最新全盟自愿咨询检测培训班概要PPT课件.ppt

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1、全盟自愿咨询检测培训班概要HIV实验室诊断方法病原学检测血清抗体检测靶细胞的检测病毒载量检测特异性实验诊断HIV抗体测定抗原测定核酸测定病毒分离CD4淋巴细胞计数酶联免疫吸附试验（ELISA）如果待测血浆中出现HIV抗体，则它会与固定于试验孔内的HIV抗原以及随血浆加入的同类酶联抗原形成夹心;试验孔经过彻底洗涤后除去未结合的酶。加入一种显色剂；结合形式的酶会催化显色反应；血浆中出现的抗体就会由于颜色变化而被显示出来ELISA酶联免疫吸附实验ELISAEnzymelinkedimmunosorbentassayHIV抗原包被平板病人抗体显色剂酶+ve-ve对照阴

2、性阳性?结果ELISA平板（PA）检测的基本原理检测HIV1/2抗体的体外诊断试剂将重组HIV-1抗原(HIV-1/gp41和HIV-1/P24)和HIV-2抗原（HIV-2/gp36)包被在人工载体明胶粒子上这些致敏粒子和血中的HIV-1抗体或HIV-2抗体发生凝集反应，由此可以检测出血清和血浆中的HIV-1/2的抗体（PA）检测结果的判定金标法（胶体硒法）基本原理本HIV1/2快速测试试剂是用一种免疫层析法原理定性测定血样中HIV1/2抗体样品层析迁移到硒胶体-抗原结合物包被处，与之相结合，此结合物继续迁移通过固相包被的合成肽和重组抗原的病人结果窗口金标法

3、（胶体硒法）结果判定快速诊断试验（RT）RapidTests优点:操作快;不需定量;不需专门设备和人员培训;同一天出结果。为保证试验质量必须用WHO推荐的快速HIV抗体试验。免疫印迹实验（WB）WesternBlotAssay检测血浆中能与各种的病毒蛋白反应HIV抗体；不同的病毒蛋白根据其分子量不同在电泳凝胶上被分成不同的条带；然后将这些蛋白质转移或点到硝酸纤维膜上，与病人血浆共同孵育。HIV抗体与特异抗原蛋白反应，并结合到纤维膜目标蛋白移动的相同位置上；用测色技术检测结合的抗体。不同情况下的抗体试验AnAssayforEveryOccasion抗体试验选择视

4、具体情况而定，主要取决于三个因素：试验目的；试验的灵敏度和特异度;检测人群中HIV感染率。HIV抗体检测的目的HIV抗体检测可用于监测、诊断、血液筛查。以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势而进行的检测，检测的人群包括各类高危人群和一般人群。以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感染状况而进行的检测，包括临床检测和自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体检等。以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIV而进行的检测，包括献血员筛查和原料血浆筛查。明确HIV抗体检测的要点1筛查试验阳性不能出阳性报告。2严格遵守实验室标准操作程序（SOP

5、）。3严格按照试剂盒说明书操作。4注意防止样品间交叉污染。试验特征TestCharacteristics每一个生物学试验都有可能产生假阳性和假阴性结果；生物学试验的精确度可用三个指标来描述:灵敏度；特异度；预测值。灵敏度、特异度灵敏度是一个试验检出真阳性的能力；高灵敏度的试验很少产生假阴性结果；高灵敏度的试验用于绝对避免假阴性结果的情况，如输血服务。特异度一个实验检出真阴性能力；高特异度的实验很少产生假阳性结果；高特异度的实验用于绝对避免假阳性结果的情况，如个体的HIV感染的诊断。预测值PredictiveValue一个具体试验准确地测定个体感染HIV可能性随

6、着人群HIV感染率的不同而变化。假阴性结果在低流行人群中少见；假阳性结果在高流行区域少见；假阴性结果在高流行区域常见；假阳性结果在低流行区域常见。数学表达MathematicalexpressionHIV真实状况+-检测结果+aba+b真阳性假阳性-cdc+d假阴性真阴性a+cb+d灵敏度=a/a+c阳性预测值=a/a+b特异度=d/b+d阴性预测值=d/c+dWHO推荐的灵敏度和特异度的最低标准分别是99%和95%。检测策略TestingStrategies首选敏感性高的试剂主张重复检测所有阳性结果，尽可能避免假阳性产生；必须权衡重复HIV检测在准确度方面的

7、收益与增加的成本；系列试验和平行试验SerialVersusParallelTesting系列试验（最常见）：第一次试验用高灵敏度的试验以减少假阴性结果；第二次试验在第一个试验为阳性时才做平行试验：进行两个抗体的检测；两个试验的靶抗原和原理不同；一个试验高度灵敏，而另一试验高度特异。平行试验的优缺点平行试验的优点：降低高感染率人群假阴性结果风险；只需一次指尖取血；二个试验比一个试验的感觉好；降低病人被叫回做第二次试验的耻辱感。缺点：费用高HIV快检程序框图SerialHIVrapidtestingschema第一次检测/筛查实验：高灵敏度阴性检测结果报告阴性

8、结果检测后咨询包括讨论窗口期和6周后重