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1、應微生物科技研究室SOP計畫–孟洲撰寫2006/12/8pHmetter快速使用說明(廠牌PHM210,Radiometter,2006/12/7購買尚偉44,000-)ì每個月會校正一次,請留意校正日期。(校正後的訊息會被貯存下來)ìpH及溫度電極,皆為玻璃製品,請小心使用(電極一支8000)。ì使用後,請將pH電極保存於3MKCl(aq)ì該電極為一般性電極,禁止測定高黏度(會塞住)樣品。測定pH流程確認電極本身沒問題恢復電極原本狀態將電極放到sample內,開始測定Step1.確認pH電極已經過校正,以及兩點校正的
2、範圍Ü待測樣品的pH值,需落在兩點校正的範圍內。如sample的pH值約5.0,則兩點校正的pH範圍應選擇pH4-pH7,若為pH9.0,則需使用pH7–pH10。Step2.確認pH電極內的KCl(aq)高度,並解開堵住的小孔(用來堵住的東西,不要弄丟了!)ÜKCl(aq)高度跟小孔的距離,保持在0.5-1.0cmÜ堵住的小孔若沒打開,pH電極裡的KCl(aq)無法下降,測定值會有問題。Step3.將pH電極及溫度電極放入sample裡,並適當攪拌sampleÜ僅需要將pH電極的「圓頭」浸泡在sample內,不用整支浸
3、入。Ü溫度電極也是一樣,將白色的前端與sample接觸即可。Step4.讀取數據(分為人工判讀及自動讀取兩種,按「ü」鈕可切換)人工判讀:會依序出現“”、“S”、“ST”、“STA”、“STAB”STAB完整出現,表示已達到穩定要求(~0.05Ph/min)自動讀取:放入電極之後,按下「ü」鈕。若使用Autoread(自動讀取)功能,則訊號穩定時,就會將結果鎖定在螢幕上,如下:RESULT10.62pH22.1若3min內尚未穩定,則會出現下列訊息(多了一個ì):RESULTì10.62pH22.1Step5.保養電極Ü
4、以RO水沖洗電極後,以拭鏡紙吸乾(用擦的會有靜電),浸泡在3MKCl(aq)裡。記得pH電極的小孔,要再重新堵住(否則會KCl(aq)乾掉)Ü溫度電極經過RO水沖洗後,以拭鏡紙吸乾,再蓋上蓋子(以避免撞到)應微生物科技研究室SOP計畫–孟洲撰寫2006/12/8注意事項1.測定pH值,pH電極與溫度電極需一併放到樣本溶液裡;不同溫度,所測得的pH值會不同,所以要作溫度補償。2.pH電極並非是所有溶液都可以測的,當數值大幅度跳動,顯示待測溶液並不適合用此電極來測定pH值。3.pH電極的保養:(當你測定很髒的樣本後,可進行下
5、列步驟)(1)首先以1NHCl(aq)浸泡,除去卡在電極半透膜的雜質。ì一般浸泡3min後,再以R.O.水沖掉HCl(aq),若電極太髒則可浸泡5min。ì若以HCl浸泡仍無法改善,可改用aceton浸泡。(最後的手段,用完之後,電極也差不多要換了)(2)接著將電極浸泡在pH4.01的Buffer中,使電極內離子正常的移動(約放置一個晚上)。(3)最後將電極浸泡在3M的KCl(aq)內。校正1.將pH及溫度電極以RO水清洗,並以拭鏡紙將水吸乾。2.將校正用的標準液倒至燒杯內(僅使用一次,不再重覆使用)Ü需使用與sampl
6、e相近的pH值,進行二點校正。Ü若不是使用radiometer的標準液,則需更改機器的內部設定值(參考操作手冊)。3.按CAL鍵開始校正;此時LCD會出現前一次校正的資料。4.按「ü」鍵後會出現機器目前所設定的標準液種類。5.再按一下「ü」鍵,當DipElectrodeinBuffer1顯示在LCD上,將電極放入第一種標準液內,電極需浸在適當的深度,而且需要「加以適當攪拌」,然後再按「ü」鍵。Ü會自動判斷「pH標準液」的pH值,不一定要先用pH7.0來校正。Buffer1:7.01DipinBuf.26.此時LCD會顯示
7、pH讀值及STAB穩定指示,開始進行校正。若訊號穩定後,則出現如下畫面:7.接著進行第二種標準液的校正。清洗電極後,再浸泡在第二種標準液內,按下「ü」鍵。當訊號穩定後,會出現校正結果,若校正錯誤,也會在此時出現。Buffer2:10.01PHo6.9299.7%6.92為零點電位(約在7.00附近),99.7%為感度(需在95-105%之間)若感度超出正常值,則需做電極的保養。這也表示電極已經老化。8.按下「ü」鍵,則會回到pH則定模式下。應微生物科技研究室SOP計畫–孟洲撰寫2006/12/8適當的電極保養可確保ì更快
8、速的反應ì更可信的測量ì更長的壽命一、玻璃電極1.玻璃表面必需永遠保持乾淨。2.做水溶液測量時,先用蒸餾水充分沖洗。3.若測量物中含有脂質或蛋白質則需要強烈些,較溫和可用0.1MNaOH來清洗電極,較強烈的可用0.1MHCL來清洗電極。4.電極暫時不用時(兩次實驗之間)玻璃電極應存放在蒸餾水或弱酸緩衝液中。5.長期使
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