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时间:2021-04-25
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1、.....................最新资料整理推荐.....................分枝杆菌属及检验 分枝杆菌属是一类细长或略带弯曲、为数众多(包括54个种)呈分支状生长的需氧杆菌。因其繁殖时呈分支状生长故称分枝杆菌。本属细菌的主要特点是细胞壁含有大量脂类,可占其干重的60%,这与其染色性、抵抗力、致病性等密切相关。耐受酸和抗乙醇,一般不易着色,若经加温或延长染色时间而着色后,能抵抗3%盐酸乙醇的脱色作用,故又称抗酸杆菌。需氧生长,无鞭毛,无芽胞和荚膜。引起的疾病均为慢性,有肉芽肿病变的炎症特点。 分枝杆菌的种类较多,包括结核
2、分枝杆菌、非典型分枝杆菌和麻风分枝杆菌。非典型分枝杆菌是一大群分枝杆菌的总称,与人类有关的非典型分枝杆菌主要有堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌、戈分枝杆菌、鸟分枝杆菌、蟾分枝杆菌、龟分枝杆菌、偶发分枝杆菌和耻垢分枝杆菌等。本属细菌无内外毒素,其致病性与菌体某些成分如索状因子、蜡质D及分枝菌酸有关。 根据国际分枝杆菌分类研究组(IWGMT)的方案将本属细菌分为三类,即缓慢生长菌、迅速生长菌和不能培养菌。 一、结核分枝杆菌 在我国引起人类结核病的主要有人型和牛型结核分枝杆菌。 (一)生物学特性 1.形态与染色结核分枝杆菌为细
3、长或略带弯曲的杆菌。在培养基中可呈球状或丝状,陈旧培养物或干酪化的淋巴结中可见到分枝状。抗酸染色时因菌体含有大量脂类而不易着色,无论是否经碘液处理,着色后均不易被盐酸乙醇脱色,所以使菌体呈红色。本菌无芽胞、无鞭毛,近年发现有荚膜。6.....................最新资料整理推荐..................... 2.培养特性本菌专性需氧,在无氧条件下迅速死亡,在5%~10%CO2环境中可刺激其生长。烛缸不适合本菌培养,需用二氧化碳培养箱。培养温度适应范围较大,35~40℃均可生长,最适温度为35~37℃。最适pH为6.5~6
4、.8。兼性胞内寄生菌,在细胞内外均可发育繁殖,强毒株可长期生存于巨噬细胞内。生长时还需适当的湿度。本菌生长缓慢,最快的分裂速度为18小时一代。 在固体培养基上,一般需2~6周才能长出菌落。菌落呈干燥颗粒状,不透明,乳白色或米黄色,表面呈皱纹状,形似菜花。在液体培养基中生长较快,多为表面生长,形成菌膜,且干燥易碎而沉于管底。此种特性与菌体的疏水性有关。若在液体培养基中加入乳化剂聚山梨酯-80,则呈均匀分散生长。有毒力菌株在液体培养基中可呈索状生长,无毒株则无此现象。 结核分枝杆菌营养要求较高,必须在血清、卵黄、马铃薯、甘油以及某些无机盐类的
5、特殊培养基上才能生长。但经多次传代或长期保存的菌种,也能在营养较简单的培养基中生长。 3.生化反应各型结核杆菌均不发酵糖类,能产生过氧化氢酶,耐热触酶试验、聚山梨酯-80水解试验和耐热磷酸酶试验均为阴性,脲酶试验和中性红试验均为阳性。人型结核分枝杆菌烟酸试验、硝酸盐还原和烟酰胺酶试验均为阳性,借此可与牛型结核分枝杆菌鉴别。 (二)临床意义 1.致病性结核分枝杆菌主要通过呼吸道、消化道和受损伤的皮肤侵入易感机体,引起多种组织器官的结核病,其中以通过呼吸道引起的肺结核最多见。6.....................最新资料整理推荐....
6、.................肺部感染可分为原发性感染和继发性感染。肺外感染可发生在脑、肾、肠及腹膜等处。该菌不产生内毒素和外毒素和侵袭性酶。可在细胞内、外生长与大量繁殖,致病物质主要是荚膜、脂质、蛋白质。机体对菌体成分和其代谢产物引起免疫损伤以及变态反应,从而导致一系列组织学上的病理变化。 2.Koch现象结核的特异性免疫是通过结核分枝杆菌感染后所产生,试验证明,将有毒结核分枝杆菌纯培养物初次接种于健康豚鼠,不产生速发型过敏反应,而经10~14天,局部逐渐形成肿块,继而坏死,溃疡,直至动物死亡。若在8~12周之前给动物接种减毒或小量结核分
7、枝杆菌,第二次接种时则局部反应提前,于2~3天内发生红肿硬结,后有溃疡但很快趋于痊愈。此现象为Koch在1891年观察到的,故称为Koch现象。 3.结核菌素试验利用Ⅳ型变态反应的原理,检测机体是否感染过结核杆菌。 (三)微生物检验 1.标本采集根据感染部位的不同,可采集不同标本。结核患者各感染部位的标本中大多都混有其他细菌,为此应采取能抑制污染菌的方法。若作分离培养,必须使用灭菌容器,患者应停药1~2天后再采集标本。可采集痰、尿、粪便、胃液、胸水、腹水、脑脊液、关节液、脓液等。 2.检验方法 (1)涂片检查 直接涂片包括:
8、 1)薄涂片:挑取痰或其他处理过的标本约0.01ml,涂抹于载玻片上,用萋-尼氏染色(热染法)或Kinyoun(冷染法)抗酸染色,镜检
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