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时间:2021-04-19
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1、生物化学课件-9酶3-糖1七、酶活性测定和酶活性单位酶的活性是指酶催化某一化学反应的能力,其衡量的标准是酶促反应速率。酶促反应速率:在一定的反应条件下,单位时间内底物的消耗量或产物的生成量来表示。酶的活性单位是衡量酶活力大小的尺度,是指在一定条件下,酶促反应在单位时间(s、min或h)内将一定量(mg、μg、μmol等)的底物转化成产物所需的酶量。国际单位(IU)在一定的条件下,每分钟催化1μmol底物转化为产物所需的酶量为一个国际单位。催量单位(katal)1催量(kat)是指在一定条件下,每秒钟使1mol底物转化为产物所需的酶量。kat与IU的换算:1IU=1
2、6.67×10-9kat1Kat=6107IU酶的比活性(specificactivity)每mg蛋白质所含酶活性的单位数,代表酶的纯度。比活性=活性U/蛋白mg酶原激活的机理酶原分子构象发生改变形成或暴露出酶的活性中心一个或几个特定的肽键断裂,水解掉一个或几个短肽在特定条件下赖缬天天天天甘异赖缬天天天天缬组丝SSSS46183甘异缬组丝SSSS肠激酶胰蛋白酶活性中心胰蛋白酶原的激活过程酶原激活的生理意义避免细胞产生的酶对细胞进行自身消化,并使酶在特定的部位和环境中发挥作用,保证体内代谢正常进行。有的酶原可以视为酶的储存形式。在需要时,酶原适时地转变成有活性的酶
3、,发挥其催化作用。(二)变构酶变构效应剂(allostericeffector)变构激活剂变构抑制剂变构调节(allostericregulation)变构酶(allostericenzyme)变构部位(allostericsite)一些代谢物可与某些酶分子活性中心外的某部分可逆地结合,使酶构象改变,从而改变酶的活性状态,此种调节方式称变构调节。变构酶常为多个亚基构成的寡聚体,具有协同效应变构激活变构抑制变构酶的S形曲线[S]V无变构效应剂(三)可逆的共价修饰调节共价修饰(covalentmodification)在其他酶的催化作用下,某些酶蛋白肽链上的一些基团可
4、与某种化学基团发生可逆的共价结合,从而改变酶的活性,此过程称为共价修饰。常见类型磷酸化与脱磷酸化(最常见)乙酰化和脱乙酰化甲基化和脱甲基化腺苷化和脱腺苷化-SH与-S-S互变酶的磷酸化与脱磷酸化-OHThrSerTyr酶蛋白H2OPi蛋白磷酸酶ATPADP蛋白激酶ThrSerTyr-O-PO32-酶蛋白二、酶含量的调节(一)酶蛋白合成的诱导和阻遏诱导作用(induction)阻遏作用(repression)(二)酶降解的调控三、同工酶*定义同工酶(isoenzyme)是指催化相同的化学反应,而酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质存在明显差异的一组酶。同工酶是研
5、究代谢调节、分子遗传、生物进化、个体发育、细胞分化和癌变的重要工具,在酶学、生物学以及医学中占有重要地位。HHHHHHHMHHMMHMMMMMMMLDH1(H4)LDH2(H3M)LDH3(H2M2)LDH4(HM3)LDH5(M4)乳酸脱氢酶的同工酶*举例:乳酸脱氢酶(LDH1~LDH5)*生理及临床意义在代谢调节上起着重要的作用;用于解释发育过程中阶段特有的代谢特征;同工酶谱的改变有助于对疾病的诊断;同工酶可以作为遗传标志,用于遗传分析研究。心肌梗死和肝病病人血清LDH同工酶谱的变化1酶活性心肌梗死酶谱正常酶谱肝病酶谱234512345酶活性迁移位置酶活性迁移
6、位置ab(a)LDH同工酶电泳图谱(b)(a)正常人LDH同工酶电泳图谱,(b)心肌梗塞病人血清LDH同工酶电泳图谱12345第五节酶与医学的关系TheRelationofEnzymeandMedicine(一)酶与疾病的发生(二)酶与疾病的诊断(三)酶与疾病的治疗一、酶与疾病的关系1、酶与疾病的发生:酶的数量、结构、位置及其调节改变酶缺乏或异常引起的疾病酶疾病苯丙氨酸羟化酶苯丙酮酸尿症6-磷酸葡萄糖脱氢酶蚕豆病酪氨酸酶白化病细胞色素氧化酶氰化物中毒胆碱酯酶有机磷中毒蛋白酶炎症2、酶与疾病的诊断:血清酶活性测定临床诊断部分常用酶酶主要临床应用谷丙转氨酶肝实质疾患
7、谷草转氨酶心肌梗塞、肝实质疾患胆碱酯酶有机磷中毒乳酸脱氢酶心肌疾患、肝实质疾患淀粉酶胰腺疾病碱性磷酸酶骨病、肝胆疾患胰蛋白酶(原)胰腺疾病肌酸激酶心肌梗塞、肌肉疾患醛缩酶肌肉疾病酸性磷酸酶前列腺癌、骨病γ谷氨酰转移酶肝实质病变、酒精中毒5′核苷酸酶肝胆疾患山梨醇脱氢酶肝实质病变3、酶与疾病的治疗替代治疗:消化不良--胃酶、胰酶抗菌治疗:磺胺药对症治疗:预防血栓形成--尿激酶、链激酶、纤溶酶抗癌治疗:MTX—FH2还原酶二、酶在医学上的其他应用(一)酶作为试剂用于临床检验和科学研究1.酶法分析即酶偶联测定法(enzymecoupledassays),是利用酶作为分析
8、试剂,对一
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