实验二 葡萄糖注射液分析

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1、实验二葡萄糖注射液分析实验目的：1、掌握pH值测定原理和pH计的正确操作。2、掌握比旋度的概念、求算方法和旋光法测定旋光性物质含量的原理与计算。3、掌握剩余碘量法测定葡萄糖注射液的操作要点。4、了解注射液杂质检查的一般项目实验原理：[鉴别]取本品，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中即生成红色沉淀。[杂质检查]葡萄糖注射液在高温加热灭菌时，易分解产生5-羟甲基糠醛：利用5-羟甲基糠醛在284nm的波长处有吸收，而葡萄糖无吸收，将样品配制成一定浓度的溶液，在284nm的波长处测定，规定吸收度不得大于0.32来控制5-羟甲基糠醛的量[含量测定]1、采用旋光法测定葡萄

2、糖含量。根据测得供试品的旋光度与2.0852相乘，计算出葡萄糖在供试品中的百分比浓度和标示量的百分比.2、采用剩余碘量法测定葡萄糖含量。根据糖有还原性，与有氧化性的碘发生反应，剩余的碘用硫代硫酸钠回滴，从而计算糖的含量。实验器材：试药：氨试液、碳酸钠、碘化钾、碘滴定液（0.05mol/L）、2mol/L盐酸、硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）、淀粉指示剂、葡萄糖注射液。仪器：旋光度测定仪、小锥型瓶（100ml）、试剂瓶、酸式滴定管、烧杯、洗耳球、量筒。实验内容与方法：本品为葡萄糖或无水葡萄糖的灭菌水溶液。含葡萄糖（C6H12O6·H2O）应为标示量的95.

3、0%~105.0%。[鉴别]取本品，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。[检查] pH值应为3.2—5.5（附录A）。5-羟甲基糠醛精密量取本品适量（约相当于葡萄糖1.0g），置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，在284nm的波长处测定，吸收度不得大于0.32。重金属取本品适量（约相当于葡萄糖3g），必要时，蒸发至约20mL，放冷，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL与水适量使成25mL，置25mL纳氏比色管中。另取标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL后，加水稀释成25mL，置另一25mL纳氏比色管中。若供试液带颜色

4、，可在标准管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之与样品管颜色一致；再在两管中分别加硫代乙酰胺试液各2mL，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，样品管所显颜色与标准管比较，不得更深（见实验一附录C）。按葡萄糖含量计算，含重金属不得过百万分之五。[含量测定]1、旋光法（附录B）原理：葡萄糖分子中含不对称碳原子，具有旋光性，在一定条件下，其水溶液的比旋度[a]tD为＋52.5o～＋53.0o，根据旋光度与浓度C的比例关系可进行含量测定：式中L为液层厚度（dm），C为溶液的百分浓度（g/mL，按干燥品或无水物计算）。所以：方法：精密量取本品适量

5、（约相当于葡萄糖10g），置100mL量瓶中，加氨试液0.2mL（10%或10%以下规格的本品可直接取样测定），用水稀释至刻度，摇匀，静置10分钟，测定旋光度。用读数至0.01°并经过检定的旋光计，将测定管（长度为1dm）用供试液体冲洗数次，缓缓注入供试液体适量（注意勿使发生气泡），置于旋光计内检测读数，记录旋光度，同法读取旋光度3次，取3次的平均值作为样品的旋光度。与2.0852相乘，即得100mL供试液中含有C6H12O6.H2O的重量（g）。测定前用水校正零点，测定后再用水核对零点，若零点变动，应重测。2、剩余碘量法精密量取本品适量（约相当于葡萄糖75

6、mg），置于碘量瓶中，加水稀释至5ml，加含碳酸钠14.3%及碘化钾4.0%的缓冲溶液25ml，再精密加入0.05mol/L碘滴定液25ml，密塞，在20℃准确放置30分钟后，加2mol/L盐酸35ml，并立即用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点，加淀粉指示液，续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。实验注意事项：1、pH值测定时，每次更换标准缓冲液或供试液前，应用纯化水充分洗涤电极，然后将水吸尽，也可用所换的标准缓冲液或供试液洗涤。配制标准缓冲液与溶解供试品的水，应是新沸过的冷蒸馏水，其pH值应为5.5~7.0。  2、旋光仪接通电源后需

7、预热5～20分钟。每次测定前后应用溶剂作空白校正。配制溶液及测定时，均应调节温度至20℃±0.5℃（除另有规定外）。供试溶液应澄清，如显浑浊或含有混悬的小粒，应预先滤过，并弃去初滤液。旋光管装样时应注意光路中不应有气泡，使用后应立即用水洗净晾干，切勿用刷子刷，也不能用高温烘烤。3、用旋光度法测定葡萄糖的含量时，要加氨试液，是加速变旋作用，促进达到平衡，否则测得的旋光度数据不准。4、用剩余碘量法测定葡萄糖含量时，要在近终点时加入淀粉指示剂，过早加入，会使碘牢固被淀粉吸附，使终点延迟，产生误差。实验报告：实验结束后，书写实验报告。实验二、附录A．pH值测定法水溶

8、液的pH值应以玻璃电极为指示电极，氯化钾饱和甘汞电极