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1、医学论文PPT主要内容第二章材料与方法第三章结果第四章附图第五章讨论第一章前言第六章结论2第一章前言前言3其发病机制至今尚未阐明,且复发率高,治疗棘手,国内外妇产科学者一直在努力探索其发病机制,以利于这一疾病的治疗而成为妇产科医学研究的热点和难点。前言7內异症发病机制现有学说內异症诱导学说免疫学说子宫内膜种植学说其他学说体腔上皮化生学说3A模式学说淋巴及静脉播散学说前言8“3A模式学说”:月经期返流的子宫内膜需要黏附(Attachment)、侵袭(Aggression),并诱导新生血管形成(Angiogenesis),最终发展成为

2、有临床症状的疾病。前言生根生病生长內异症9前言“免疫学说”认为:内异症是一种自身免疫性疾病,机体免疫功能逐渐减退,子宫内膜细胞如同肿瘤细胞一样可能发生免疫逃逸,对异位内膜细胞的特异性免疫减弱,免疫监视、清除异位细胞能力下降,使异位内膜得以存活、增殖并导致局部纤维增生、粘连。10前列腺生殖组织非生殖组织脑胎盘子宫内膜胰腺肾脏骨髓睾丸垂体肝脏肾上腺ActivinA(激活素A)是一种主要由性腺分泌的大分子糖蛋白,属于转化生长因子β(TGF-β)超家族球蛋白成员。ActivinA存在于前言卵巢11粘附性↑ActivinA纤维连接蛋白,结缔

3、组织生长因子↑侵袭性↑ActivinA上皮型钙粘蛋白↓,MMP-2、3、7、9和白血病抑制因子↑ActivinA促进增殖促进血管形成前言12内异症是具有类似恶性肿瘤的生物学行为的良性病变,子宫内膜细胞的粘附、侵袭、增殖能力及血管形成对內异症的发病具有极其重要的作用,ActivinA虽具有以上生物学作用,但是目前国内外关于ActivinA的研究主要集中在PCOS、子痫前期、卵巢肿瘤等妇产科疾病和内科的纤维增生性疾病,而其在內异症方面的研究并不多,仅国外少数学者有研究,国内尚无內异症方面的研究。前言13前言InhibinA(抑制素A)

4、与ActivinA一样,同是大分子糖蛋白,也属于转化生长因子β(TGF-β)超家族球蛋白成员。14最初对其生物学作用的认识是反馈性抑制垂体FSH的分泌并影响卵泡的生长发育,后来发现其也具有生长因子样作用,在组织再生中调控组织细胞的生长和分化,而且InhibinA在细胞免疫中也起作用。而InhibinA在内异症方面的研究,虽国外已有报道,但国内尚处于空白阶段。前言15二者在內异症的表达如何?是否对內异症的发生发展起作用?二者是否存在相互关系?都值得我们研究和探讨。?前言16研究目的前言17免疫组化SP法检测ActivinA和Inhi

5、binA蛋白在內异症组异位内膜、在位内膜及对照组正常子宫内膜中的表达。探讨ActivinA和InhibinA在內异症发病中的作用及相互关系。前言18第二章材料与方法材料与方法19各组患者年龄无统计学差异,月经周期规则,无其他内分泌、免疫及代谢性疾病,术前6个月内未接受激素治疗。异位内膜(32例)在位内膜(32例)增生期16例分泌期16例增生期18例分泌期16例增生期16例分泌期16例输卵管吻合术、不孕症(输卵管因素)、卵巢囊肿。正常内膜(34例)研究对象Ⅰ~Ⅱ期11例,Ⅲ~Ⅳ期21例材料与方法对照组实验组20主要仪器普通光学显微镜

6、TGW16高速微型离心机DR28429精密可调微量移液器微波炉BL-220H电子天平4℃冰箱LGE-10-400H超纯水机盖玻片载玻片移液器管咀塑料修复盒材料与方法21主要试剂即用型封闭用兔血清即用型封闭用羊血清浓缩型羊抗人ActivinA多克隆抗体即用型兔抗人InhibinA多克隆抗体浓缩型兔抗羊IgG-HRP即用型羊抗兔IgG-HRP辣根酶标记链霉卵白素工作液AEC显色试剂盒苏木素甘油明胶30%过氧化氢柠檬酸缓冲液EDTA抗原修复液二甲苯无水乙醇松节油无水磷酸氢二钠氯化钾磷酸二氢钾氯化钠材料与方法22组织切片切片常规脱蜡至水化

7、滴加3%H2O2室温10分钟滴加封闭用血清工作液,室温10-15分钟,倾去,勿洗高压抗原修复滴加一抗工作液,4℃过夜滴加二抗工作液,室温10-15分钟AEC显色剂显色,苏木素复染封片镜检滴加辣根酶标记链霉卵白素工作液,室温10~15分钟实验步骤材料与方法23染色强度无着色0浅着色1中等着色2强着色3阳性细胞数<5%05-10%111-50%2>50%3免疫组化积分+免疫组化结果判定=ActivinA和InhibinA蛋白的阳性信号均为细胞浆内出现红色颗粒,用已知阳性片作阳性对照,PBS代替一抗作阴性对照。材料与方法24统计分析材料

8、与方法实验数据运用SPSS17.0统计软件进行统计分析,计量资料采用均数±标准差表示,先进行正态性检验符合正态分布的两组间的均数比较采用两样本t检验,多组间的均数比较采用单因素方差分析(One-wayANOVA),两测量指标的相关性采用pearso

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