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1、2021届高考二轮复习专题突破专题六选修部分第一讲选修1:生物技术实践（二）四、两种纯化细菌方法的辨析比较项目平板划线法稀释涂布平板法关键操作接种环在固体培养基表面连续划线①一系列的梯度稀释②涂布平板法操作注意事项每次划线前后均需灼烧接种环稀释度要足够高,为确保实验成功可以适当增加稀释度的范围优点可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落既可以获得单细胞菌落,又能对微生物进行计数缺点不能对微生物计数操作复杂,需要涂布多个平板要点重整五、血红蛋白的提取和分离1.蛋白质的分离(1)原理:蛋白质各种特性的差异,如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸
2、附性质和对其他分子的亲和力等,可以用来分离不同种类的蛋白质。(2)分离方法a.凝胶色谱法:是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。b.电泳法:电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。常用的电泳方法有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。(3)实例——血红蛋白的提取和分离2.“血红蛋白的提取和分离”实验的注意事项(1)红细胞的洗涤:洗涤次数不能过少,否则无法除去血浆蛋白;要低速、短时离心,否则会使白细胞等一同沉淀,达不到分离的效果。(2)凝胶的预处理:用沸水浴法不但节约时间,而且可以除去凝胶中可能带有的微生物,排除胶粒内的空气。(3)色谱柱的装填:装
3、填时尽量紧密,减小颗粒间隙;无气泡;洗脱液不能断流。(4)色谱柱成功的标志:红色区带均匀一致地移动。六、植物有效成分的提取和分离比较提取和分离的物质玫瑰精油柑橘皮中的芳香油胡萝卜素分离方法和原理水蒸气蒸馏:利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来压榨法:通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油萃取法:使芳香油溶解在有机溶剂中,蒸发溶剂获得芳香油适用范围适于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油适于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取适用范围广,要求原料的颗粒要尽可能细小,能充分浸泡在有机溶剂中局限性水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题分离较为困难,出油率相对较低使用
4、的有机溶剂处理不当会影响芳香油的质量4.(2020·全国Ⅱ卷)研究人员从海底微生物中分离到一种在低温下有催化活性的α-淀粉酶A3,并对其进行了研究。回答下列问题:(1)在以淀粉为底物测定A3酶活性时,既可检测淀粉的减少,检测应采用的试剂是,也可采用斐林试剂检测的增加。(2)在A3的分离过程中可采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度,通常会在凝胶中添加SDS,SDS的作用是和。考向4固定化酶技术和蛋白质的纯度鉴定碘液还原糖(或葡萄糖)消除蛋白质所带净电荷对迁移率的影响使蛋白质发生变性素养提升(3)本实验中,研究人员在确定A3的最适pH时使用了三种组分不同的缓冲系统,
5、结果如图所示。某同学据图判断,缓冲系统的组分对酶活性有影响,其判断依据是_________________________________。(4)在制备A3的固定化酶时,一般不宜采用包埋法,原因是(答出1点即可)。在pH相同时,不同缓冲系统条件下酶分子体积小,容易从包埋材料中漏出下所测得的相对酶活性不同【解析】本题主要考查淀粉的检测、蛋白质的提取和分离以及固定化酶等相关知识,考查学生的实验与探究能力。(1)该酶的底物是淀粉,用于检测淀粉的试剂是碘液;淀粉酶可将淀粉水解成还原糖(葡萄糖),用于检测还原糖的试剂是斐林试剂。(2)在蛋白质的提纯过程中,在凝胶中要添
6、加SDS,SDS的作用是消除蛋白质所带净电荷对迁移率的影响和使蛋白质发生变性。(3)本实验中有三种缓冲系统,从题图可以看出,当pH相同时,在三种缓冲系统条件下测得的相对酶活性不同,说明缓冲系统的组分会影响酶的活性。(4)由于酶分子较小,因此固定化酶分子时不适合采用包埋法,否则酶分子会从包埋材料中漏出。5.绿色植物甲含有物质W,该物质为无色针状晶体,易溶于极性有机溶剂,难溶于水,且受热、受潮易分解。其提取流程为:植物甲→粉碎→加溶剂→振荡→收集提取液→活性炭处理→过滤去除活性炭→蒸馏(含回收溶剂)→重结晶→成品。回答下列问题:(1)在提取物质W时,最好应选用的
7、一种原料是(填“高温烘干”、“晾干”或“新鲜”)的植物甲,不宜选用其他两种的原因是。考向5植物有效成分的提取高温烘干过程中,植物甲中的物质W易被破坏;新鲜的植物甲含水量高,晾干用于提取的极性有机溶剂会被水稀释,进而降低对物质W的提取效果(2)提取物质W时,振荡的作用是。(3)活性炭具有很强的吸附能力,在提取过程中,用活性炭处理提取液的目的是。(4)现有丙酮(沸点56℃)、乙醇(沸点约78℃)两种溶剂,在提取物质W时,应选用丙酮作为提取剂,理由是。(5)该实验操作过程中应注意的事项是(答出两点即可)。在温度较低的情况下操作;防火去除提取液中的色素丙酮的沸点低于
8、乙醇的沸点,蒸馏时物质W分解较少使原料和溶剂充分混匀
