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时间:2021-04-19
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1、1.总体计算过程常规样本测试:AD->吸光度->反应度->浓度定标样本测试:AD->吸光度->反应度->定标参数质控样本测试:AD->吸光度->反应度->质控结果2.AD->吸光度l目的:对某个测试每周期采集的AD值,先计算该周期采集点的吸光度,本计算过程是后续反应度计算的基础l公式:Abs=(log10AD本底AD读数)/0.58Abs:该测试在某周期的吸光度AD本底:该测试所用反应杯的空白AD,在大生化上,是使用初始化后或进行专门的水空白测试后,该测试所用反应杯所读到的水空白AD,在小生化上,是该测试所用反应杯在第三阶清洗后读到的水空白ADAD读数:该测试在某周期读到的AD
2、值0.58:光径系数,标准光径为10mm,我们反应杯为5.8mm,除0.58目的是换算到标准光径。3.吸光度->反应度l目的:依据某测试在反应时间段内读到的每周期吸光度,计算该测试最终反应度,本计算过程是后续浓度或定标参数计算的基础。依据分析方法不同,对应的计算方法也不同3.1.终点法R=R0-K*R空白其中:R:终点法测试的最终反应度R0:原始反应度K:体积修正因子R空白:终点法测试反应度空白下面进一步说明每个计算参数的各自的计算公式:1)原始吸光度:R0取反应周期最后若干个采集点点,如果:1)反应周期采集点不少于4个点,则取最后4点,去掉最大最小值,取中间2点计算平均值;2
3、)如果只有3点,则去掉最大最小取中间值;3)如果只有2点,取2点的平均值;4)如果只有1点,取该点的值;反应周期开始及结束时间参见“附录一:反应时间段”。2)空白吸光度:R空白取空白时间段最后若干个点,如果:1)空白时间段内采集点不少于4个点,则取最后4点,去掉最大最小值,取中间2点计算平均值;2)如果只有3点,则去掉最大最小取中间值;3)如果只有2点,取2点的平均值;4)如果只有1点,取该点的值;空白时间段开始及结束时间参见“附录二:空白时间段”。3)体积修正因子:K单试剂项目:K=R1/(R1+S)双试剂项目:K=(R1+S)/(R1+S+R2)上述的R1,S,R2分别指该
4、项目第一试剂加样量,样本加样量,第二试剂加样量3.1.两点法/固定时间法R=(A2-A1)/(T2-T1)其中:R:两点法测试的最终反应度A2:反应结束点的吸光度A1:反应结束点的吸光度T2:反应结束点的时间,单位为分钟T1:反应结束点的时间,单位为分钟反应周期开始及结束时间参见“附录一:反应时间段”。3.1.速率法/动力学法R=N*i=1NTiAi-i=1NTi*i=1NAiN*i=1NTi2-i=1NTi2说明:以上公式实际上就是使用最小二乘法计算反应时间段所有点的拟合曲线的斜率。其中:R:速率法测试的最终反应度N:读数点的个数Ai:第i个点的吸光度Ti:第i个点的采集时间
5、,单位为分钟i=1NTiAi值为145.815i=1NTi值为84.83335196,i=1NAi值为31.76536995i=1NTi2值为562.1641i=1NTi值为7196.697604640551.反应度->浓度视具体定标公式而定,后续补充2.反应度->定标参数依据定标公式求参数附录一:反应时间段反应时间试剂类型200300350400M7开始时间单试剂>?,具体依项目设置而定双试剂项目>?,具体依项目设置而定结束时间单试剂,具体依项目设置而定双试剂项目,具体依项目设置而定注1:反应周期开始时间,视机型不同而不同,反应周期结束时间依据用户设定的项目读数周期而
6、定。注2:上表中所说的第1周期,是从加入R1以后的第XXX个周期。附录二:空白时间段
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