最新高效毛细管电泳ppt课件.ppt

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1、进入夏天，少不了一个热字当头，电扇空调陆续登场，每逢此时，总会想起那一把蒲扇。蒲扇，是记忆中的农村，夏季经常用的一件物品。　　记忆中的故乡，每逢进入夏天，集市上最常见的便是蒲扇、凉席，不论男女老少，个个手持一把，忽闪忽闪个不停，嘴里叨叨着“怎么这么热”，于是三五成群，聚在大树下，或站着，或随即坐在石头上，手持那把扇子，边唠嗑边乘凉。孩子们却在周围跑跑跳跳，热得满头大汗，不时听到“强子，别跑了，快来我给你扇扇”。孩子们才不听这一套，跑个没完，直到累气喘吁吁，这才一跑一踮地围过了，这时母亲总是，好似生气的样子，边扇边训，“你看热的

2、，跑什么？”此时这把蒲扇，是那么凉快，那么的温馨幸福，有母亲的味道！　　蒲扇是中国传统工艺品，在我国已有三千年多年的历史。取材于棕榈树，制作简单，方便携带，且蒲扇的表面光滑，因而，古人常会在上面作画。古有棕扇、葵扇、蒲扇、蕉扇诸名，实即今日的蒲扇，江浙称之为芭蕉扇。六七十年代，人们最常用的就是这种，似圆非圆，轻巧又便宜的蒲扇。　　蒲扇流传至今，我的记忆中，它跨越了半个世纪，也走过了我们的半个人生的轨迹，携带着特有的念想，一年年，一天天，流向长长的时间隧道，袅高效毛细管电泳★毛细管电泳(capillaryelectrophore

3、sis，CE）又称高效毛细管电泳(HPCE)或毛细管电分析法（CESM）。它是以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力的新型液相分离分析技术。★毛细管电泳是凝胶电泳技术的发展，是高效液相色谱分析的补充。简介特点毛细管电泳突出的优点：高效（105TP/m-107TP/m）、快速（几十秒至几十分钟）；分离模式多，选择自由度大；分析对象广，小到无机离子大至整个细胞，具有“万能”分析功能或潜力。操作可高度自动化；样品与试剂消耗量小，运转费用低，无环境污染问题。高压电源（1）稳定、连续可调的直流电源，一般最高电压可达到30-50kV，

4、最大电流为200-300mA；（2）具有恒压、恒流、恒功率输出；（3）电场强度程序控制系统；（4）电压稳定性：0.1%；（5）电源极性易转换；（6）有良好的绝缘性能。毛细管（1）材料：要求具有化学、电学惰性，紫外-可见光透光性，柔韧性，高强度，价廉。普通玻璃毛细管：价格便宜，但电渗大，吸附作用大。石英玻璃毛细管：常用，外层涂聚酰亚胺。性能稳定，电渗较大，但也有一定的吸附。聚四氟乙烯毛细管：新材料，电渗小，但性能不太稳定。（2）规格：内径20～200μm，外径350～400μm；长度<=1m；毛细管电泳进样方式进样量：毛细管长度

5、的1%-2%；纳升级、非常小进样系统：手动进样系统和自动进样系统。进样方式一般有：电动进样压差进样扩散进样电动进样将毛细管的阳极直接与样品接触，短时间内施加电压，使样品通过电迁移的方式进入毛细管的阳极端。进样量：与溶质浓度，加电压的强度，电迁移时间，电迁移速度，电渗速度等因素有关。优点：进样准确，容易控制重复性好。缺点：对浓度低的组分有歧视效应。压差进样(1)虹吸进样：进样时将阳极槽抬高形成槽的落差，利用液体重力差将样品吸入阳极端的毛细管内。进样：量与落差、样品浓度、进样时间成正比，与样液粘度成反比优点：操作简便，重复性好。

6、缺点：比较适于自由电泳，而不适于凝胶电泳。(2)加压进样：进样时将阳极端密闭，施加一定的液压把样品吸入毛细管内。进样量：与液压强度、样品浓度、进样时间成正比，与样液粘度成反比。(3)真空进样利用两端的气压差将样品送入毛细管内。进样量：与真空度、样品浓度、进样时间成正比，与粘度成反比。扩散进样当将毛细管插入一样品溶液时，样品分子因管口界面存在浓度差而向管内扩散。进样量：与扩散系数，样品浓度，进样时间成正比。类型检测限/mol紫外-可见10-13～10-15荧光10-15～10-17激光诱导荧光10-18～10-20电导10-18

7、～10-19检测器毛细管电泳配置的检测器与高效液相色谱使用的检测器大致相同，都属于超微量分析，对检测器的灵敏度要求比较高，要求：具有极高灵敏度，可柱端检测；检测器、数据采集与计算机数据处理一体化；检测器紫外检测器：氘灯（波长范围190-400nm），有机物一般在254nm波长处有吸收。也可进行全波长扫描。(1)空气制冷：在毛细管分析室内输入制冷空气使毛细管迅速冷却，达到制冷的目的。(2)液体制冷：在毛细管的夹层中输入制冷液体达到制冷的目的。热效应：在高电场下毛细管中的电解质和电流发生剧烈的摩擦，产生大量的热，这种自热现象，称之

8、为热效应。制冷系统基本原理在电解质溶液中，带电粒子在电场作用下以不同的速度定向迁移的现象叫电泳。CE所用的石英毛细管柱，在pH>3的情况下，其内表面带负电，和溶液接触时形成双电层。在高电压的作用下，双电层中的水合阳离子引起流体整体向负极方向迁移的现象叫电渗。电渗是毛细管中的溶