最新]病毒学总论解读教学讲义ppt课件.ppt

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1、]病毒学总论解读病毒(virus)的发现1892年发现第一个病毒即烟草花叶病毒1898年发现动物口蹄疫病毒首先被证实对人类有致病性的是黄热病毒（1901年发现）病毒的特点：1、体积微小，必须用电子显微镜观察；2、只有一种遗传物质；3、必须在活细胞内显示生命活性；4、无完整的细胞结构。1、测量单位——纳米（nm）3、观察工具——电子显微镜2、大多数病毒的直径小于150nm一病毒的大小与形态葡萄球菌1000nm立克次体450nm衣原体390nm痘苗病毒300×250nm烟草花叶病病毒100nm流感病毒40nm乙

2、脑病毒30nm脊髓灰质炎病毒70nm腺病毒65×95nm噬菌体病毒的形态：多为球型，还有杆状、子弹状、砖块状及蝌蚪状等。1、病毒核酸(1)化学成分为DNA或RNA，据此将病毒分DNA病毒和RNA病毒。(2)核酸可线型或环型、分单股或双股，一般DNA病毒为双股，RNA病毒为单股；大小相差悬殊。(3)携带病毒的全部遗传信息，是病毒的基因组，控制病毒的生殖、遗传和变异。2、病毒衣壳：由多肽构成的壳微粒组成，有三种排列方式：螺旋对称立体对称复合对称3、病毒包膜包膜子粒、刺突包膜（envelope）:包绕在核衣壳外，

3、上常有刺突（spike），是病毒的表面抗原。包膜4、病毒的蛋白质结构蛋白：是组成病毒体的蛋白成分，可离心沉淀后分离纯化。（1）衣壳蛋白：（2）基质蛋白：（3）包膜蛋白：非结构蛋白：可存在于病毒体内也可仅存在于宿主细胞内。（1）病毒内所有的重要的酶类；（2）抑制宿主细胞生物合成或抑制病毒抗原经MHC递呈的蛋白；（3）转化宿主细胞的作用；（4）抗细胞因子或抗细胞凋亡作用。三、病毒的分类分类原则：1、核酸类型和结构；2、病毒体的形状和大小；3、病毒体的形态结构；4、对脂溶剂的敏感性。1、DNA病毒类；2、RNA病

4、毒类；3、DNA和RNA逆转录病毒类。三、其他：1、卫星病毒(satellites):基因组缺陷的病毒，一类为可编码自已衣壳蛋白；另一为RNA分子，需要辅助病毒的衣壳蛋白。500-2000核苷酸，引起植物病变2、类病毒(viroids):植物病毒，单链杆状RNA有二级结构，200-400核苷酸，无包膜，不含蛋白质3、朊粒(prion):3.0×104的蛋白质，引起疯牛病……第二节病毒的增殖遗传与变异一、病毒的培养：（一）动物接种1、不同的病毒，易感动物不同，常用动物有：小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猴等；2、接种的

5、途径也有多种，可：皮下、皮内、脑内、腹腔、静脉等接种；3、病毒→动物→动物出现感染症状，据症状鉴定病毒或取病变组织进一步检查。（二）鸡胚培养1、接种途径有：尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊、绒毛尿囊膜2、培养数天后，观察鸡胚情况或取培养物进一步鉴定尿囊腔接种羊膜腔接种尿囊腔羊膜腔（三）组织培养（最常用细胞培养）1、优点：（1）便于纯化病毒；（2）可直接观察细胞变化（包括细胞出现病变或转化）；（3）可对病毒的复制进行基础性研究；（4）可进行空斑纯化病毒克隆；（5）可滴定病毒含量。2、细胞种类：（1）原代细胞：以无菌手续

6、采动物等的组织切碎洗净后用胰蛋白酶消化得分散的单个细胞，加培养液在细胞瓶内培养所获得的单层贴壁细胞为原代细胞；原代细胞消化、重新分装并培养所得细胞为次代细胞。特点：对病毒易感性高，主要作为自标本中分离的工具。（3）二倍体细胞：在体外分裂50-100代后仍保持其二倍染色体数目的单型细胞，常用人胚肺二倍体成纤维细胞。（2）传代细胞系：能在体外持续增殖传代的细胞系，多由癌细胞或二倍体细胞突变而成。3、病毒在细胞内增殖的检查与鉴定（1）观察细胞变化(cytopathiceffect,CPE)：CPE——病毒感染细胞

7、后引起的细胞病变。正常成纤维细胞（2）病毒的定量测定：TCID50(50%tissuecultureinfectivedose)：将病毒进行系列稀释后行细胞培养，观察能使半数细胞培养孔或试管内的细胞发生细胞病变（CPE）时的病毒量，即TCID50。病毒感染细胞后形成嗜酸性或嗜碱性包涵体狂犬病毒感染后在脑细胞的胞浆内出现嗜酸性圆形或椭圆形的包涵体，可供辅助诊断.（一）病毒的增殖过程增殖方式——自我复制(selfreplication)复制周期：1、吸附和穿入(absorptionandpenetration)

8、2、脱壳(uncoating)3、生物合成(biosynthesis)4、装配与释放(assemblyandrelease)（一）吸附和穿入(absorptionandpenetration)吸附：病毒的表面配体位点与细胞表面特异性受体结合；穿入：病毒进入宿主细胞。（三）生物合成(biosynthesis)：早期：基因组在细胞内合成非结构蛋白（病毒复制酶及抑制细胞正常生物合成的抑制酶）。晚期：根据基因组的指令在细