无菌室的使用与管理制度.doc

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1、XX医用设备有限公司文件编号XX-XX无菌室的使用与管理制度第B版发文号编制人日期修改状态审核人日期页码共5页批准人日期文件修改记录修改单号修改页码修改状态修改人审核人批准人生效日期5无菌室的使用与管理制度XX-XX一、无菌室的使用1、无菌室应保持清洁整齐，室内仅存放必须的检验用具如酒精灯、酒精棉、打火机、镊子、接种针、接种环、玻璃铅笔等。不要放与检测无关的物品。2、室内检验用具及凳桌等保持固定位置，不随便移动。3、每周用84消毒液水溶液擦拭工作台、门、窗、桌、椅及地面，然后用有效氯浓度1000mg/L的溶液喷雾消毒空气，最后紫外

2、灯杀菌半小时。4、定期检查室内空气无菌状况，细菌数应控制在10个以下，发现不符合要求时，应立即彻底消毒灭菌。/无菌室无菌程度的测定方法：取普通肉汤琼脂平板、改良马丁培养基平板各3个（平板直径均9厘米），置无菌室各工作位置上，开盖曝露半小时，然后倒置进行培养，测细菌总数应置37℃温箱培养48小时；测霉菌数则应置27℃温箱培养5天。细菌`霉菌总数均不得超过10个为。5、无菌室杀菌前，应将所有物品置于操作之部位（待检物例外），然后打开紫外灯杀菌30分钟，时间一到，关闭紫外灯待用。6、进入无菌室前，必须于缓冲间更换消毒过的工作服、工作帽及

3、工5作鞋。7、操作应严格按照无菌操作规定进行，操作中少说话，不喧哗，以保持环境的无菌状态。8、高压蒸汽灭菌:工作服、口罩、稀释液等，置高压杀菌锅内，一般采用121℃灭菌半小时,当然不同的培养基有不同的要求,应分别处理。9、火焰灭菌：接种针、接种环等可直接火焰灭菌。10、高温干燥灭菌：各种玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃灭菌2小时。11、一般消毒:无菌室内的凳、工作台、试管架、天平、待检物容器或包装均无法进行灭菌，必须用其他方法进行消毒处理，采用84消毒液擦拭消毒，工作人员的手也用此法进行消毒。12、空气的消毒：开启紫外

4、灯照射30―60分钟即可。二、无菌室的准备工作使用方法1、先进行无菌室空间的消毒，开启紫外灯30―60分钟。2、检验用的有关器材，搬入无菌室前必须分别进行灭菌消毒。3、操作人员必须将手清洗消毒，穿戴好无菌工作衣、帽和鞋，才能进入无菌室。4、进入无菌室后再一次消毒手部，然后才进行检验操作。三、无菌室操作过程注意事项1、5动作要轻，不能太快，以免搅动空气增加污染；玻璃器皿也应轻取轻放，以免破损污染环境。2、操作应在近火焰区进行。3、接种环、接种针等金属器材使用前后均需灼烧，灼烧时先通过内焰，使残物烘干后再灼烧灭菌。4、使用吸管时，切勿

5、用嘴直接吸、吹吸管，而必须用洗耳球操作5、观察平板时不好开盖，如欲沾取菌落检查时，必需靠近火焰区操作，平皿盖也不能大开，而是上下盖适当开缝。6、进行可疑致病菌涂片染色时，应使用夹子夹持玻片，切勿用手直接拿玻片，以免造成污染，用过的玻片也应置于消毒液中浸泡消毒，然后再洗涤。7、工作结束，收拾好工作台上的样品及器材，最后用消毒液擦拭工作台。四、无菌室管理规定1、无菌室地面、台面、其它表面每日晨擦拭1次。超净台每日晨75%酒精擦拭超净台消毒，每次使用前准备好物品，将超净台紫外灭菌30分钟后方可使用。2、  从室外带入无菌室内的所有物品表

6、面要用75%酒精或紫外照射预先消毒。无菌操作前75%酒精消毒手掌、手背。整个操作严格执行无菌操作。3、每次使用后，台内物品全部取出并用消毒液喷洒消毒用后的物品归位，垃圾带出无菌室。连续使用时间超过1小时，请预约登记。54、 无菌室内定期消毒灭菌：喷洒有效氯浓度1000mg/L的溶液擦洗桌面、凳子，无菌室内喷雾消毒后，紫外灭菌30分。每周一次。5、无菌室内无菌状况定期检测：灭菌后的接种室内桌上和桌下各放一套培养基平皿，暴露15分钟，盖上，37℃培养24小时，每个平皿的菌落≤4，则认为效果良好，否则需延长照射时间或加强其它措施。每周一

7、次。6、灭菌后物品放在指定位置，注明灭菌日期，高压灭菌物品可存放7-14天，过期不能再用，需重新包装灭菌。7、 所有准备进入无菌室工作的人员必需首先了解细胞培养的基本要求和操作规范，并进行必要的培训。 5