人转甲状腺素蛋白TTR酶联免疫分析

《人转甲状腺素蛋白TTR酶联免疫分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、人转甲状腺素蛋白(TTR)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T3μg/ml-80μg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中转甲状腺素蛋白(TTR)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人转甲状腺素蛋白(TTR)水平。用纯化的人转甲状腺素蛋白(TTR)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入转甲状腺素蛋白(TTR)，再与HRP标记的转甲状腺素蛋白(TTR)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝

2、色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的转甲状腺素蛋白(TTR)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人转甲状腺素蛋白(TTR)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（160μg/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献

3、进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。80μg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液40μg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液20μg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液10μg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品

4、稀释液5μg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。1.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。2.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用3.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，

5、拍干。4.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。5.温育：操作同3。6.洗涤：操作同5。7.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.8.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