GB5413.31-2013食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中脲酶的测定.pdf

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1、中华人民共和国国家标准GB5413.31—2013食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中脲酶的测定2013-11-29发布2014-06-01实施GB5413.31—2013前言本标准代替GB/T5413.31—1997《婴幼儿配方食品和乳粉脲酶的定性检验》。本标准与GB/T5413.31—1997相比,主要变化如下:——修改了标准的名称;——增加了尿素溶液的贮存条件;——增加了纳氏试剂的贮存条件;——增加了判定结果的时限规定。IGB5413.31—2013食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中脲酶的测定1范围本标准规定了婴幼儿食品和乳品中脲酶的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中脲酶的定性检验

2、。2原理脲酶在适当酸碱度和温度条件下,催化尿素转化成碳酸铵。碳酸铵在碱性条件下生成氢氧化铵,与纳氏试剂中的碘化钾汞复盐作用生成棕色的碘化双汞铵。3试剂和材料注:除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水。3.1试剂3.1.1尿素(H2NCONH2)。3.1.2钨酸钠(Na2WO4·2H2O)。3.1.3酒石酸钾钠(C4H4O6KNa·4H2O)。3.1.4硫酸(H2SO4)。3.1.5磷酸氢二钠(Na2HPO4)。3.1.6磷酸二氢钾(KH2PO4)。3.1.7碘化汞(HgI2)。3.1.8碘化钾(KI)。3.1.9氢氧化钠(NaOH)。3.2试剂配制3.2.1

3、尿素溶液(10g/L):称取尿素5g,溶解于500mL水中。保存于棕色试剂瓶中,冰箱中冷藏,有效期为1个月。3.2.2钨酸钠溶液(100g/L):称取钨酸钠50g,溶解于500mL水中。3.2.3酒石酸钾钠溶液(20g/L):称取酒石酸钾钠10g,溶解于500mL水中。3.2.4硫酸溶液(50mL/L):吸取硫酸25mL,溶解于500mL水中。3.2.5磷酸氢二钠溶液:称取无水磷酸氢二钠9.47g,溶于1000mL水中。3.2.6磷酸二氢钾溶液:称取磷酸二氢钾9.07g,溶于1000mL水中。3.2.7中性缓冲溶液:取磷酸氢二钠溶液611mL,磷酸二氢钾溶液389mL,两种溶液混合均匀。3.

4、2.8碘化汞-碘化钾混合溶液:称取红色碘化汞55g,碘化钾41.25g,溶于250mL水中。1GB5413.31—20133.2.9纳氏试剂:称取氢氧化钠144g溶于500mL水中,充分溶解并冷却后,再缓慢地移入1000mL的容量瓶中,加入碘化汞-碘化钾混合溶液250mL,加水稀释至刻度,摇匀,转入试剂瓶内,静置后,用上清液。此试剂需棕色瓶保存,冰箱中冷藏,有效期为1个月。4仪器和设备4.1电子天平:感量为0.01g。4.2旋涡振荡器。4.3恒温水浴锅:40℃±1℃。5分析步骤取试管甲、乙两支,各称入0.10g试样,再吸入1mL水,振摇0.5min(约100次)。然后分别吸入1mL中性缓冲溶

5、液。向甲管(样品管)吸入1mL尿素溶液,再向乙管(空白对照管)吸入1mL水。两管摇匀后,置于40℃±1℃水浴中保温20min。从水浴中取出两管后,各吸入4mL水,摇匀,再吸入1mL钨酸钠溶液,摇匀,吸入1mL硫酸溶液,摇匀,过滤,收集滤液备用。取上述滤液2mL,分别吸入到二支25mL具塞的比色管中。再各吸入15mL水,1mL酒石酸钾钠溶液,和2mL纳氏试剂,最后用水定容至25mL,摇匀。5min内观察结果。6分析结果的表述分析结果按表1进行判断。表1结果的判断脲酶定性表示符号显示情况强阳性++++砖红色混浊或澄清液次强阳性+++桔红色澄清液阳性++深金黄色或黄色澄清液弱阳性+淡黄色或微黄色澄

6、清液阴性-样品管与空白对照管同色或更淡7检出限该方法为定性法,检出限为0.7U。2

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