最新Feulgen反应和Brachet反应PPT课件.ppt

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1、进入夏天，少不了一个热字当头，电扇空调陆续登场，每逢此时，总会想起那一把蒲扇。蒲扇，是记忆中的农村，夏季经常用的一件物品。　　记忆中的故乡，每逢进入夏天，集市上最常见的便是蒲扇、凉席，不论男女老少，个个手持一把，忽闪忽闪个不停，嘴里叨叨着“怎么这么热”，于是三五成群，聚在大树下，或站着，或随即坐在石头上，手持那把扇子，边唠嗑边乘凉。孩子们却在周围跑跑跳跳，热得满头大汗，不时听到“强子，别跑了，快来我给你扇扇”。孩子们才不听这一套，跑个没完，直到累气喘吁吁，这才一跑一踮地围过了，这时母亲总是，好似生气的样子，边扇边训，“你看热的，跑什么？”此时这把蒲扇，是那么凉快，那么的温

2、馨幸福，有母亲的味道！　　蒲扇是中国传统工艺品，在我国已有三千年多年的历史。取材于棕榈树，制作简单，方便携带，且蒲扇的表面光滑，因而，古人常会在上面作画。古有棕扇、葵扇、蒲扇、蕉扇诸名，实即今日的蒲扇，江浙称之为芭蕉扇。六七十年代，人们最常用的就是这种，似圆非圆，轻巧又便宜的蒲扇。　　蒲扇流传至今，我的记忆中，它跨越了半个世纪，也走过了我们的半个人生的轨迹，携带着特有的念想，一年年，一天天，流向长长的时间隧道，袅Feulgen反应和Brachet反应镜头编号ABCDEF标本明暗背景明暗图象清晰否镜头类型（明反差、暗反差和普通物镜三种）40×20×NH20×10×40×NH

3、40×PL负相差物镜（Negative　contrast）用缩写字母“N”表示，正相差物镜（Positive contrast）用缩写字母“P”表示，由于吸收膜对通过它的光线的透过率不同，可分为高、中、低及低低，如Olympus光的透过率分为：7%、15%、20%、40%四个等级，因此分为高（High略写为H），中（Medium略写为M），低（Low略写为L）及低低（Low—Low略写成LL）四类，构成了负高（NH）、负中（NM）、正低（PL）和正低低（PLL）四种类型相差物镜，这些字母符号都写在相差物镜的外壳上。可根据被检物体的特性来选择使用不同类型的相差物镜。实验二细

4、胞化学多糖的显示——PAS反应核酸(DNA及RNA)的显示法细胞化学是利用特殊的试剂与细胞的特定成分其化学变化引起颜色反应，并用显微镜鉴别所示物质成分的性质和位置的方法。（三）实验操作1、取马铃薯块茎切成薄片，浸入过碘酸溶液10分钟；2、用70％的酒精冲洗1次；3、将薄片放入Schiffer试剂中20－25分钟；4、取出放入还原液1分钟；5、70％的酒精冲洗1次；6、将薄片放在载玻片上吸去酒精，加上盖玻片，镜下观察。实验结果：块茎组织细胞内可见到紫红色或深红色淀粉颗粒。（四）作业1、写出PAS反应的试验原理，绘制实验结果，并描述。2、对于PAS反应的对照实验，你认为应该怎

5、样设计，请写出完整的实验步骤。二、核酸(DNA及RNA)的显示法（一）实验目的（二）实验原理（三）实验操作（四）作业（二）实验原理1、Feulgen反应的原理根据DNA经弱酸水解后，打开了嘌呤碱基和脱氧核糖连接的键，在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。这些醛基就在原位与Schiff试剂结合，形成紫红色的化合物。所以凡有DNA的部位，就呈现为紫红色。2、Brachet反应的原理利用核酸分子上的磷酸根和碱性染料形成盐键而在原位沉淀显色的原理，根据DNA和RNA对碱性染料的亲合力有差别，用Unna试剂进行选择性染色是显示核酸的方法之一。在Unna试剂中甲基绿与空间构型完整的DNA亲

6、和力高，并且甲基绿分子中的两个含N基团带正电荷正好与DNA分子的负电基团相结合，这样DNA被Unna试剂中的甲基绿染成绿色或蓝绿色。而RNA则被Unna试剂中的派咯宁（PyroninG）染成红色。甲基绿派洛宁（三）实验操作①取小麦根尖、蚕豆根尖和洋葱内表皮于浸入预热至60℃的1NHcl中水解，时间分别为8分钟、2分钟、10min。②转入Schiff液中染20—25min，待根尖变为深红色；③在新配亚硫酸水中洗两次，每次1min；④水洗2min，在载玻片上切下深红色根尖备用；⑤加一滴45％HAc于载片上，将根尖放入，加上盖玻片压片，轻轻敲打，镜下观察。1、Feu1gen反应

7、2、Brachet反应撕取洋葱鳞茎内表皮一块置载玻片上；加一滴Unna试剂，染30min；用自来水冲洗1次，加上盖玻片，用滤纸吸干水分，镜下观察。在显微镜下可观察到DNA所在的核和染色体染成绿色或蓝绿色，含有大量RNA的核仁呈鲜红色，含有RNA的细胞质呈淡红色。（四）作业分别写出Feulgen反应和Brachet反应的原理，并分别绘图描述所观察到的试验结果。比较洋葱表皮细胞经Feulgen反应和Brachet反应后显色的差异，说明产生差异的原因。蚕豆根尖细胞Feulgen反应细胞核（紫红色）核仁（无色）小麦根尖细胞Feulge