微生物工程考试复习资料

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1、筛选抗生素产生菌的方法？关键是？与哪些要求有关？筛选抗生素产生茵的方法包括抑菌圈法、稀释法、扩散法、生物自显影法等。在这些方法中，试验茵的选择是成功的关键，它直接与检出的灵敏性、抗茵素的活性的抗茵谱有关。除使用高灵敏度的试验茵外，采用专一性很强的筛选技术也可检出新的抗生素。主要是利用与生长素作用机制相关的酶、酶抑制剂、激活剂、抗体等建立起来的高灵敏度、专一的筛选技术。含微生物材料的标本采集的要求采集菌种标本遵循的原则是材料的来源要广泛，标本预处理的目的？提高菌种分离的效率自然选育的定义、原理？诱变育种的原理、方法理论基础。定义：不经人工处理，利用

2、微生物的自然突变进行菌种选育的过程叫自然选育。原理：多因素低剂量的诱变效应和互变异构效应。多因素低剂量诱变效应，是指在自然环境中存在着低剂量的宇宙射线、各种短波辐射、低剂量的诱变物质和微生物自身代谢产生和诱变物质等作用引起的突变。互变异构效应是指四种碱基第六位的酮基或氨基的瞬间变构，会引起碱基的错配。自然突变可能会产生两种截然不同的结果，一种是菌种退化面导致目标产物产量或质量下降；另一种是对生产有益的突变。为了保证生产水平的稳定和提高。应经常地进行生产菌种的自然选育，以淘汰退化的，选出优良菌种。诱变育种的理论基础是基因突变，突变主要包括染色体畸变

3、和基因突变两在类。诱变育种就是利用各种被称为诱变剂的物理因素和化学试剂处理微生物细胞，提高基因突变的频率，再通过适当的筛选方法获得所需要的高产优质菌种的育种方法。诱变育种一般包括诱变和筛选两部分，诱变成功的关键包括出发菌株的选择、诱变剂种类和剂量的选择，经及合理的使用方法。筛选部分包括初筛和复筛来测定菌种的生产能力。诱变育种是诱变和筛选过程的不断重复，进到获得高产菌株。基因工程的稳定性（提高稳定性的方法，质粒不稳定产生的原因）基因工程茵在传代中常出现质粒不稳定现象。质粒不稳定分为分裂不稳定和结构不稳定两种情况。质粒不稳定常见的是分裂不稳定，它主要

4、与两个因素有关：一是含质粒茵产生不含质粒子代的频率；二是这两种茵的生长速率差异的大小。工程菌的培养一般采用分成两阶段培养法来提高质粒的稳定性。第一阶段以增加菌体的生长达到一定密度为目的个源基因不表达；第二阶段再诱导外源基因表达。突变菌株的筛选方法？筛选营养缺陷型突变菌株是通过解除协同反馈调节，可使另一分支代谢途径中的末端产物积累。而是遗传障碍不完全突变是一种酶活性下降的突变，不是完全丧失活性，因此不会过量积累末端产物，可避免反馈调节作用，大量积累中间产物，这种突变菌株在不添加相应物质的莱西培养基上长成很小的菌落。抗反馈阻遏和抗反馈抑制突变菌株是通

5、过抗结构类似物突变的方法筛选出来的。也可从营养缺陷型的回复突变菌株获得抗反馈突变株。通过改变菌种的遗传特性筛选组成型突变株。微生物代谢类型和自我调节部位？许多化合物代谢的部位是受抑制的有哪些方法？微生物生长繁殖主要依赖两种代谢途径：分解代谢和合成代谢。分解代谢是从环境中吸收各种春风碳源、氮源等物质降解，为细胞的生命活动提供能源和小分子中间体。合成代谢是利用分解代谢的能量和中间估合成氨基酸、核酸等单体物质，及蛋白质、核酸、多糖等多聚物。微生物小分子物质的合成和降解是由其自我调节的。许多化合物的代谢部位是受到控制的，有三种控制方式。首先，细胞膜对大多

6、数亲水分子起一种屏障作用，但又存在着某些输送系统即通道。这些通道是输送某些化合物的系统，其中有些是需能的。它们受ATP的影响，并受透性酶的调节。其次，在原核生物有两种控制通量的方法，即调节现有酶量和改变酶分子的活性。对酶量的调节可以通过增加或减少关键酶的合成或降解速率进行。其三，限制基质的有形接近。酶激活作用与抑制作用（概念）酶的激活作用和抑制作用是机体内存在的两个矛盾着的过程，并且普遍存在于微生物生物的代谢中。酶的激活作用是指在某个酶促反应系统中，某种低分子质量的物质加入后，导致原来无活性或活性很低的酶转变为有活性或活性提高，使酶促反应速率提高

7、的过程。酶的抑制作用是指在某个酶促反应系统中，某种低分子量的物质加入后，导致酶活力降低的过程。酶活性调节的机制酶活性调节的机制研究得最清楚的是酶的变构理论和酶分子的化学修饰调节理论。某些物质能与酶分子上的非催化部位特异地结合，引起酶蛋白的分子构象发生改变，从而改变酶的活性，这种现象称为酶的变构调节或称别位调节。受这种调节作用的酶称为别构酶或变构酶，能使酶发生变构效应的物质称为变构效应剂;如变构后引起酶活性的增强，则此效应剂称为激活变构剂或正效应物；反之则称为抑制变构剂或负效应物。变构调节在生物界普遍存在，它是人体内快速调节酶活性的一种重要方式。酶

8、分子肽链上的某些基团可在另一种酶的催化下发生可逆的共价修饰，从而引起酶活性的改变，这个过程称为酶的酶促化学修饰(chemicalmodi