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《一株ⅹ型鸭疫里默氏杆菌gn52稳定性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、孙亚妮等:一株Ⅹ型鸭疫里默氏杆菌GN52稳定性的研究1055一株Ⅹ型鸭疫里默氏杆菌GN52稳定性的研究孙亚妮赵钦姜世金*张兴晓孔义波魏秀丽(山东农业大学动物科技学院泰安271018)摘要:选取鸭疫里默氏杆菌的一株地方分离株GN52,按照生长的最适条件,在马丁固体培养基上连续传代。分别选取第3代、第11代、第21代、第31代、第41代、第51代和第61代的细菌,对其进行染色镜检、生化试验、药敏试验及动物实验。结果表明,随着代次的增加,该菌株染色形态、生化特性及抗药性均未发生明显变化,但毒力有逐渐下降
2、的趋势。关键词:鸭疫里默氏杆菌,细菌,代次TheResearchonStabilityofanIsolateofRiemerrellaanatipestiferSUNYa-NiZHAOQinJIANGShi-Jin*ZHANGXing-XiaoKONGYi-BoWEIXiu-Li(TheCollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine,ShandongAgriculturalUniversity,Tai’an271018)Abstract:Theisolate
3、GN52ofRiemerrellaanatipestiferwaspassagedontheMartinMediumsuccessivelyaccordingtotheoptimumcondition.TheexperimentsincludedGramstaining,biochemicaltest,drugsensitivitytestandanimalexperimentswerecarriedoutonthebacteriaof3rd,11th,21st,31st,41st,51stand
4、61stgenerations.Itindicatedthatthebacterialmorphs,biochemicalcharacter,drugresistanceofthestrainhadnoobviouschange,butthevirulenceshowedatrendofreduction.Keywords:Riemerrellaanatipestifer,Bacteria,Generationhttp://journals.im.ac.cn/wswxtbcn孙亚妮等:一株Ⅹ型鸭疫
5、里默氏杆菌GN52稳定性的研究1055鸭疫里默氏杆菌病又称鸭传染性浆膜炎(infectiousserositis),是由鸭疫里默氏杆菌(Rieme-rrellaanatipestifer,RA)引起鸭的一种急性、接触性和败血性传染病。该病主要侵害2~7周龄各品种雏鸭,同时还可感染雏鹅、火鸡和多种其它鸟类,是目前造成养鸭业经济损失最严重的疾病之一[1]。目前对该病的控制主要是使用疫苗进行免疫接种,但是RA的血清型较多,各血清型之间没有交叉保护[2],这就要求使用的疫苗的抗原血清型必须与生产中流行菌株
6、的血清型一致[3]。目前,国内外尚无对RA菌株稳定性的研究报道,本研究选取一株RA广东优势血清型菌株GN52,对该菌株的不同代次进行了系统的研究。1材料与方法1.1实验菌株对来自广东疑似鸭疫的病料的鸭脑按照常规无菌操作进行细菌分离、纯化,并采用革兰氏染色、培养基筛选、动物回归及PCR方法[4]鉴定为RA,http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn孙亚妮等:一株Ⅹ型鸭疫里默氏杆菌GN52稳定性的研究1055命名为GN52,血清型鉴定为10型。1.2实验动物1d龄健康樱桃谷雏鸭
7、,购自山东博大种鸭场,在滨州沃华生物工程有限公司标准化实验动物房严格饲养至2周龄。1.3培养基与试剂加有2％~3％新生牛血清的马丁固体培养基和改良马丁肉汤,由本研究室自行制备;药敏纸片购自北京天坛药物生物技术开发公司,微量生化反应管购自杭州天和微生物试剂有限公司。1.4不同代次菌株的准备将纯化好的第2代GN52,按照常规细菌传代方法在加有2％~3％新生牛血清的马丁固体培养基上进行连续传代,37℃烛缸培养18h~24h。将第2代、第10代、第20代、第30代、第40代、第50代和第60代细菌用15％
8、灭菌甘油保存至-20℃冰箱备用。将上述代次冻存的细菌用加有2％~3％新生牛血清的马丁固体培养基同时复苏,37℃烛缸培养24h~48h,然后将各代菌株按照常规传代方法各传1代,37℃烛缸培养18h~24h。用灭菌的0.01mol/LPBS(pH7.0)分别将第3代、第11代、第21代、第31代、第41代、第51代、第61代的细菌洗下,调整其浓度为106CFU/mL(OD600值为0.04~0.05),备用。1.5细菌形态观察将上述7个代次的GN52菌株按照革兰氏染色的常规方法进行染色
