凉州区规模养殖场猪伪狂犬病血清学调查

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1、凉州区规模养殖场猪伪狂犬病血清学调查　　摘要：为了掌握近年来甘肃省武威市凉州区规模养殖场猪伪狂犬病感染情况，2010-2012年，在全区46个养猪场（点/次）共采集1899份血清，用ELISA检测试剂盒进行了猪伪狂犬病抗体检测。结果显示，抗体阳性数148份，抗体阳性率7.79%，其中2010-2012年抗体阳性率分别为9.12%、8.70%、4.38%。结果表明，凉州区规模养殖场不同程度地受到猪伪狂犬病的野毒感染。关键词：猪伪狂犬病；酶联免疫吸附试验；调查中图分类号：S858.28文献标识码：B文章编

2、号：1007-273X（2013）10-0043-02猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒（Pseudorabiesvirus，PRV）引起的多种家畜和野生动物的一种急性传染病[1，2]。PRV感染猪主要通过母猪胎盘和公猪精液垂直传播，同时也可水平传播。该病可引起种公猪的不育、妊娠母猪的流产、产死胎和木乃伊胎，可引起新生仔猪的大量死亡而造成养猪业的较大经济损。20世纪90年代以来分子生物学和基因工程技术取得了重大进展，研制出了猪伪狂犬病病毒基因缺失疫苗，应用ELISA方法检测gE抗体，可以区分疫苗抗体和野毒抗体

3、，在近20年来有效阻止和控制了猪伪狂犬病的发生[3]。4武威市凉州区是全国生猪调出大县，2012年底，生猪饲养量达73.9万头，规模养猪场达到1.9万户，养猪近55万头，占猪饲养量的75%。因此，做好规模猪场猪伪狂犬病血清学检测，能够及时清除隐性带毒猪，不断提高猪场的养殖效益。为了解甘肃省武威市凉州区规模养猪场伪狂犬病的流行情况，在2010-2012年期间共采集规模猪产场血清1899份，进行猪伪狂犬病血清学调查，现将调查结果报告如下。1材料与方法1.1待检血清2010-2012年在凉州区养猪场46个场

4、点次，共采集1899份血清。1.2试剂猪伪狂犬gE-ELISA抗体检测试剂盒购自美国IDEXX公司。1.3方法ELISA方法[4]：①取出抗原包被板，在每孔中加入50μL稀释液、50μL阴阳性对照和待检血清，阴性对照设3孔，阳性对照设2孔。②轻轻混匀，用封条封闭微量反应板，置室温孵育1h。③用洗涤液洗板3次，300μL/孔，最后一次将板中残留洗涤液扣拍到吸水材料上。④每孔加100μL辣根过氧化物酶标记抗PRVgE抗体，室温孵育20min。⑤洗涤3次，方法同③。⑥每孔加入1004μLTMB底物溶液，避光

5、且室温孵育15min。⑦每孔加入50μL终止液，酶标仪上测各孔OD650nm值。⑧试验成立条件是阴性对照0D650nm平均值减去阳性对照0D650nm平均值必须≥0.3。1.4判断标准通过计算样品与阴性对照的比例（S/N）来确定猪伪狂犬病病毒抗体的有无。如果S/N值≤0.6，样品判为PRVgE抗体阳性；如果S/N值>0.6但≤0.7，样品应重新测定；如果S/N值>0.7，样品判为PRVgE抗体阴性。2结果2010-2012年共检测本地养猪场46个场次，1899份样品，抗体阳性数148份，抗体阳性率7.

6、79%，其中2010-2012年抗体阳性率分别为9.12%、8.70%、4.38%（表1）。3讨论（1）通过此次调查，结果表明凉州区养猪场不同程度的受到猪伪狂犬病毒的感染，凉州区的猪伪狂犬病gE抗体阳性率为7.79%。据调查，凉州区只有部分规模养猪场和种猪场使用猪伪狂犬病毒gE缺失疫苗，但是还有部分猪场猪伪狂犬病毒感染率比较高，建议猪伪狂犬病毒阳性猪场要进行定期监测普查，及时清除野毒感染猪，使猪群逐步得到净化。4（2）猪免疫伪狂犬病毒gE基因缺失疫苗后，配合使用猪伪狂犬病ELISAgE抗体试剂盒，进行

7、抗体检测，能够区分免疫抗体和野毒感染，清除野毒感染的猪，使猪群得到净化，该方法操作简单、特异、敏感、快速、准确，在净化猪伪狂犬病中起到了很重要的作用。（3）猪感染伪狂犬病后主要表现为母猪繁殖障碍和呼吸系统疾病综合征（PRDC），给猪场造成很大的损失，净化该病以后母猪繁殖障碍和呼吸系统疾病综合征能够得到很好的改善，显著提高生产效益。参考文献：[1]费恩阁，李德昌，丁壮，等.动物疫病学[M].北京：中国农业出版社，2004.205-209.[2]殷震，刘景华.动物病毒学，[M].第2版.北京：北京科学出版

8、社，1997.998-1009.[3]王金花，丁秀丹，武彤.猪伪狂犬病的新特点及免疫净化措施[J].养殖技术顾问，2009，10：124-124.[4]王科文，杨汉春.我国重点养猪区域伪狂犬病野毒感染血清学调查报告[J]，养猪，2010（02）：45-47.4