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时间:2018-01-29
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1、第二章蛋白质一、课后习题1.用对与不对回答下列问题。如果不对,请说明原因。(1)构成蛋白质的所有氨基酸都是L型的。(2)当谷氨酸在pH4.5的醋酸盐缓冲液中进行电泳时,它将向正极移动。(3)如果用末端测定法测不出某肽的末端,则此肽必定是个环肽。(4)α-螺旋就是右手螺旋。(5)β-折叠仅仅出现在纤维状蛋白质分子中。2.已知Lys的ε-氨基的pK’a为10.5,问pH9.5时,Lys溶液中将有多少分数这种基团给出质子(即[-NH3+]和[-NH2]各占多少)?3.在强酸性阳离子交换柱上Asp、His、Gly和Leu等几种氨基酸的洗脱顺序如何?为什么?4.Gly、His、Glu和Lys分别
2、在pH1.9、6.0和7.6三种缓冲液中的电泳行为如何?电泳完毕后它们的排序如何?5.1.068g的某种结晶α-氨基酸,其pK1’和pK2’值分别为2.4和9.7,溶解于100ml的0.1mol/LNaOH溶液中时,其pH为10.4。计算该氨基酸的相对分子量,并提出可能的分子式。6.求0.1mol/L谷氨酸溶液在等电点时三种主要离子的浓度各为多少?7.向1L1mol/L的处于等电点的氨基酸溶液中加入0.3molHCl,问所得溶液的pH是多少?如果加入0.3molNaOH以代替HCl时,pH又将如何?8.现有一个六肽,根据下列条件,作出此六肽的氨基酸排列顺序。(1)DNFB反应,得到DN
3、P-Val;(2)肼解后,再用DNFB反应,得到DNP-Phe;(3)胰蛋白酶水解此六肽,得到三个片段,分别含有1个、2个和3个氨基酸,后两个片段呈坂口反应阳性。(4)溴化氢与此六肽反应,水解得到两个三肽,这两个三肽片断经DNFB反应分别得到DNP-Val和DNP-Ala。9.有一九肽,经酸水解测定知由4个氨基酸组成。用胰蛋白酶水解成为两个片段,其中一个片断在280nm有强的光吸收,并且对Pauly反应、坂口反应都呈阳性;另一个片段用CNBr处理后释放一个氨基酸与茚三酮反应呈黄色。试写出这个肽的氨基酸排列顺序及其化学结构式。10.一种纯的含钼蛋白质,用1cm的比色杯测定其消光系数ε0.
4、1%280。该蛋白质每毫升浓溶液含有10.56ugMo。1:50稀释该浓溶液后A280为0.375,计算该蛋白质的最小相对分子量(Mo的相对原子质量为95.94)。11.1.0mg某蛋白质样品进行氨基酸分析后得到58.1ug的亮氨酸和36.2ug的色氨酸计算该蛋白质的最小相对分子质量。12.某一蛋白质分子具有α-螺旋及β-折叠两种构象,分子总长度为5.5×10-5cm,该蛋白质相对分子质量为250000。试计算该蛋白质分子中α-螺旋及β-折叠两种构象各占多少?(氨基酸残基平均相对分子质量以100计算)。解析:1.(1)正确。(2)正确。(3)不正确,如N-末端测定中,有亚氨基酸,不宜用
5、此法。(4)错误,α-螺旋有右手和左手螺旋两种。(5)错误,不一定。382.1/11,10/11。3.洗脱顺序:Asp,Gly,Leu,His。在强酸性阳离子交换柱中,酸性氨基酸最先洗脱下来,中性氨基酸次之,最后为碱性氨基酸,分子量小的优先于分子量大的氨基酸。4.在pH1.9、6.0和7.6三种缓冲液中的电泳,其顺序均为:+Glu,Gly,His,Lys-。pH1.9时,四种氨基酸均带正电,电泳时向阴极移动;pH6.0时电泳,Gly基本不动,His,Lys带正电,向阴极移动,Glu带负电,向阳极移动;pH7.6时,His基本不动,Glu,Gly带负电,向阳极移动,Lys带正电,向阴极移
6、动;同时考虑分子的大小因素。5.相对分子量为89g/mol,可能为丙氨酸(Ala)。6.计算过程略,三种离子的浓度分别为:[Ao]=0.084M.,[A+]=[A-]=7.84×10-3M。7.加入0.3molHCl后pH变为2.71;用0.3molNaOH以代替HCl后pH变为9.23。8.六肽的氨基酸顺序为:(N)Val-Arg-Met-Ala-Arg-Phe。9.氨基酸排列顺序为:(N)Pro-Met-Arg-Tyr。10.根据A=KCL,已知相关数据代入得蛋白浓度C=1.25mg/mL,再利用蛋白质的最低相对分子质量=Mo的分子量×100/钼在该蛋白中的百分含量,计算得约11.
7、3kD。11.蛋白中Leu%=5.81%,Trp=3.62%;蛋白质中的Leu残基%=5.01%,Trp残基%=3.39%;蛋白质最低分子量M=某氨基酸的分子量/该氨基酸在蛋白中残基百分比,由此得MLeu≈6024,MTrp≈2618;nLeu:nTrp=5:2,求其最小公倍数,蛋白分子量约为12000。12.根据α-螺旋和β-折叠中相邻的两个氨基酸残基的距离分别为0.15nm和0.35nm,设α-螺旋和β-折叠各占x,y(残基数目),x+y=
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