GBT 1741-1979 漆膜耐霉菌测定法.pdf

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1、中华人民共和国国家标准漆膜耐霉菌测定法GB1741-79(89)国家标准总局批准并发布1979-09-15批准1980-01-01实施本标准适用于漆膜耐霉菌性能的测定。一、一般规定1.材料和仪器设备无色玻璃试管:直径15毫米，长150毫米;无色玻璃培养皿:直径90毫米;三角瓶:50毫升、100毫升、500毫升、1000量筒:100毫升;量杯:500毫升;无色玻璃漏斗;不锈钢刀;试管架:20-40孔;酒精灯:150毫升;喷雾器:医用喉头喷雾器;马口铁板:15x40X0.2-0.3毫米;铝板:LY1

2、2,15X40X1一2毫米;保温箱:25一60r-;高压灭菌锅:1.4公斤握米2.天平:感量为0.001克;接种环:如图。3a4i2n,1-柄(圆木涂漆);2一杆(似-3毫米，粗铝线改制);3一不锈钥丝(直径。5-0.8毫米)‘4一不锈钢丝一端的小环2.试剂硝酸钱(GB659-77):化学纯;磷酸氢二钾(HGB3155-60):化学纯;氯化钾(G13646-77):化学纯;硫酸镁(GB671-77);化学纯;硫酸亚铁((一;B664-77):化学纯;蔗糖:绵白糖或白砂糖;琼脂;吐温80-聚经基乙

3、烯油酸山梨醇配;95%乙醇(GB679-65):化学纯。3.各种培养基及无菌水的制备(1)无基盐培养基(供检验样品用)的组成:434A酸按:】.5克;磷酸氢二钾:1.0克;氯化钾:0.25克;硫酸镁:0.5克;硫酸Ilk铁:0.002克;琼脂:15-20克(用量冬少夏多);水(pH值6.8一7.0):1000毫升。按上列组成配好的培养基，放在三角瓶中，盛放量为瓶深的1/2,塞上棉塞(棉塞要求松紧适中，深人瓶口内约3厘米，瓶外部分能握住，保持整洁)，用纸包住棉塞。放人高压灭菌锅中，在1.07一1.

4、1公斤刁里米z蒸汽压力下灭菌30分钟。待表压降至零时，开盖取出，稍凉就可趁热倒在培养皿中，培养基厚约5-7毫米。如当天不用，应将灭菌后的培养基存放在阴凉清洁处，用时再加热融化后倒人培养皿中，不能用培养皿盛放保存。(2)合成培养基(供培养霉菌用)的组成:硝酸钱:1.5克;磷酸氢二钾:1.0克;氯化钾:0.5克;硫酸镁:0.5克;硫酸亚铁:0.01克;蔗糖:30克;琼脂:15-20克(用量冬少夏多);水(pH值6.8一7.0):1000毫升。按上列组成配好的培养基放在三角瓶中，盛放量为瓶深的1/2，

5、加热使琼脂完全融化后，用漏斗装人试管内3厘米深(装时不要让培养基沾及管口O沾及可用湿纱布擦去)。塞上棉塞(棉塞要松紧适中，深入管内2厘米，管外留2厘米，保持整洁)，扎成一捆，用纸包住棉塞。然后放人高压灭菌锅中，试管必须直立，在1.07-1.1公斤沪健米z蒸汽压力下灭菌30分钟。待表压降至零时，趁热取出试管，分开斜放在横棍上，使培养基顶部保持在试管的中部(除棉塞外)，待其自然凉成冻后，存放阴凉清洁处备用。(3)麦芽汁培养基(供交替培养霉菌用)将啤酒厂取得的未加苦酒花的麦芽汁，用水冲稀至糖度表10度

6、，加人琼脂15一20克/升(用量冬少夏多)，加热使琼脂完全融化后，用漏斗装人试管〔详见方法(1)〕放人高压灭菌锅中，在0.7-0.8厘米“蒸汽压力下灭菌30分钟。待表压降至零时，趁热取出试管，分开斜放在横棍上，待其自然冷成斤月东后，存放阴凉清洁处备用。(4)马铃薯培养基〔供交替培养霉菌用，与麦芽汁培养基可任意选用)将新鲜马铃薯洗净去皮，用不锈钢刀切成长斜条，大小以能放人试管，斜块顶部保持在试管中部为宜，放人试管中。每管加1毫升水，塞上棉塞，扎成捆，用纸包住棉塞，放人高压灭菌锅中，在1.07-1.

7、1公斤刁里米z蒸汽压力下灭菌30分钟。待表压降至零时，趁热取出试管，放在阴凉清洁处备用。(5)无菌水用100份蒸馏水加0.005份分散剂(吐温80)配成无菌水，放在100毫升三角瓶中，盛435放量为瓶深的1/2，塞上棉塞，用纸包住棉塞。放人高压灭菌锅中，在1.07一1.1公斤刁更米2蒸汽压力下灭菌30分钟。待表压降至零时，取出后放阴凉清洁处备用。4.菌种及混合霉菌抱子(种子)悬浮液的制备(1)菌种:黄曲霉、黑曲霉、萨氏曲霉、土曲霉、焦曲霉、黄青霉、拟青霉、芽枝霉、毛壳霉、木霉。(2)菌种种植培养

8、先将接种环在酒精灯_t烧红金属丝部分，杀死被站污的杂菌，再放人消毒(含乙醇70-75%的酒精)瓶中冷却，酒精量以没过金属丝2/3处为宜。将新鲜培养基试管与老菌管并放在左手心上，由中央三指和掌心握住试管，先分别旋松两试管上的棉塞。右手用三指拿住接种环柄，自消毒酒精瓶中取出，并迅速使金属丝部分通过火苗，燎去酒精而不使环烧热。用右手小指和掌心同时夹住两管的棉塞，轻轻拔出。左手将试管微向上，靠近酒精灯火苗。右手接种环悬空伸人老菌管中，在菌种表面轻擦一下，环上就沾上霉菌抱子，再仔细地退出接种环，将近管口时