最新结核病防治实验室痰检工作——第一讲 痰涂片镜检教学讲义ppt.ppt

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1、结核病防治实验室痰检工作——第一讲痰涂片镜检贵州省疾控中心结核病防治研究所 袁薇8/16/2021第一讲痰涂片镜检8/16/2021国家结核病规划(NTP)与 结核病细菌学实验室网络结核病细菌学实验室通过日常、有效的细菌学(病原学)诊断,发现传染源、决定化疗方案和评价治疗效果为实现NTP的重要目标服务痰涂片镜检服务必需在健全的细菌学实验室网络中才能实现128/16/2021国家结核病规划(NTP)与 结核病细菌学实验室网络结核病高负担国家NTP主要通过实施现代结核病控制策略(DOTS)来实现痰涂片镜检是结核病细菌学实验室服务中最重要的内容之一。痰涂片镜检发现传染源是DO

2、TS策略的重要组成部分348/16/2021结核病症状体征咳血或伴有血痰发热或胸痛超过2周持续咳嗽咳痰超过3周检查对象胸部X线异常凡因结核病症状求诊及转诊的可疑肺结核患者,均应进行痰直接涂片检查确定诊断8/16/2021确定诊断的涂片检查应采集3个合格的痰标本就诊当时在门诊留一份“即时痰”标本,同时给患者2个痰盒,嘱患者留取“夜间痰”和“晨痰”,于次日交验检查对象8/16/2021检查对象治疗中或复诊随访病人按期每次送检两份痰(当日即时痰、当日或次日晨痰)初治涂阳患者在疗程满2、5、6月时复治涂阳患者在疗程满2、5、8月时疗效评价8/16/2021经萋尔-尼尔逊染色后在显

3、微镜内蓝色背景下呈红色杆状宽度为0.3~0.6um,生长发育期间形成分枝光学显微镜下为细长稍弯曲,两端钝圆的杆菌,菌体长度多为1.5~3.5um结核菌的形态和结构结核分枝杆菌8/16/2021细胞质核物质细胞壁细胞膜结核分枝杆菌结核菌的形态和结构电子显微镜下的结核分枝杆菌8/16/2021Gram-positiveS.aureusGram-negativeE.coliAcidfastM.tuberculosis结核菌的形态和结构电子显微镜下的结核分枝杆菌8/16/2021结核杆菌用革兰氏染色,着色较差但呈兰色,列为G+菌结核杆菌用普通的染色方法不易着色,在染液中加入石炭酸

4、后才可着色12结核菌的形态和结构染色特性8/16/2021抗酸染色时,因结核杆菌菌体含有大量脂质,其脂质的含量占分枝杆菌之首,占菌体干重的40%,因脂质的含量大,所以不易着色,但经过加热或者提高石炭酸的浓度、延长染色时间等处理以后才能着色3结核菌的形态和结构染色特性8/16/2021一旦着色,不易被盐酸酒精脱色,而其他细菌均被脱色,把不被盐酸酒精脱色的细菌称为抗酸菌,这种方法称为抗酸染色法4结核菌的形态和结构染色特性8/16/2021结核菌的形态和结构萋尼氏染色镜下形态8/16/2021【胸腹水】【脑脊液】【尿标本】【脓液、病灶组织】【痰标本,肺部深咳的痰】痰涂片操作程序

5、常见标本的收集及处理8/16/2021【胸腹水的采取】于试管中加20%的枸橼酸钠3—5滴,或10%的草酸钾5—6滴,可防止15—20ml胸腹水凝固。无菌采取胸腹水以后应立即送检。可采取离心集菌或漂浮集菌法检查痰涂片操作程序常见标本的收集及处理8/16/2021【纤维支气管镜刷检物】可将毛刷直接进行抗酸染色,也可将刷检标本洗脱于装有无菌生理盐水的试管中,再涂片检查痰涂片操作程序常见标本的收集及处理8/16/2021【脑脊液的采取】无菌手术取得脑脊液以后,3000转离心30分钟,取沉淀物涂片染色检查结核性的脑脊液放在冰箱中4℃过夜以后,会在液面形成一个倒漏斗状的薄膜,取此薄膜

6、涂片染色镜检痰涂片操作程序常见标本的收集及处理8/16/2021【尿标本的采取】通常留取清晨第一次全尿或中后段夜尿,也可留取24小时的尿液,放冰箱或阴凉处,静置,去上清,留沉淀部分50—60ml送检,取此沉淀液,经3000转,离心30分钟,取沉淀部分2ml直接涂片,染色检查痰涂片操作程序常见标本的收集及处理8/16/2021脓液直接涂片染色镜检病灶组织或干酪样组织需充分研碎后再涂片检查痰涂片操作程序常见标本的收集及处理8/16/2021当前,贵州省疾病预防控制机构结核病实验室进行痰检工作的耗材由项目统一提供:螺旋盖痰瓶可密封的塑料盒可密封的蜡纸盒痰涂片操作程序痰标本的采集

7、-容器8/16/2021痰涂片操作程序痰标本的采集-容器8/16/2021痰涂片操作程序痰盒图例8/16/2021痰涂片操作程序痰盒图例8/16/2021痰标本的采集痰容器应标明病人姓名、编号(检查项目和容器序号1、2、3(1=当日即时痰,2=夜间痰,3=次日晨痰)通用螺旋盖痰瓶,或可密封塑料盒蜡纸盒收集痰标本如:张三,涂片58—1,58—258--3痰涂片操作程序痰标本的采集8/16/2021痰瓶上标明病人姓名,初诊门诊序号(或随访病人登记号)痰标本留取后,痰盒切勿倒置、严防痰液外溢,应立即送检进行细菌学检查时,应在登记本和

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