为1×105～108个／ml之间为宜，本研究明确了所接种浓度为1×106个／ml。本文中苗期和大田自然发病对枯萎病抗性的鉴定结果基本一致。综合以上信息，说明本试验采用这种方法所获得的鉴定结果是切实可靠的。也有研究采用纸钵撕底浸孢子液接种鉴定体系进行枯萎病抗性鉴定（刘水芳等2007），这种方法操作较简单，可在以后的研究中应用。4.1.2人工接种与重茬地成株期自然发病鉴定结果基本一致本研究对不同西瓜品种和种质的苗期人工接种鉴定结果与在大田条件下的自然发病情况基本一致,其中西农8号的鉴定结果与王振岳等（2001）和段会军等（2004）鉴定结果保持一致。其他参试品种大多为目前市场上的一些新品种或者西瓜课题组现有的一些研究材料，相关文献中目前还未报道它们的抗性鉴定结果。田间成株期鉴定结果与苗期鉴定结果基本一致，但个别试材抗性级别不相吻合。苗期人工接种条件更适于发病,且接菌量较大,主要受人为因素控制，基本比较稳定，因而各品种的病情指数均较高；但大田鉴定受外界环境影响因素太多，环境因素的改变会对植物的生长调节起到一定的影响作用，且由于大田不同地块土壤带菌量不同，使得一些在田间连作地表现较好的材料，如Y-3（父），在苗期人工接种的条件下抗病性表现较差。所以，若要有效避免此类情况的发生，可进行多年重复鉴定。4.1.3试验接种所用生理小种有待拓展西瓜枯萎病是由尖镰孢菌西瓜专化型侵染引起的维管束系统病害（张曼等2013）。迄今为止，己发现西瓜枯萎病有4个生理小种，即生理小种0、生理小种1、生理小种2、23 生理小种3（苗峰等2007）；本试验所接菌种是由杨凌揉谷实验基地发病植株上分离得到的，经鉴定为生理小种1号。苗期和成株期基本都在预期时间内发病，并表现出品种间的较大差异。生理小种1号在生产上为害普遍且分布面积广，是枯萎病为害西瓜的重要生理小种。生理小种1号致病性不是最强，抗1号小种的材料，一般都抗生理小种0号，但对生理小种2号并不一定具有抗性。2号小种相比于0号和1号，更具侵染性，其致病性较强。而目前3号小种发生较少，不常见，相关报道较少。由于试验时间紧迫，并未接种生理0号和2号小种，所以，要更加准确完善的确定材料的抗性，可继续对供试材料进行0号和2号生理小种的抗性鉴定研究。4.1.4西瓜枯萎病发病率与相关生理指标间的关系讨论随着生物膜理论和研究技术的发展,越来越多的研究证实了生物膜与植物抗逆性密切相关（王建明等2001）。丙二醛（MDA）是膜脂过氧化最重要的产物之一，它的产生能够加剧膜的损伤，因此在植物衰老和抗性生理研究中，可通过了解膜脂过氧化的程度，以间接测定膜系统受损程度以及植物的抗逆性，本研究通过分析叶片MDA含量与枯萎病发病率之间的相关性，发现枯萎病发病率越高，叶片MDA含量越高，即高抗试材MDA的含量低于感病试材，因此叶片MDA含量这一指标可作为判定西瓜试材对枯萎病的抗性强弱。超氧化物歧化酶（SOD）是生物体内重要的抗氧化酶，具有特殊的生理活性，是生物体内清除自由基的首要物质，SOD在植物体内水平的高低意味着衰老与死亡的直观指标。本研究通过分析西瓜枯萎病发病率与叶片SOD活性之间的相关性，发现二者呈显著负相关，即枯萎病发病率越低，叶片SOD活性越高，高抗试材叶片SOD活性高于感病试材。为此类病害的致病机理提供理论基础和科学依据。苯丙氨酸解胺酶（PAL）是植保素、木质素、和酚内物质化合物合成的关键，PAL的活性与酚内化合物的合成密切相关，由酚内物质氧化而成的醌类物质是潜在的抗病因子，本研究也证实了这一点，通过分析西瓜枯萎病发病率与PAL活性之间的相关性，结果发现，西瓜枯萎病发病率与PAL活性呈显著负相关关系，高抗试材叶片PAL活性低于感病试材。这与徐敬华等（2001）研究结果相一致。