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1、3病毒检验技术非细胞生物（真）病毒：至少含核酸亚病毒类病毒拟病毒朊病毒A、没有细胞构造,仅是核酸和蛋白质。B、形态极其微小,必须在电镜下才能观察。C、一种病毒只含一种核酸,DNA/RNA。D、无产酶系统,无蛋白合成系统，在宿主活细胞内营专性寄生。E、抗生素不敏感,但对干扰素敏感。病毒的一般特征（二）、病毒的形态病毒粒子外形有下列五种：1.砖形：痘病毒2.弹状：狂犬病病毒,水疱性口炎病毒等3.球形：腺病毒,疱疹病毒等4.蝌蚪形：大部分噬菌体5.杆状和丝形：烟草花叶病毒等1.砖形2.弹状3.球形4.蝌蚪形5.杆形二、病毒的结构、化学成分及其 功能（一）病毒的核心
2、单股或双股的核酸：即DNA或RNA，其包含全部遗传信息，主导病毒的生命活动。（二）病毒的外壳病毒的外壳为衣壳：包围在病毒核心外面的一层蛋白质结构，由许多蛋白亚单位(壳粒)组成。保护核酸免受外界环境因素破坏，对宿主细胞有特别亲和力，是病毒的特异性抗原。（三）病毒的囊膜病毒在衣壳外面有双层膜(蛋白质多糖脂类)，主要来自于宿主细胞的细胞膜或核膜。有维护病毒颗粒结构，保护病毒核衣壳的作用。（四）病毒的化学组成核酸蛋白质多糖脂类三、病毒结构的对称性螺旋对称立体对称复合对称RNAorDNAProteinCoat(Capsomers)Lipidenvelope螺旋对称的代
3、表-烟草花叶病毒 (tobaomosaicvirus,TMV)二十面体对称的代表-腺病毒(Adenovirus)衣壳粒总数N=10(n-1)2+2n为每条边的衣壳粒数刺突tailpins复合对称的代表-T偶数噬菌体95nm95nm头部head领环neck尾鞘tail（24环）尾丝(tailfibers)65nm四、包涵体在某些病毒感染的宿主细胞的胞浆或胞核内，出现的光镜下可见的大小，形态和数量不等的个体。组成:病毒的聚集体(腺病毒的核内包涵体)病毒感染细胞后的反应产物;出现部位:不同病毒不一样,痘病毒见于皮肤的棘层细胞中,而新城疫病毒则多见于支气管上皮细胞中
4、;特征:具有一定的种属性.如疱疹病毒形成核内包涵体,痘病毒形成胞浆包涵体,麻疹病毒在核内和胞浆内都出现包涵体.作用:可用于病毒的快速鉴别和某些疾病的辅助诊断五、病毒的物理性状（一）滤过性“过滤性病毒”常用滤器：赛氏滤器,玻璃滤器,微孔滤膜滤器.（二）浮密度由于病毒粒子太小，不能直接进行其密度的测定，而将提纯的病毒粒子悬浮于某液体中（氯化铯、蔗糖溶液等）进行间接测定，称为浮密度。六、理化因素对病毒的作用（一）温度保存病毒方法：1.快速低温冷冻2.冷冻干燥（二）pH值大多数病毒在pH为6－8保存，pH为5.0以下和9.0以上，多数病毒会被灭活。（三）辐射γ射线和
5、X射线以及非电离辐射紫外线，都对病毒呈现灭活作用（四）超声波和光动力作用（五）脂溶剂乙醚、氯仿、丙酮对有囊膜病毒有灭活作用（六）甘油和抗生素七、病毒的血凝性与红细胞吸附现象某些病毒囊膜上有糖蛋白血凝素能与多种动物的红细胞表面的糖蛋白受体结合，发生红细胞凝集现象。（新城疫,禽流感；腺病毒）红细胞凝集现象可以被特异性抗体抑制，称为红细胞凝集抑制试验。利用此法以鉴定病毒和检查动物体内抗体滴度，以诊断某些传染病。八噬菌体噬菌体是侵袭细菌、放线菌、真菌和螺旋体等的病毒。噬菌体的形态有蝌蚪形、微球形、纤线形等三种形态。噬菌体的化学成分主要是核酸和蛋白质。噬菌体具有抗原性
6、，能刺激机体产生中和抗体。噬菌体对理化因素的抵抗力较强，一般在70℃下30min仍不失去活性。耐低温和冰冻,对紫外线和X射线敏感.采用双层平板法:将少量噬菌体与大量宿主细胞混合后，将此混合液与45℃左右的琼脂培养基(1%)在培养皿中充分混匀，然后倒入含底层琼脂培养基(2%)的平板培养，经数小时至10余小时后，在平板表面布满宿主细胞的菌苔上，可以用肉眼看到一个个透亮不长菌的小圆斑。即噬菌斑。每一个噬菌斑一般由一个噬菌体粒子形成的，噬菌斑的形成可用于检出、分离、纯化噬菌体和进行噬菌体的计数。噬菌斑噬菌斑(plaque)下层培养基双层培养基敏感菌+上层培养基噬菌体
7、稀释液培养噬菌斑噬菌斑敏感菌菌苔空斑和蚀斑在单层细胞培养上时,由于病毒感染细胞裂解,出现的与噬菌斑类似的空斑,称为蚀斑.是病毒感染细胞形成的局限性病灶。第二节病毒的增殖一、病毒的增殖特点及方式隐蔽期增殖期无囊膜病毒:抑制宿主细胞的增值，裂解释放有囊膜病毒：和宿主细胞共同增值，“出牙”释放肿瘤病毒：整合到宿主细胞基因组中，可传到下一代二、增值方式：自我复制三、病毒增殖的一般过程（一）吸附期吸附的机理：尾丝尖端与受体发生共价结合。吸附的类型:1静电吸附:可逆,非特异的.在pH7时,病毒与宿主细胞均带负电荷,不易接触,但Ca2+和Mg2+等阳离子可降低负电荷,促进
8、静电吸附;2特异性吸附:病毒与易感细胞上的特异性受体
