最新电子顺磁共振(ESR)在抗氧化活性研究中的应用课件PPT.ppt

《最新电子顺磁共振(ESR)在抗氧化活性研究中的应用课件PPT.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、电子顺磁共振(ESR)在抗氧化活性研究中的应用EPR(electronparamagneticresonance,电子顺磁共振)即ESR(electronspinresonance,电子自旋共振)。研究的是电子自旋运动产生的磁矩与外磁场作用。根据量子力学理论，电子的自旋运动产生自旋角动量磁矩，mz－自旋磁量子数g－g因子，朗格因子β－波尔磁子当电子的自旋运动是在某一个外磁场环境中，这时电子的磁矩根据电磁场理论会与外磁场相互作用，作用能：一个电子，自旋角动量S＝1/2,而在外磁场中自旋角动量有两个不同取向，mz＝±½所以，在外磁场的作用能，应有两个能级：电子自旋共振吸收电子自旋共

2、振仪（ESR）研究对象：自由基：指具有一个未成对电子双基或多基：具有两个或两个以上的未成对电子三重态分子：具有两个相距较近的未成对电子过渡金属离子和稀土离子固体晶格缺陷其他，一些非顺磁性物质，可以通过辐射、电解、化学反应产生的自由基，包括一些过渡态分子。生物和化学反应中所产生的自由基中间体往往瞬间即逝。即使浓度够大，ESR也难于直接检测自旋捕捉技术自旋捕捉剂是一类比较稳定的，可以与反应中产生的短寿命自由基结合产生另一种较稳定的自由基即自旋加合物的化合物一般来讲，捕捉剂通常有以下特性：在通常实验条件下比较稳定在特定溶剂中有良好的溶解性对短寿命自由基有较大的亲和力能迅速与之反应即有

3、较高的捕捉效率，所生成的自旋加合物易溶解于特定溶剂中，且对光、热等外在条件呈惰性，尽可能保持较长的稳定性自旋加合物的ESR波谱特征尽可能多地反应出所捕捉的短寿命自由基的性质。DMPO+•OHDMPO(5,5-Dimethyl-1-pyrrolineN-oxide5,5-二甲基-1-吡咯林-N-氧化物）是研究氧自由基最常用的捕捉剂，具有较大的捕捉速率常数，易溶于多种溶剂，水溶液可以达到0.1mM的浓度，对光不太敏感，与羟基自由基和超氧阴离子形成稳定的自选加合物DMPO-OH和DMPO-OOH，而且具有特征的ESR波谱。+O2•¯运用ESR研究天然抗氧化剂对ROS的清除作用curc

4、uminBiochemicalandBiophysicalResearchCommunications295(2002)62–66姜黄素TEMP-1O2adductreliableresult说明姜黄素具有潜在保护皮肤抵御紫外线损伤的功能Assay:1.Hydroxylradicalassay2.Superoxideanionassay1:2:2:1aN=aHB=14:92GaN=14.3G,aHβ=11.7G,aHγ=1.3G3.Singletoxygenassay4.Assayforthecarbon-centeredfreeradicalsfromAAPHaN=17.2G

5、,g=2.0056aN=12.2G,aH=2.4G用毛细管进行检测，样品消耗量小，与酶标法相当。PLE951.Hydroxylradical(1.4mMPLE95)PercentInhibition2.64%2.Superoxideanionassay(1.4mMPLE95)PercentInhibition38.1%3.SingletoxygenassayPLE95hadnoeffectonTEMPOsignalinacontrolexperiment.Inaddition,PLE95didnotinhibitTEMP-1O2adductwhenaddedafterthesa

6、mpleswereirradiatedwithlight.ThesestudiessuggestthatPLE95inhibitstheTEMP-1O2adductbyremoving1O2.TheconcentrationofPLE95requiredtoinhibit50%ofTEMPOsignalwasfoundtobe5.5μM.4.ScavengingactivityonthefreeradicalsgeneratedfromAAPH(1.4mMPLE95)PercentInhibition55.4%Mw454Effectsofvariousconcentration

7、sofPLE95ontheESRsignalintensityofthestablenitroxideradicalgeneratedfromthereactionofTEMPwith1O2generatedinthephotoradiation-rosebengalsystemafter2minirradiation.0.48μMPLE951.4μMPLE955.7μMPLE9511.5μMPLE9523μMPLE9591.9μMPLE95ControlSomesamplesatdiffe