本研究主要从枯萎病发病率与相关酶活性指标之间的关系进行了探讨，但具体到抗性品种与感病品种在酶活性高低方面的单独变化趋势和相互关系及致病机理仍有待进一步探讨。4.1.5西瓜对枯萎病的抗性强弱与品质无关本试验研究结果发现西瓜对枯萎病的抗性强弱与西瓜本身品质无显著相关性，即西瓜品质的优劣与西瓜对枯萎病的抗病性并无直接关联，由此可知，品质好的西瓜其抗病性并不一定弱，而品质差的西瓜其抗性并不一定强，例如西瓜品种小天使，其抗病性较差，但其品质突出。因此，选择品质好和抗性高的种质资源进行杂交组合，可为今后育成优质种质资源提供一定的参考依据。24 4.2结论本论文通过研究32份西瓜种质资源和品种对西瓜枯萎病的抗性，并结合相关品质、外观及相关生理指标的测定结果，分析得出以下结论：1、综合苗期和重茬地成株期枯萎病抗性鉴定结果以及品质指标的测定筛选出了10种抗性强、品质佳的优良种质资源和品种，品种有：西农8号、农科大6号、红冠龙、玲珑王、京欣三号，种质有：Y-1（母）、F09、京5父、中10海抗、M08。2、根际土壤pH、叶片PAL、叶片SOD与西瓜枯萎病发病率呈显著负相关关系，叶片MDA含量与西瓜品种对枯萎病发病率呈显著正相关关系，其变化幅度在一定程度上反应西瓜材料对枯萎病的抗性强弱，因此可作为今后筛选抗枯萎病西瓜种质资源的重要参考指标。3、同一西瓜种质资源或品种对枯萎病的抗性在苗期和成株期表现一致。4、通过对不同抗性西瓜材料与西瓜品质指标进行相关性分析，发现西瓜枯萎病的抗性强弱与品质的优劣没有显著相关性，即西瓜对枯萎病抗性强弱与西瓜品质无直接关系。25 参考文献陈少裕.1989.膜脂过氧化与植物逆境胁迫.植物学通报,6(4):211-217.单国雷.2007.CO2加富对西瓜苗期枯萎病发生的影响.安徽农业大学,(10364):S316丁建成,张其安,方凌,董言香.2005.西瓜新品种抗枯萎病鉴定.中国瓜菜,(6):27-29范鸿雁,周文静,王祥和,罗志文,何凡.2012.海南大棚西瓜枯萎病病原菌生物学特性及室内毒力测定.热带农业科学,6:70-75耿丽华,郭绍贵,吕桂云等.2010.西瓜枯萎病菌生理小种鉴定技术体系的建立和验证.中国蔬菜,(20)：52-56.顾卫红,杨红娟,马坤.2004.西瓜种质资源的抗蔓枯病性鉴定及其应用.上海农业学报,20(1):65-67寇清荷,梁志怀,王志伟,肖光辉,刘建雄.2012.西瓜枯萎病菌生理小种鉴定与抗病育种研究进展.中国蔬菜,(14):9-17雷鸣.2001.嫁接对西瓜枯萎病抗性的影响.安徽农业科学,29(5):655-656李丹.2015.如何防治西瓜枯萎病.农家参谋·种业大观,(5):27-28李冬芹.2015.西瓜常见病害防治技术.西北园艺,(1):32-33凌宁,王秋君,杨兴明,徐阳春,黄启为,沈其荣.2009.根际施用微生物有机肥防治连作西瓜枯萎病的研究.植物营养与肥料学报,15(5):1136-1141吕湘江,李清萍,范淑英.2015.西瓜枯萎病综合防治研究进展.北方园艺,(06):187-190马建祥,张显,张勇.2010.西瓜新品种农科大5号.中国蔬菜,(15):36-37马跃.2011.透过国际分析看中国西瓜甜瓜的现状与未来.中国瓜菜,24(2):64-67苗锋,孙秀坤,刘振敏,张立树,李志欣.2007.西瓜枯萎病发生规律及防治研究进展.现代农业科技,(11):81-85邱金龙,金巧玲,王钧.1998.活性氧与植物抗病反应.植物生理学通讯,34(1):56-63宋凤芝.2014.西瓜枯萎病田间防治技术及病菌致病性研究.[博士学位论文].杭州:浙江大学宋莉,程智慧,孟焕文.2007.大蒜鳞茎粗提物对西瓜枯萎病菌的抑杀效应.西北农林科技大学学报,35(3):135-138苏世鸣,任丽轩,杨兴明.2008.