浅谈血脂检验现状和标本采集和处理

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1、浅谈血脂检验现状和标本采集和处理　　血脂检验对于临床高脂血症和异常脂蛋白血症的诊断及动脉粥样硬化﹙AS﹚性心血管﹙如冠心病﹚的危险评估和防治具有重要意义，并已经渗透应用于其它诸多临床相关专业疾病的研究。我国血脂、脂蛋白及其与AS关系的研究虽然起步较晚，但改革开放的20多年以来，在血脂的基础与临床研究等方面发展迅速。血脂检验及其临床应用已越来越受到临床各学科的重视。本文旨在探讨血脂检验的方法学，试剂的选择原则与血脂测定的技术指标，分析前的变异对血脂检验结果的影响进行浅析。1血脂检验的方法学临床血脂检验主要包括血清总胆固醇﹙TC﹚、

2、甘油三酯﹙TG﹚、高密度脂蛋白胆固醇﹙HDL-C﹚、低密度脂蛋白胆固醇﹙LDL-C﹚、载脂蛋白A1、载脂蛋白B、脂蛋白﹙a﹚测定。1.1血清TC测定血清TC测定一般可分为化学法和酶法两大类。目前国内建议酶法如胆固醇氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法作为临床实验室测定TC的常规方法。1.2血清TG测定5二氯甲烷-硅酸-变色酸法是美国疾病预防与疾控中心﹙CDC﹚测定TG采用的参考方法。建议酶法〔如甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶-4氨基安替比林和酚法〕作为临床实验室血清TG的常规方法。1.3血清HDL-C测定超速离心结合ALBK法

3、为HDL-C测定的参考方法。建议匀相测定法作为临床实验室测定血清HDL-C的常规方法。1.4血清HDL-C测定超速离心结合ALBK法为LDL-C测定的参考方法。建议匀相测定法作为临床实验室测定血清LDL-C的常规方法。1.5血清apoA1和apoB测定目前尚无公认的血清apoA1和apoB测定的参考方法。建议免疫浊度法作为临床实验室测定血清的常规方法。1.6血清Lp﹙a﹚测定目前尚无公认的血清Lp﹙a﹚测定的参考方法。建议免疫浊度法作为临床实验室测定血清Lp﹙a﹚的常规方法。2血脂检验试剂的选择原则与测定的技术指标2.1不精密度

4、与不准确度各实验室进行血脂检验并非要求统一的测定方法，而是要求对同一批标本血脂测定值取得基本一致，卫生部检验中心及各省检验中心均要求各县级医疗单位实验室参加其组织的室间质评活动。要求测定值在可允许的”不精密度”﹙用变异系数CV表示﹚及不准确度﹙用偏差表示﹚范围内。对于TC、TG、HDC-C和LDCL-C54项，建议不精密度应分别不大于3%、5%、4%、4%，不准确度应尽量分别不大于±3%、±5%。±5%、±4%。对于apoA1、apoB和Lp﹙a﹚3项，建议不精密度应分别不大于3%、3%和4%，不准确度应分别不大于±5%、±5%

5、和±10%。2.2灵敏度酶法测定血清TC显色剂用酚时，TC5.17mmoL∕L时的吸光度约0.30～0.35，故A500nm=0.005时的TC浓度约0.08nmol/L.酶法测定TG灵敏度为2mmol/LTG的吸光度A500nm≧0.2.匀相测定法测定HDL-C、LDL-C时，最小检测水平至少为0.01mmol/L。免疫浊度法测定血清apoA1、apoB检测下限至少为0.5g/L，Lp﹙a﹚至少为5mg/L。2.3可检测上线酶法测定血清TC血清与酶试剂用量之比为1：100时，测定上线为13mmol/L。酶法测定TG线性至少应达

6、11.3mmol/L。匀相测定法测定HDL-C、LDL-C时线性至少分别应达2.59mm/L和7.77mmol/L。免疫浊度法测定血清apoA1、apoB线性至少不低于2.0g/L，Lp﹙a﹚至少应达800mg/L。2.4干扰因素5酶法测定TC时，血红蛋白高于2g/L会引起正干扰，胆红素﹥0.1g/L时有明显负干扰。酶法测定TG干扰因素与胆固醇测定类同。胆红素﹥100umol/L时出现负干扰。血红蛋白的干扰是复杂的。它本身的红色会引起正干扰，溶血后，红细胞中的磷酸酶可水解磷酸甘油产生负干扰。当Hb﹤1g/L时反映为负干扰，Hb﹥

7、1g/L时反映出正干扰，但Hb≤2g/L时干扰不显著。明显溶血标本不宜作TG测定。TG﹤5.65mmol/L、胆红素﹤513umol/L、Hb﹤5g/L时，对匀相测定法测定HDL-C、LDL-C，免疫浊度法测定血清apoA1、apoB和Lp﹙a﹚测定结果基本无干扰。2.5试剂稳定性干粉试剂未开瓶2～8℃应至少稳定1年。复溶后的胆固醇和TG酶试剂在2～8℃应至少稳定两天。在此期间出现肉眼可辨的粉红色建议不要使用。液体试剂未开封的试剂盒在2～8℃应至少稳定6个月，开封后应至少可保存1个月。2.6反应速度酶法测定血清TC反应到达终点3

8、7℃不应超过5min。酶法测定TG37℃不应超过10min.匀相测定法测定HDL-C和LDL-C反应到达终点时间37℃不应超过10min。免疫浊度法测定血清apoA1、apoB和Lp﹙a﹚可根据自动分析仪反应曲线确定读取终点时间，一般以8～10min为宜。3样本