最新肌钙蛋白和肌红蛋白 测定试剂盒介绍课件ppt.ppt

《最新肌钙蛋白和肌红蛋白 测定试剂盒介绍课件ppt.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、肌钙蛋白和肌红蛋白测定试剂盒介绍技术背景心脑血管病现已成为我国人口死亡的主要原因，名列第一位，心血管疾病特别是心肌损伤的发病率逐年增加。因此早期进行诊断和积极的治疗，对挽救病人的生命有重要意义。技术背景WHO1979年制订的AMI的诊断标准1.有剧烈而持久的胸痛史：2.明确的心电图改变，包括ST段抬高和异常的Q波出现：3.系列酶的水平的改变，早期浓度升高，随后恢复正常浓度。心肌损伤理想的生化标志物国际临床化学联盟（IFCC）的心肌标志物标准化委员会（CSCM）和美国临床生化学院（NACB）建议：

2、在临床工作中运用两类心肌损伤标志物：一是有胸痛发生后几小时即增高的早期标志物；二是发病后持续增高的具有高度专一性的确定标志物。早期标志物（心肌损伤后6h内血中就升高）肌红蛋白（Mb）优点出现早（2h），敏感性高。阴性有助于排除AMI。血中半衰期短，观察有无再梗死以及梗死有无扩展。是AMI溶栓中评价再灌注与否的较敏感准确的指标。缺点特异性不高早期标志物（心肌损伤后6h内血中就升高）C反应蛋白优点早期即出现异常增高且“窗口期”较短，在心肌损伤的早期诊断和预后估计有较好的临床价值。超敏CRP对心梗

3、有一定预报价值。缺点特异性不高晚期标志物（发病后6-9h血中增高并持续数天，对心肌损伤的敏感性和特异性都较高）心肌肌钙蛋白（cTn）有cTnI和cTnT两种亚型。因cTn灵敏度高、特异性强、发病后持续时间长，是目前诊断心肌损伤较好的确定标志物。新修订MI的诊断标准ESC和ACC于2000年联合发表文件，重新修订MI的诊断标准，最重要的是将检测到心肌损伤标志物（主要是cTn）的异常变化作为诊断MI急性发病的必要条件。新修订MI的诊断标准心肌损伤标志物升高有剧烈而持久的胸痛史明确的心电图改变1+2o

4、r3即可诊断胶乳增强免疫比浊法原理使用特异抗体结合于胶乳颗粒表面，标本与胶乳试剂在缓冲液中混合，标本中的cTnI与胶乳颗粒表面的抗体结合，使相邻的胶乳颗粒彼此交联，在500~600nm附近测量溶液浊度的增加，其增加的程度与标本中的cTnI浓度相关。胶乳增强免疫比浊法原理方法学特性（cTnI）该试剂灵敏度为0.3ng/ml;线性范围为25ng/ml;批内及批间精密度均小于10%；以99%单侧界值1.7ng/ml，敏感性86%，特异性99%，阳性结果预示值97.7%，临床符合率96%。线性范围校准曲

5、线：采用速率法多点校准，多参数曲线方程（如logit/log）拟合。线性范围达25ng/ml。校准曲线至少稳定30天，测试条件变化时应重新校准，以免试验结果出现偏差。线性范围图1cTnI浓度与吸光度线性相关图方法学特性（cTnI）精密度：水平质控1质控2均值（ng/ml）5.316.7%CV（批内）4.01.4%CV（批间）4.72.0方法学特性（cTnI）回收实验不含TnI的血清加入已知浓度的cTnI混合，n=5,加入的TnI（ng/ml）实测TnI（ng/ml）回收率（%）4410099.3

6、1032020.8104方法学特性（cTnI）灵敏度用0.00ng/ml校准品重复测定20次，计算结果如下：X=0.067SD=0.019X+2.58SD=0.1ng/ml方法学特性（cTnI）稳定性37℃放置5天后，测定值变化<10%试剂有良好的稳定性，实测效期为两年。方法学特性（cTnI）抗凝剂及VC影响抗凝剂浓度测定值（x）(ng/ml)回收率(%)----15.0--肝素12.5U/ml14.395.1枸橼酸钠3.2mg/ml15.1100.2EDTA-K23.2ng/ml13.287.

7、6Vc50ug/dl15.099.8Vc100ug/dl15.2101.1方法学特性（cTnI）抗干扰容量：在以知浓度血清中，加入下列物质对cTnI的干扰＜10%。人血清白蛋白3000mg/dl甘油三脂25mg/dlγ-球蛋白5000mg/dl严重溶血或黄疸可造成负干扰，应予避免。临床评价预期值：149例健康成人血清标本经本法测定，95%单侧分布为1.1ng/ml，99%单侧分布为1.7ng/ml，此范围仅供参考。各试验室应确定自己的参考值及诊断标准。临床评价不同分布下的诊断界值单侧上限（%）临

8、界值(ng/ml)86.50.8095.01.1097.51.3699.01.6899.51.89不同诊断界值的临床诊断效率50例确诊心梗病人和149例对照标本临界值(ng/ml)特异性（%）灵敏性（%）符合率（%）0.8089.39691.01.1094.69494.51.3697.39095.51.6899.38696.01.8999.38696.0ROC曲线注意事项标本处理用血清或血浆标本（肝素抗凝），在4小时内测定。标本于使用前离心，4000转/分，15分钟。2~8℃贮存的标本应在24小