西瓜专化型尖孢镰刀菌的分离鉴定及水稻根系分泌物对其生长的影响.南京农业大学学报,31(1):57-62隋丽.2008.放线菌769对水稻抗稻瘟病的诱导抗性研究.[博士学位论文].哈尔滨:吉林农业大学孙兴全,陈捷.2010.浅析崇明设施大棚西瓜连作障碍的原因与对策.安徽农学通报,16(22):81-94孙兴祥,林红梅,何春萍,倪伟.2013.嫁接与生物防治对西瓜枯萎病防治效果的研究.中国蔬菜,(14):88-91孙云.2010.幌伞枫对薇甘菊种子的化感作用.[硕士学位论文].广州:中山大学.唐粉玲.2008.施肥对西瓜产量和品质的影响及经济效益分析.[学位论文].海南:海南大学田云鹤,王丰青,李明杰,索艳飞,李连珍,张宝,张重义.2015.不同地黄种质连作障碍效应分析.河南农业科学.22(8):98-103王汉荣,方丽,任海英,茹水江.2011.西瓜枯萎病防治药剂筛选.植物保护,37(1):150-152王建明,张作刚,郭春绒,贺运春.2001.枯萎病菌对西瓜不同抗感品种丙二醛含量及某些保护酶活性的影响.植物病理学报,31:153-15626 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致谢时光如梭，总是不经意间从指缝中溜走，短短两年的研究生生活也伴随着毕业论文的提交接近尾声。随着论文的顺利完成我的心情也激动不已，个人的力量毕竟是有限的，若是没有大家的帮助，我也不可能完成我的毕业论文，在此，我要感谢：感谢我的导师张显老师。他为人热情随和，治学严谨。在论文的写作和措辞等方面他也总会以严格的标准要求我，在两年的学习生活中，张老师除了指导学业以外，还教会了我很多做人的道理。也正是张老师的无私帮助与热忱鼓励，我的毕业论文才能够得以顺利完成。谢谢张老师。感谢杨建强、马建祥、张勇、魏春华、李好老师，五位老师不仅在实验上给我极大的帮助，更在生活中给了我很多的关心，无论在实验中还是论文写作中遇到问题，五位老师都孜孜不倦，悉心指导，使我受益匪浅。感谢杨凌揉谷西甜瓜试验站负责人兼杨凌宇昊西甜瓜合作社的总经理张绩，在我的实践环节他给予很多帮助和指导，使我学习到了很多书本上学习不到或者很难掌握的田间实践经验。并教会我做人的道理，使我明白当代农业人该有的素质和专业技能。感谢杨瑞平师姐。从论文选题、定题开始，一直到最后论文的反复修改、润色，杨师姐始终认真负责地给予我深刻而细致地指导，帮助我开拓研究思路，精心点拨、热忱鼓励。对我的论文提出了诸多宝贵的意见和建议。在此对师姐的帮助表示真挚的感谢。感谢师弟王中元同学。炎炎夏日，骄阳似火，顶着将近四十度的棚内高温帮我统计数据；数九寒天，不拍寒风凛冽，帮我搬运苗子，他对我试验上的帮助起到了决定性的作用，除此之外，在我实验失败，惰怠懒散时，是他不离不弃的支持与帮助助我度过一次又一次的难关。这些感动我将永远铭记于心。感谢我的舍友，在我遇到失败挫折时，鼓励我，激励我不要放弃，失败乃成功之母，失败并不可怕，重要的是从哪里跌倒就从哪里爬起来，他们对我帮助使我终身受益。感谢实验室所有兄弟姐妹的帮助，特别是杨小振师兄和顾秀容师姐，是他们细心和耐心的指导，让我对试验有了更好的规划设计，使得试验顺利完成。最后，再次衷心感谢母校所有的老师、同学，以及我的亲人、朋友，是你们一路走来给与的不断支持和不断鼓励让我可以不畏挫折，努力坚持，让我从初到实验室的迷茫与困惑走到今天的沉着与自信。30 作者简介赵银平，女；出生于1990年4月；汉族；籍贯为陕西省宝鸡市；中共预备党员。2010年9月至2014年6月就读于西北农林科技大学园艺学院，专业为园艺，获得农学学士学位。2014年9月至2016年6月就读于西北农林科技大学园艺学院，为园艺专业农业推广硕士研究生，主要研究方向为蔬菜育种与栽培，导师为张显教授。31
