[课件]第17课基因工程及其应用

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1、第六章第二节基因工程及其应用基因工程技术的发明1982年由美国华盛顿大学Palmiter等报告的“超级小鼠”。他们将大鼠生长激素基因导入小鼠受精卵，所生7只子代小鼠中有6只生长加快，体重明显增加，这就是所谓的“超级小鼠”诞生了。“超级小鼠”的出现轰动了整个生命科学界，标志着哺乳动物基因工程的成熟。从大肠杆菌说起大肠杆菌能合成人的胰岛素吗？能合成干扰素吗？从大肠杆菌说起－－胰岛素每100kg猪或牛的胰腺中提取4－5g胰岛素；1979年，将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌内获得表达；2000L培养液提取100g胰岛素，相当于2吨猪胰腺中提取的量。1982年，美国一家基

2、因公司用基因工程方法生产的胰岛素投入市场，售价降低了30%－50%。干扰素是病毒侵入细胞后产生的一种糖蛋白。干扰素几乎能抵抗所有病毒引起的感染，是一种抗病毒的特效药。此外干扰素对治疗某些癌症和白血病也有一定疗效。传统的干扰素生产方法是从人血液中的白细胞内提取，每300L血液只能提取出1mg干扰素。1980－1982年，科学家用基因工程方法在大肠杆菌内获得了干扰素，1KG培养物中可以得到20－40mg干扰素，1987年上述干扰素大量投放市场。从大肠杆菌说起－－干扰素基因工程又叫做基因_____技术或__________技术。按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以___________

3、，然后放到另一种生物的细胞里，______地改造生物的遗传性状。基因工程概念拼接DNA重组修饰改造定向操作水平：DNA分子水平操作环境：生物体外结果：定向地改造生物的性状，获得人类所需要的品种。原理：基因重组一种限制酶只能识别___种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子的酶。基因的“剪刀”基因工程的工具限制性内切酶1什么叫黏性末端？被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。两种来源不同的DNA用______限制酶切割后，末端可以互相黏合，这种黏合只能使互补的碱基连接起来，而DNA骨架上的缺口，需要靠DNA连接酶“缝合”

4、。基因的“针线”——DNA连接酶同种质粒是存在于细菌细胞质中，能_______的很小的____的DNA分子。基因的运输工具——目前常用的运载体有________________________。运载体质粒、噬菌体、动植物病毒自主复制环状大肠杆菌的质粒：最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因，如四环素的标记基因。质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，但复制只能在宿主细胞内进行。质粒的特点1、细胞染色体（或拟核DNA分子）外能自主复制的小型环状DNA分子；2、质粒的存在对宿主细胞无影响；3、质粒的复制只能在宿主细胞内完成。1.以下说法正确的是（）A、所有的限制酶只能识别一种特定的核

5、苷酸序列B、质粒是基因工程中唯一的运载体C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D、DNA连接酶使黏性末段的碱基之间形成氢键C练习2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是A、能复制（）B、有多个限制酶切点C、具有标记基因D、它是环状DNAD练习3.有关基因工程的叙述中，错误的是（）A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状，培育生物新品种B、重组DNA的形成在细胞内完成C、目的基因须由运载体导入受体细胞D、质粒都可作为运载体BD练习尝试标出下列序列受EcoRI限制酶作用的切点CTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATTGGCATCTTAAAA

6、TTCCGTAGGGCATCTTAAAATTCCGTAGCTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATT甲DNA片段乙DNA片段GAATTCCGTAGAATTCGGATTCTTAAGGCATCTTAAGCCTAAGGCATCTTAAAATTCCGTAG1、_____目的基因2、目的基因与运载体______3、将目的基因_____受体细胞4、目的基因的_________基因工程的基本操作步骤表达与检测导入结合提取DNA质粒提供质粒细菌供体细胞同种限制酶DNA连接酶重组DNA（重组质粒）目的基因的提取、与运载体的结合目的基因导入受体细胞、目的基因的表达重组DNA（重组质粒）

7、重组质粒DNA受体细胞大肠杆菌枯草杆菌酵母菌动植物细胞导入增殖目的基因产物繁殖速度快将每个受体细胞单独培养形成菌落，检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落，保留有表达产物的进一步培养、研究。无表达产物无表达产物有表达产物无表达产物巩固练习⒈要使目的基因与对应的载体重组，所需的两种酶是（）①限制酶　　　②连接酶　　③解旋酶　　　④还原酶　　　Ａ．①②　　　Ｂ．③④　　Ｃ．①④　　Ｄ