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时间:2021-04-20
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4、裂末期滞留于子细胞胞质中,形成微核。原理本实验选用培养细胞,用环磷酰胺作诱导剂(射线、顺铂等),促使细胞中染色体断裂,产生微核。微核经Giemsa染色后呈紫红色,胞质被染成淡灰蓝色。器材与试剂显微镜、载玻片、染色缸、滴管等培养细胞(小盖片)甲醇固定液PBS(pH7.4)Giemsa应用液(临用现配)Giemsa原液:PBS=1:9混合而成。操作培养细胞(小盖片)——加环磷酰胺1mg/ml——PBS洗涤3次——甲醇固定5min——Giemsa染色5min——自来水冲洗——显微镜下观察——计数24h微核的计算先用低倍镜粗检,后用高倍镜,选择细胞分布均匀,细胞无损,着色适当的区域,计数。每张玻片计数
5、100-200个细胞,按“1‰”计算微核的出现率,微核计数以“细胞”为单位,即一个细胞中出现2个或2个以上微核时,只按“1”计算。结果微核大多数呈单个圆形,边缘光滑整齐,嗜色性与核质相一致,呈紫红色或蓝紫色。注意事项正确掌握微核的形态特征,避免假阳性。以有核细胞形态是否完好作为判断制片优劣的标准
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