最新血球计数板的使用课件PPT.ppt

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1、血球计数板的使用一、实验目的1、明确显微镜计数的原理。2．学习使用血球计数板进行微生物计数的方法。二、实验材料酵母菌悬液，血球计数板，显微镜，盖玻片，无菌毛细管、吸水纸等。三、实验原理利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种常用的微生物计数方法。此法的优点是直观、快速。将经过适当稀释的菌悬液（或孢子悬液）放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中，在显微镜下进行计数。由于计数室的容积是一定的（0.1㎜3），所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积内的微生物总数目。由于此法计得的是活菌体和死菌体的总和，故又称为总菌计数法。其计算方法如下：1．25×16的计数板计算公式细胞数/ml

2、=(80小格内的细胞数/80)×400×10000×稀释倍数=A/5×25×104×B2．16×25的计数板计算公式细胞数/ml=(100小格内的细胞数/100)×400×10000×稀释倍数=A/4×16×104×B四、操作过程1．稀释将酵母菌悬液进行适当稀释，菌液如不浓，可不必稀释。2．镜检计数室在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗后才能进行计数。3．加样品将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌的细口滴管将稀释的酵母菌液由盖玻片边缘滴一小滴（不宜过多），使菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自行进入计数室，一般计数室均能充满菌液。注意不可有气泡产生。静置5—10分钟即可计数。4

3、．显微镜计数将血球计数板置于显微镜载物台上，先用低倍镜找到计数室所在位置，然后换成高倍镜进行计数。在计数前若发现菌液太浓或太稀，需重新调节稀释度后再计数。一般样品稀释度要求每小格内约有5—10个菌体为宜。若选用25×16规格的计数板则每个计数室选5个中方格，可选4个角和中央的中格（即80个小格），若选用16×25规格的计数板，则数四个角：左上、右上、左下、右下的四个中方格，（即100小格）中的菌体进行计数。位于格线上的菌体一般只数上方和右边线上的。如遇酵母出芽，芽体大小达到母细胞的一半时，即作两个菌体计数。计数一个样品要从两个计数室中计得的值来计算样品的含菌量。5.对每个样品计数三次，取其平均

4、值，计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数。各中格中菌数AB二室平均值菌数/ml12345第一室第二室A-五个中方格的总菌数B-稀释倍数6．清洗血球计数板血球汁数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用95％的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。7.注意事项（1）实验过程中发现，如何稀释？如果发现每小格中酵母菌的个数多于10个，可按以下处理：取1ml酵母菌培养液加入到盛有9ml蒸馏水的试管中，摇匀，再计数；如发现酵母菌的个数仍然过大，则同样再稀释一次，直至每小格中酵母菌的个数

5、介于5-10，并作记录。（2）调节显微镜光线的强弱适当，对于用反光镜采光的显微镜还要注意光线不要偏向一边，否则视野中不易看清楚计数室方格线，或只见竖线或只见横线。（3）因菌液在血球计数板处于不同空间，要在不同焦距下才能看全，所以，观察时必须不断调细螺旋（调焦距长短），方可找全。（4）每个样品重复2—3次，若两次差别太大应重测。成语误用类型中考复习专题——望文生义而误用这份试题中的第1小题他花了10分钟时间才完成，真是小题大做。听到有儿童落水了，正在江边消夏的人们忘乎所以地跳入水中去营救。对象、范围和场合误用晚会结束前，她献上了一曲《烛光里的妈妈》，唱得栩栩如生。黄山的石、雾、松是大自然的造化

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