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1、茶多酚对小鼠实验性肝损伤的保护作用讨论中最后的实验从下午四点持续到凌晨…我们的“外援”很晚了，眯一下…一、目的:探讨茶多酚对肝脏损伤的保护作用。二、方法:分别建立四氯化碳(CCl4)、硫代乙酰胺(TAA)诱导小鼠肝脏损伤模型,以测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)及丙二醛(MDA)含量为指标观察茶多酚对肝脏损伤的保护作用。三、关键词:茶多酚;四氯化碳;硫代乙酰胺;血清丙氨酸氨基转移酶;丙二醛四、原理：血清ALT含量，肝匀浆MDA含量是肝功能的几个重要指标，一般情况下肝损伤时血清ALT含量，肝匀浆MDA含量越低则肝功能恢复得越好
2、。五、材料:小鼠60只茶多酚（0.25g药物中含有0.1g茶多酚）0.1%CCl4花生油溶液硫代乙酰胺TAA生理盐水硫代巴比妥酸试剂盒(检测肝匀浆中MDA含量)一份ALT试剂盒(检测血清ALT含量)一份大试管60支手术刀3把止血钳3把镊子3把EP管60支小试管60支离心机一台灌胃器五份注射器(10ml)2支匀浆机一台分光光度计一台六、小鼠分组:◆正常对照组:8只◆CCl4肝损伤模型:●模型对照组:8只●75mg/kg茶多酚组:8只●150mg/kg茶多酚组:8只◆TAA肝损伤模型:●模型对照组:8只●75mg/kg茶多酚组:
3、8只●150mg/kg茶多酚组:8只七、方法:1.小鼠CCl4急性肝损伤模型动物分组,用茶多酚(75、150mg/kg)或同剂量的生理盐水灌胃,连续7d,6d除正常组外,各组小鼠均腹腔注射0.1%CCl4花生油溶液10ml/kg,16h后,即末次给药1h后眼球取血,测血清ALT,取肝匀浆测验MDA含量。2.小鼠TAA肝损伤模型分组及给药方法同CCl4模型。给药6d除正常组外,各组小鼠均腹腔注射TAA50mg/kg,16h后,即末次给药1h后眼球取血,测血清ALT,取肝匀浆测MDA含量。3.⑴肝匀浆MDA的含量检测按硫代巴比妥
4、酸试剂盒的方法进行.⑵.ALT的检测按试剂盒的方法进行。茶多酚对CCl4引起小鼠肝损伤模型的影响 表1结果显示,与正常对照组比,CCl4肝损伤小鼠血清ALT和肝匀浆MDA值明显升高。茶多酚对CCl4引起的ALT和MDA升高有明显的降低作用,呈剂量依赖性,见表1。CCL4模型组组别ALT(U/L)MDA(nmol/mgprot)正常组109.65±85.593.21±0.21模型对照组187.11±38.322.00±0.6475mg/kg组136.48±57.522.08±0.57150mg/kg组102.66±55.36
5、1.75±0.49茶多酚对TAA引起小鼠肝损伤模型的影响表2结果显示,与正常对照组比TAA肝损伤小鼠血清ALT和肝匀浆MDA值明显升高。茶多酚对TAA引起的ALT和MDA升高有明显的降低作用,呈量依赖性。TAA模型组组别ALT(U/L)MDA(nmol/mgprot)正常组109.65±85.593.21±0.21模型对照206.73±75.962.76±0.5675mg/kg组171.69±78.182.51±0.93150mg/kg组118.03±55.321.99±0.76统计学分析本实验各组数据为小样本数据，故可用t
6、检验对任意两样本均数进行比较，在本实验中以模型组为准与各组比较进行统计学分析，另外75mg/kg组与150mg/kg组也要进行比较，从而判断剂量的多少是否有影响。实验讨论：近年许多文献指出肝组织细胞的损伤与自由基毒性反应关系极为密切[4]。CCl4致毒机制[5]为经肝微粒体细胞色素P450代谢生成自由基·CCl3攻击肝细胞膜上磷脂分子引起脂质 过氧化,CCl3继而与膜脂质和蛋白质大分子进行共价结合,引起膜结的和功能完整性的破坏。 本实验结果表明茶多酚对CCl4所致的实验动物模型肝损伤均有明显的保护作用。茶多酚可明显降低肝
7、损伤所致血清ALT的升高及降低损伤肝组织MDA含量。提示茶多酚对肝脏的保护作用与其清除或抑制自由基有关。TAA引起肝损伤的机制主要是干扰RNA从胞核到胞浆的转运过程,并使细胞摸内钙聚集,影响细胞膜的通透性,通过细胞离子周围变形而导致肝细胞坏死。茶多酚能明显降低TAA所致肝损血清ALT和肝组织MDA含量。提示茶多酚对肝脏的保护作用不是通过单一的机制实现的。其详细的作用机制有待进一步研究。真诚感谢以下老师：徐冬老师为我们小组课题设计提供了很多宝贵意见；梁天文老师连日来指导我们具体实验操作；罗汉川老师为我们实验过程中遇到的难题提供
8、了很多宝贵方法；林明栋老师从大处引导我们修正课题方向，从小处具体指导实验操作技能。培训需求分析的方法一、整体分析法整体分析法是从组织的整体现实出发，以战略目标为依据确定组织培训需求的方法。整体分析法一般从经营环境、利润率、投资回报率、员工流动率、客户满意率等指标确定不同的培训需求。优点：具
