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1、实验四还原糖-砷钼酸比色法.一、糖1.糖的生理功能(1)作为生物体的结构成分。(2)作为生物体的主要能量物质。(3)在生物体内转变为其它物质。(4)作为细胞识别的信息分子。2.测定的意义(1)植物中糖的种类和含量分析，对于选种及控制培育条件有重要的意义。(2)在微生物发酵中控制培养基中糖等物质的含量，对指导生产实践很重要。(3)在医学方面根据血糖或尿糖含量的高低，诊断某些疾病。砖红色（2）氧化亚铜在酸性条件下，可将钼酸铵还原,还原型的钼酸铵再与砷酸氢二钠起作用，生成一种蓝色复合物即砷钼蓝，其颜色深浅在一定范围内与
2、还原糖的含量（即被还原的Cu2O）成正比，用标准葡萄糖与砷钼酸作用，比色后做标准，就可测得样品还原糖含量。2、测定还原糖其它方法(1)蒽酮比色法：强酸可使糖类脱水生成糠醛，糠醛与蒽酮脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色，其颜色的深浅与糖含量成正比关系，在620nm波长下可测定其光密度值。(2)3,5-二硝基水杨酸：还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，在540nm波长下测定光密度值，查对标准曲线
3、并计算，便可求出样品中还原糖的含量。(3)费林试剂滴定法费林试剂由甲乙两种溶液混合而成，甲液（硫酸铜）与乙液（氢氧化钠）生成天蓝色沉淀，在碱性溶液中，乙液（酒石酸钾钠）使氢氧化铜溶解生成一种络合物，还原糖在碱性加热条件下，可以定量还原费林试剂中Cu2+为Cu+,使费林试剂脱色，其脱色的程度与还原糖含量成正比关系。四、实验材料、主要仪器和试剂1．实验材料：苹果2．仪器（1）恒温水浴锅（2）Spc22-可见分光光度计（3）容量瓶（4）漏斗（5）研钵3．试剂（1）铜试剂：CuSO4、酒石酸钾钠、Na2SO4、Na2CO
4、3、NaHCO3（2）砷钼酸试剂：（NH4)6Mo7O24·4H2O、Na2HAso4·7H2O（3）200μg/mL葡萄糖标准液1、制作标准曲线:取7支试管，按下表操作，然后以标准葡萄糖浓度为横坐标，对应的吸光值为纵坐标绘制标准曲线。管号葡萄糖标准液（ml）蒸馏水(ml)铜试剂(ml)沸水浴砷钼酸(ml)OD620nm葡萄糖浓度（μg/ml）0(参比)02210min立即冷却2振荡2Min定容到20ml010.11.91020.21.82030.31.73040.41.64050.51.55060.61.460
5、提取液2mlχ五、实验步骤标准曲线的制作标准葡萄糖溶液浓度（ug/ml）OD620nm0样品ODC02、还原糖的提取称取0.5g苹果于研钵中→加约30ml蒸馏水由漏斗冲入50ml容量瓶，摇匀→80℃水浴浸提30min→冷却→加3mlZnSO4→加3ml0.3N的Ba(OH)2→振荡后静置→上层出现清夜后再加一滴Ba(OH)2至无白色沉淀→定容至50ml。3、还原糖含量的测定过滤提取液→取滤液1ml于50ml容量瓶中→定容→取稀释液2ml于刻度试管中→加铜试剂2ml→煮沸10min→加砷钼酸试剂2ml→振荡2min
6、→定容到20ml→620nm下比色测定→记录结果→查标准曲线。五、结果与计算在标准曲线上查出相应的还原糖浓度(μg/ml)，按下式计算出样品中还原糖百分含量。还原糖（%）=χ×W×106×100％稀释倍数×样液总体积六、思考题1、何谓还原糖？2.简述四种常用的还原糖含量测定的原理。（1）蒽酮比色法（2）砷钼酸比色法（3）费林试剂滴定法（4）3,5-二硝基水杨酸比色法小蓝裙的故事镇贡兮协梳栋初读课文，了解大意:小蓝裙的故事是怎样开始的呢？小女孩最努力、贡献最大，老师奖给她一件小蓝裙。“贡献”:对国家或公众所做的有益
7、的事。（就是为集体做的事情，为班级着想。）同学们你们想想平常自己为我们班级做了什么贡献呢？（讨论）经过和结果又是怎样的？经过：小蓝裙引发了的”不协调”的现象。结果：邻居们也动手把整条街道清扫的整齐干净。协调：激发，勉励。一.认识新朋友.1.开学时,老师就向小朋友们(),这个学期谁最努力,对班级()最多,老师会亲自做一件礼物送给他.2.原来小女孩的脸和上衣是脏的,与小蓝()不().3.于是妈妈替小女孩(),换上了干净的衣服1.开学时,老师就向小朋友们(宣布),这个学期谁最努力,对班级(贡献)最多,老师会亲自做一件礼
8、物送给他.2.原来小女孩的连上和上衣是脏的,与小蓝(裙)不(协调).3.于是妈妈替小女孩(梳洗),换上了干净的衣服.二.词语对对碰美丽--()努力--()贡献--()得到--()高兴--()整洁--()美丽--(漂亮)努力--(勤奋)贡献--(奉献)得到--(获得)高兴--(开心)整洁--(干净)作业1、写会本课的一类生字。2、熟读课文。3、在书上做批注，理解课文内容1.
