代谢控制发酵试题1

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1、代谢控制发酵试题库1.脱敏作用：变构酶经特定处理后，不丧失酶活性而失去对变构效应物的敏感性。注：处理方法：①使变构酶解聚，②基因突变2．分解代谢物阻遏：当细胞具有一优先利用的底物（通常是，但并不总是葡萄糖）时，很多其他分解反应途径受到阻遏3.营养缺陷型：就是指原菌株由于发生基因突变，致使合成途径中某一步骤发生缺陷，从而丧失了合成某些物质的能力，必须在培养中外源补加该营养物质才能生长的突变型菌株。P32 最典型例子：高丝氨酸营养缺陷型（Hom﹣）或苏氨酸营养缺陷型（Thr﹣）菌株达到赖氨酸的积累4.平衡合成：底物A经分支合成途径生成两种终产物E与G，由于a酶活性远大于酶b,

2、结果优先合成E。E过量后就会抑制a酶，使代谢转向合成G。G过量后，就会拮抗或逆转E的反馈抑制作用，结果代谢流又合成E，如此循环。5.优先合成：底物A经分支合成途径生成两种终产物E与G，由于a酶活性远大于酶b,结果优先合成E。E过量后就会抑制a酶，使代谢转向合成G。G合成达到一定浓度时就会对c酶产生抑制作用。6.限量补充培养法：将经适当稀释的浓缩处理液涂布于含有微量蛋白胨或0.1%完全培养基成分的基本培养基平板上。经培养后，野生型细胞迅速生长成较大菌落，而缺陷型细胞生长缓慢只能形成小菌落。这些小菌落大多数为营养缺陷型，将其转接到完全培养基斜面保存待测。7.代谢互锁指从生物合

3、成途径来看，酶受一种与此代谢途径完全无关的终产物的控制，它只是在较高浓度下才发生，而且这种抑制(阻遏)作用是部分性的，不完全的。8.反馈抑制的调节类型可以分为以下几种：（1）单功能途径中酶活性的调节类型：①前体激活，②补偿性激活。（2）多功能途径中酶活性的调节类型：①协作反馈抑制或称多价反馈抑制②合作反馈抑制③积累反馈抑制④顺序反馈抑制⑤假反馈抑制：指结构类似物的反馈抑制⑥同功酶9.转导指利用转导噬菌体为媒介而将供体菌的部分DNA导入受体菌中，从而使受体菌获得部分遗传性状的现象。其中必须具有3个组成部分，即供体，转导噬菌体和受体10.代谢控制发酵：是指利用遗传学方法或其它

4、生物化学方法，人为地在脱氧核苷酸（DNA）的分子水平上，改变和控制微生物的代谢，使有用目的产物大量生成、积累的发酵。11.代谢控制发酵的基本思想：⑴切断支路代谢：①选育营养缺陷型突变株，②选育渗漏缺陷突变株。⑵解除菌体自身的反馈调节：①选育抗类似物突变株②酶活性的利用③营养缺陷型回复突变株的应用。⑶增加前体物的合成⑷去除终产物⑸特殊调节机制的利用：①多种产物控制机制的利用②平衡合成的利用③代谢互锁的利用④优先合成的变换。⑹条件突变株的应用⑺选育不生成副产物的菌株⑻选育生产代谢拮抗物质的菌株12.转化：转化就是指相当大的游离的供体细胞的DNA片段被直接吸收到受体细胞内，并整

5、合于受体细胞的基因组中，从而使受体细胞获得供体细胞部分遗传性状的现象。包括3个步骤，即供体DNA的制备，受体细胞对DNA的吸收及转化子的选择13.基本培养基：能满足野生型或原养型菌株的最低营养成分的培养基。15.诱变育种中的几个问题①出发菌株的选择：⑴出发菌株对诱变剂的效应，⑵染色体组倍数对诱变剂的效应。②细胞悬浮液的制备：⑴同步培养，⑵菌龄，⑶细胞悬浮液浓度，⑷细胞悬浮液的制备。③诱变剂的选择及处理方法的选择：⑴诱变剂的选择，⑵诱变剂量的选择，⑶诱变剂处理方法的选择。④中间培养16．代谢产物大量积累措施：①应用营养缺陷性菌株②选育抗反馈调节突变株③选育细胞膜通透性突变株

6、④利用营养缺陷性回复突变株或条件突变株的方法⑤构建目的工程菌株⑥环境控制机表面活性剂的使用。17.D-核糖发酵的代谢控制育种：①出发菌株的选择，②转酮酶缺陷突变株的分离：⑴选育不利用D-葡萄糖酸或L-阿拉伯糖的突变株，⑵选育莽草酸缺陷突变株，⑶选育L-色氨酸缺陷、L-酪氨酸缺陷、L-苯丙氨酸缺陷、CoQ缺陷、维生素K缺陷或叶酸缺陷突变株。③其他标记，④利用基因工程技术构建核糖工程菌株，⑤发酵控制。18赖氨酸发酵：①切断或减弱支路代谢，②解除反馈调节，③解除代谢互锁，④改善膜的通透性，⑤增加前体物的合成，⑥选育温度敏感突变株，⑦选育脲酶回复突变株，⑧利用基因工程技术构建赖氨

7、酸工程菌株19、谷氨酸发酵：①切断或减弱支路代谢，②解除自身反馈调节，③增加前体物，④提高细胞膜的渗透性⑤选育强化能量代谢的突变株⑥其他遗传标记⑦利用基因工程技术构建谷氨酸工程菌株。20、色氨酸发酵：①切断支路代谢，②解除自身反馈调节，③增加前体物，④切断进一步代谢，⑤利用基因工程技术构建色氨酸工程菌株，⑥其他标记。⑦利用细胞融合或转导的方法进行遗传重组可使产量提高。1.转化和转导都是将外源基因导入受体细胞的方法，只是受体存在差异。×，转导需要载体，而转化不需要载体。2.紫外线照射后的菌悬液，不能移至可见光下进行筛选和检出。√